Charakterisierung natürlicher Bakterienpopulationen mit physiologischen und molekularbiologischen Techniken:
Gespeichert in:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Konstanz
Hartung-Gorre
1994
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Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schriftenreihe: | Konstanzer Dissertationen
Bd. 439 |
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | Zugl.: Konstanz, Univ., Diss., 1994 |
Beschreibung: | 151 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
VI
ZUSAMMENFASSUNG
VIII
1.
EINLEITUNG
1
1.1
OXIDATION
VON
ATMOSPHAERISCHEM
WASSERSTOFF
1
1.2
H2-OXIDIERENDE
BAKTERIEN
2
1.3
HYDROGENASEN
4
1.4
ZIELE
DER
ARBEIT
8
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
9
2.1
VERWENDETE
BAKTERIENSTAEMME
UND
KULTURBEDINGUNGEN
9
2.1.1
HETEROTROPHES
WACHSTUM
9
2.1.2
AUTOTROPHES
WACHSTUM
11
2.1.3
VERWENDETE
CYANOBAKTERIEN
UND
SULFATREDUZIERER
11
2.1.4
ANZUCHT
DER
TRANSFORMIERTEN
E.
CO//-STAEMME
12
2.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE
TECHNIKEN
12
2.2.1
PRAEPARATION
BAKTERIELLER
GESAMT-DNA
13
2.2.2
DNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
14
2.2.3
AGAROSE-GEL-ELEKTROPHORESE
14
2.2.4
SOUTHERN-BLOT
15
2.2.5
DOT-BLOT
15
2.2.6
KOLONIEHYBRIDISIERUNG
16
2.2.7
PRAEHYBRIDISIERUNG
UND
HYBRIDISIERUNG
16
2.2.8
GENSONDEN
18
2.2.9
PCR-REAKTION
23
2.2.10
KLONIERUNG
VON
PCR-PRODUKTEN
25
2.2.11
SEQUENZIERUNG
DER
KLONIERTEN
PCR-PRODUKTE
28
2.2.12
QUANTITATIVE
PCR
30
2.3
PHYSIOLOGISCHE
FAERBEMETHODEN
32
2.3.1
BENZYLVIOLOGEN-FAERBUNG
32
2.3.2
GRAM-FAERBUNG
33
2.4
BEARBEITUNG
VON
BOEDEN
34
2.4.1
BESCHREIBUNG
DER
VERWENDETEN
BOEDEN
34
2.4.2
ERMITTLUNG
VON
BAKTERIENZAHLEN
IN
BOEDEN
35
2.4.3
DETEKTION
VON
HYDROGENASEHALTIGEN
BAKTERIEN
IN
DEN
VERWENDETEN
BOEDEN
38
2.4.4
DNA-PRAEPARATION
AUS
BOEDEN
39
2.5
VERWENDETE
CHEMIKALIEN
UND
GASE
39
3.
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
40
3.1
ENTWICKLUNG
VON
MOLEKULARBIOLOGISCHEN
SYSTEMEN
ZUM
NACHWEIS
HZ-OXIDIERENDER
UND
-PRODUZIERENDER
YY
BAKTERIEN
(REINKULTURVERSUCHE)
40
3.1.1
NACHWEIS
HYDROGENASEHALTIGER
BAKTERIEN
IN
SOUTHERN
BLOT-HYBRIDISIERUNGSEXPERIMENTEN.
BESTIMMUNG
SPEZIFISCHER
HYBRIDISIERUNGSBEDINGUNGEN
42
3.1.2
KONTROLLE
DER
ERMITTELTEN
SPEZIFISCHEN
HYBRIDISIERUNGS
BEDINGUNGEN
ZUM
NACHWEIS
HYDROGENASEHALTIGER
BAKTERIEN
IN
DOT-BLOT-HYBRIDISIERUNGSEXPERIMENTEN
47
3.1.3
ANWENDUNG
DES
HYBRIDISIERUNGSSYSTEMS
ZUM
NACHWEIS
HYDROGENASEHALTIGER
BAKTERIEN
IN
KOLONIEHYBRIDISIERUNGEN
50
3.1.4
HYBRIDISIERUNGEN
MIT
MARKIERTEN
OLIGONUCLEOTIDEN
ALS
SONDEN
53
3.1.5
NACHWEIS
VON
HYDROGENASEHALTIGEN
BAKTERIENREINKULTUREN
DURCH
NACHWEIS
DER
PHYSIOLOGISCHEN
HYDROGENASEAKTIVITAET
UEBER
BENZYLVIOLOGEN-REDUKTION.
VERGLEICH
MIT
DNA-HYBRIDISIERUNGS
VERSUCHEN
54
3.1.6
NACHWEIS
HYDROGENASEHALTIGER
BAKTERIEN
DURCH
AMPLIFIZIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
SPEZIFISCHER
HYDROGENASE-GENFRAGMENTE
DURCH
PCR
57
3.1.7
DISKUSSION
62
3.2
ANWENDUNG
VON
MOLEKULARBIOLOGISCHEN
UND
PHYSIOLOGISCHEN
METHODEN
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
HYDRO
GENASEHALTIGER
BAKTERIEN
IN
VERSCHIEDENEN
BOEDEN
73
3.2.1
VORVERSUCHE
ZUR
DETEKTION
VON
BAKTERIEN
IN
BOEDEN
MITTELS
KOLONIEHYBRIDISIERUNG
74
3.2.2
ERMITTLUNG
VON
GESAMTBAKTERIENZAHLEN,
KNALLGASBAKTERIEN
ZAHLEN
UND
ANZAHL
AN
HYDROGENASEHALTIGEN
BAKTERIEN
IN
VER
SCHIEDENEN
BOEDEN
77
3.2.3
BESTIMMUNG
VON
GESAMTZELLZAHL,
KNALLGASBAKTERIENZAHL
UND
ANZAHL
AN
HYDROGENASEHALTIGEN
BAKTERIEN
IN
UNTER
KNALLGAS
ATMOSPHAERE
VORINKUBIERTEN
BOEDEN
81
3.2.4
CHARAKTERISIERUNG
EINIGER
DURCH
KOLONIEHYBRIDISIERUNG
DETEKTIERTER
HYDROGENASEHALTIGER
BAKTERIEN
83
3.2.5
DISKUSSION
88
3.3
AMPLIFIZIERUNG
VON
A.
EUTROPHUS
H16-AEHNLICHEN
HYDROGENASE
GENSEQUENZEN
AUS
UMWELT-DNA
97
3.3.1
VERSUCH
DER
DETEKTION
VON
/1/CA/ZGENES-AEHNLICHEN
HYDRO
GENASE-GENSEQUENZEN
IN
EINEM
GARTENBODEN
(ERLANGEN)
97
3.3.2
DETEKTION
VON
/1/CA/ZGENES-AEHNLICHEN
HYDROGENASE-GENSE
QUENZEN
IN
DNA
AUS
DER
RHIZOSPHAERE
VON
REIS
99
3.3.3
DISKUSSION
107
4.
LITERATURVERZEICHNIS
113
5.
ANHANG
126
5.1
SEQUENZVERGLEICHE
UND
AEHNLICHKEITSANALYSEN
126
5.1.1
DIE
SEQUENZIERTEN
PCR-FRAGMENTE
DER
BAKTERIEN
K13
UND
R9
126
5.1.2
DIE
SEQUENZIERTEN
PCR-FRAGMENTE
"REISL"
UND
"
REIS2"
AUS
REISRHIZOSPHAEREN-DNA
136
5.2
STATISTISCHE
AUSWERTUNGEN
147 |
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