In-situ-Hybridisierung:
Gespeichert in:
| Format: | Buch |
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| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Heidelberg [u.a.]
Spektrum, Akad. Verl.
1994
|
| Schriftenreihe: | Labor im Fokus
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 144 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALT
VORWORT
9
DANKSAGUNG
10
ABKUERZUNGEN
11
1.
IN
SIFTT-HYBRIDISIERUNG:
EINE
EINFUEHRUNG
1.1.
UEBERBLICK
13
1.2
ZIEL
DES
BUCHES
14
2.
EINE
AUSWAHL
IN
SITU
LOKALISIERTER
NUCLEINSAEURESEQUENZEN
2.1
DNA-SEQUENZEN
17
2.1.1
EINZELKOPIE
UND
SCHWACH
REPETITIVE
SEQUENZEN
18
2.1.2
REPETITIVE
SEQUENZEN
19
2.1.3
NACHWEIS
SPEZIFISCHER
CHROMOSOMEN
UND
GENOME
20
2.2
RNA-SEQUENZEN
23
2.2.1
UNTERSUCHUNGEN
AN
TIERISCHEN
ORGANISMEN
24
2.2.2
UNTERSUCHUNGEN
AN
PFLANZEN
26
2.3
NACHWEIS
VON
VIRUSSEQUENZEN
27
2.4
LITERATUR
29
3.
DIE
PRAEPARATE
3.1
GEWEBEFIXIERUNG
33
3.2
OBJEKTTRAEGER
UND
ELEKTRONENMIKROSKOPGITTER
34
3.3
HERSTELLUNG
VON
PRAEPARATEN
36
3.3.1
ZELLSPREITUNGEN
36
3.3.2
GEWEBESCHNITTE
40
3.3.3
GANZKOERPERPRAEPARATIONEN
44
3.4
VORBEHANDLUNG
DES
MATERIALS
45
3.5
LITERATUR
46
6
IN
.SW-HYBRIDISIERUNG
4.
NUCLEINSAEURESONDEN,
MARKERMOLEKUELE
UND
MARKIERUNGSTECHNIKEN
4.1
SONDEN
49
4.1.1
KLONIERTE
SEQUENZEN
51
4.1.2
SYNTHETISCHE
OLIGONUCLEOTIDE
52
4.1.3
GENOME
ALS
SONDEN
52
4.1.4
DURCH
POLYMERASEKETTENREAKTION
HERGESTELLTE
DNA-SONDEN
53
4.2
MARKIERUNG
VON
NUCLEINSAEUREN
53
4.2.1
ENZYMATISCHE
MARKIERUNG
-
MARKERMOLEKUELE
54
4.2.2
ENZYMATISCHE
MARKIERUNG
-
METHODEN
57
4.2.3
UEBERPRUEFEN
DER
MARKIERUNG
69
4.2.4
CHEMISCHE
MARKIERUNG
70
4.2.5
PRIMED
IN
.SW-MARKIERUNG
71
4.3
LITERATUR
72
5.
DENATURIERUNG,
HYBRIDISIERUNG
UND
WASCHEN
5.1
THEORIE
75
5.2
STRINGENZ
77
5.3
DENATURIERUNG
78
5.4
HYBRIDISIERUNG
80
5.4.1
HYBRIDISIERUNGSGESCHWINDIGKEIT
81
5.5
WASCHEN
NACH
DER
HYBRIDISIERUNG
81
5.6
LITERATUR
82
6.
NACHWEIS
DER
HYBRIDISIERUNGSSTELLEN
6.1
NACHWEIS
RADIOAKTIV
MARKIERTER
SONDEN
83
6.2
NACHWEIS
NICHTRADIOAKTIV
MARKIERTER
SONDEN
85
6.2.1
IMMUNCYTOCHEMIE
85
6.2.2
BIOTIN-(STREPT-)AVIDIN
87
6.3
SIGNALGEBENDE
SYSTEME
88
6.3.1
FLUORESZENZFARBSTOFFE
88
6.3.2
ENZYMATISCHE
REPORTERSYSTEME
90
6.3.3
METALL-REPORTERSYSTEME
FUER
LICHT
UND
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
92
6.4
MEHRFACHNACHWEISE
93
6.5
LITERATUR
95
7.
BILDGEBENDE
VERFAHREN
UND
AUSWERTUNG
DES
SIGNALS
7.1
AUSWAHL
DES
VERFAHRENS
97
7.2
LICHTMIKROSKOPIE
98
7.2.1
VOR
DER
IN
.SHU-HYBRIDISIERUNG
98
INHALT
7
7.2.2
ABBILDUNG
DES
IN
.SZTZZ-HYBRIDISIERUNGSSIGNALS
IM
DURCHLICHTMIKROSKOP
98
7.2.3
AUFLICHTMIKROSKOPIE
99
7.2.4
AUFLICHT-FLUORESZENZMIKROSKOPIE
100
7.2.5
KONFOKALE
RASTERLASERMIKROSKOPIE
103
7.2.6
AUFNAHME
VON
LICHTMIKROSKOPISCHEN
BILDERN
105
7.3
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPIE
107
7.4
QUANTITATIVE
AUSWERTUNG
DER
SIGNALE
107
7.5
LITERATUR
108
8.
ARBEITSVORSCHRIFTEN
FUER
DIE
IN
.WYW-HYBRIDISIERUNG,
SCHWIERIGKEITEN
UND
KONTROLLEN
8.1
RNA:RNA-ZN
SZ7Z/-HYBRIDISIERUNG
112
8.1.1
VORBEHANDLUNG
112
8.1.2
HYBRIDISIERUNGSGEMISCH
UND
DENATURIERUNG
BEI
RNA:RNA-ZN
.SW-HYBRIDISIERUNG
113
8.1.3
HYBRIDISIERUNG
DER
RNA-SONDE
115
8.1.4
WASCHSCHRITTE
115
8.2
DNA:DNA-M
SW-HYBRIDISIERUNG
115
8.2.1
VORBEHANDLUNG
115
8.2.2
HYBRIDISIERUNGSGEMISCH
UND
DENATURIERUNG
BEI
DNA:DNA-Z'ZZ
.SW-HYBRIDISIERUNG
117
8.2.3
HYBRIDISIERUNG
DER
DNA-SONDE
118
8.2.4
WASCHSCHRITTE
BEI
DNA:DNA-HYBRIDEN
118
8.3
NACHWEIS
RADIOAKTIV
MARKIERTER
SONDEN:
AUTORADIOGRAPHIE
119
8.4
NACHWEIS
BIOTINMARKIERTER
SONDEN
120
8.5
NACHWEIS
DIGOXIGENINMARKIERTER
SONDEN
122
8.6
ENZYMATISCHE
SYSTEME:
MEERRETTICHPEROXIDASE
123
8.6.1
DAB-REAKTION
UND
AMPLIFIZIERUNG
123
8.7
GEGENFAERBUNGEN
UND
EINSCHLUSSMITTEL
FUER
DIE
DURCHLICHTMIKROSKOPIE
124
8.7.1
CHROMOSOMENPRAEPARATE
124
8.7.2
GEWEBESCHNITTE
125
8.8
GEGENFAERBUNGEN
UND
DARSTELLUNG
VON
FLUORESZENZFARBSTOFFEN
IM
AUFLICHT-FLUORESZENZMIKROSKOP
125
8.8.1
GEGENFAERBUNGEN
-
DAPI
UND
PROPIDIUMIODID
125
8.8.2
ANTIBLEICHMITTEL
126
8.8.3
MIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG
127
8.9
GEGENFAERBUNGEN
FUER
DIE
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
127
8.10
FEHLERSUCHE
128
8.10.1
SCHWACHES
SIGNAL
128
8
IN
STO-HYBRIDISIERUNG
8.10.2
STARKER
HINTERGRUND/UNSPEZIFISCHE
HYBRIDISIERUNG
130
8.10.3
SCHECKIGE
PRAEPARATE
131
8.11
KONTROLLEN
131
8.11.1
NEGATIVKONTROLLEN
132
8.11.2
SPEZIFITAET
DER
SONDE
132
8.11.3
POSITIVKONTROLLEN
132
8.12
SICHERHEIT
133
9.
IN
SITU
-HYBRIDISIERUNG:
EIN
AUSBLICK
IN
DIE
ZUKUNFT
135
ANHANG
137
BEZUGSQUELLEN
FUER
REAGENTIEN
137
ANBIETER
VON
IN
.SZTW-HYBRIDISIERUNGSSYSTEMEN
139
LOESUNGEN
139
INDEX
141 |
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