Untersuchungen zur Genstruktur des Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierenden Faktors und des Interleukins-3 bei Hämoblastosen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
NORMALE
REGULATION
DER
HAEMATOPOIESE
.
2
1.2
HAEMATOPOIETISCHE
WACHSTUMSFAKTOREN
.
5
1.3
INTERLEUKIN-3
(IL-3)
.
9
1.4
GRANULOZYTEN-MAKROPHAGEN-KOLONIE-STIMULIERENDER
FAKTOR
(GM-CSF)
.
11
1.5
ZYTOGENETISCHE
UND
MOLEKULARGENETISCHE
VERAENDERUNGEN
BEI
MYELOISCHEN
SYSTEMERKRANKUNGEN
.
15
1.5.1
MYELODYSPLASTISCHES
SYNDROM
(MDS)
.
18
1.5.2
AKUTE
MYELOISCHE
LEUKAEMIE
(AML)
.
22
1.5.3
MYELOPROLIFERATIVES
SYNDROM
(MPS)
.
25
1.5.4
CHRONISCHE
MYELOISCHE
LEUKAEMIE
(CML)
.
25
2.
PROBLEMSTELLUNG
.
27
3.
MATERIAL
UND
GERAETE
.
28
3.1
MATERIALIEN
UND
HERSTELLER
.
28
3.1.1
BAKTERIEN
.
28
3.1.2
VEKTOREN
.
28
3.1.3
ENZYME
.
29
3.1.4
SONSTIGE
CHEMIKALIEN
.
29
3.1.5
WEITERE
HILFSMITTEL
.
31
3.2
GERAETE
.
32
3.3
-
LOESUNGEN
.
34
3.3.1
ISOLIERUNG
MONONUKLEAERER
ZELLEN
.
34
3.3.2
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNS
.
34
3.3.3
AGAROSE-GEL-ELEKTROPHORESE
.
35
3.3.4
"MINIPRAEPARATION
"
VON
PLASMID-DNS
.
'.
35
3.3.5
CIRCLEPREPYYKIT
ZUR
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNS
.
36
3.3.6
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNS-PROBEN
IN
GESCHMOLZENER
AGAROSE
.
37
3.3.7
DNS-BLOTTING
AUF
NYLONMEMBRANEN
.
38
3.3.8
HYBRIDISIERUNG
VON
AUF
NYLONMEMBRANEN
IMMOBILISIERTER
DNS.
38
3.4
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
40
3.4.1
NORMALPERSONEN
.
40
3.4.2
PATIENTEN
.
40
4.
METHODEN
.
41
4.1
MATERIALGEWINNUNG
.
41
4.1.1
BLUTENTNAHME
.
YY41
4.1.2
KNOCHENMARKSPUNKTION
.
41
4.2
ISOLIERUNG
DER
MONONUKLEAEREN
ZELLEN
.
41
4.3
DNS-ISOLIERUNG
(SALZMETHODE)
.
42
4.4
DNS-BLOTTING-VERFAHREN
.
43
4.4.1
FRAGMENTIEREN
DER
DNS
MIT
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
.
43
4.4.2
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
44
4.4.3
DNS-BLOTTING
.
44
4.5
GEWINNUNG
DER
CDNS-PROBEN
.
45
4.5.1
PRAEPARATION
KOMPETENTER
BAKTERIEN
.
45
4.5.2
TRANSFORMATION
KOMPETENTER
IM
803-BAKTERIEN
MIT
PHB
327
(IL-3-CDNS)
.
46
4.5.3
"
MINIPRAEPARATION*
VON
PLASMID-DNS
.
46
4.5.4
CIRCLEPREPYY
KIT
.
47
4.5.5
LOW
MELTING
GELELEKTROPHORESE
.
48
4.6
RADIOAKTIVES
MARKIEREN
DER
CDNS-PROBEN
NACH
DER
RANDOM
PRIMED
METHODE
.
48
4.7
HYBRIDISIERUNG
MIT
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
DNS-PROBEN
.
49
4.8
ENTFERNEN
DER
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
PROBEN
VON
DEN
NYLONMEMBRANEN
("STRIPPING")
.
51
5.
ERGEBNISSE
.
52
5.1
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
52
5.1.1
NORMALPERSONEN
.
52
5.1.2
PATIENTEN
.
54
5.2
IL-3-CDNS-PROBE
.
61
5.3
GM-CSF-CDNS
.
66
5.4
HYBRIDISIERUNG
DER
GENOMISCHEN
DNS
MIT
DEN
CDNS
.
71
5.4.1
MIT
ECORI
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
IL-3-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
71
5.4.2
MIT
HINDIN
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
IL-3-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
75
5.4.3
MIT
BGLLL
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
IL-3-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
75
5.4.4
MIT
TAQL
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
IL-3-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
81
5.4.5
MIT
ECORI
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
GM-CSF-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
84
5.4.6
MIT
HINDIN
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
GM-CSF-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
87
5.4.7
MIT
BGUI
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
GM-CSF-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
87
5.4.8
MIT
TAQL
FRAGMENTIERTE
UND
MIT
GM-CSF-CDNS
HYBRIDISIERTE
DNS
.
91
6.
DISKUSSION
.
96
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
102
8.
LITERATUR
.
103 |
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