Isolierung und Charakterisierung einer mikrobiellen Racemase für 5-Alkyl-Hydantoine aus Arthrobacter sp. DSM 3745 und Entwicklung einer Analytik zur Enantiomerentrennung von 5-Alkyl-Hydantoinen mittels Kapillar-Gas-Chromatographie:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
IV
INHALTSVERZEICHNIS
VORWORT
.
I
DANKSAGUNGEN
.
N
EINLEITUNG
.
1
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
.
8
MATERIAL
U.METHODEN
.
11
NOMENKLATUR
UND
MASSEINHEITEN
.
11
MIKROORGANISMEN
.
11
CHEMIKALIEN
.
12
SUBSTRATE
.
12
PUFFER
.
13
NAEHRMEDIEN
.
14
TEIL
I:
ARTHROBACTER
SP.
DSM
3745
.
14
MEDIUM
ZUR
STAMMHALTUNG
AUF
SCHRAEGAGAR
(COTORAS,
1985)
.
14
SPURENSALZLOSUNG
.
14
MINERALSALZMEDIUM
MIT
MQ-ZUSATZ
ZUR
BATCH-KULTIVIERUNG
(STEHR,
1991)
.15
TEIL
II:
PSEUDOMONAS
ACIDOVORANS
DSM
50251
.16
MEDIUM
ZUR
STAMMHALTUNG
AUF
SCHRAEGAGAR
UND
AGARPLATTEN
.16
MEDIUM
FUER
SCHUETTELKULTUREN
.16
ALLANTOINMEDIUM
FUER
VOR
UND
HAUPTKULTUREN
.16
KULTURFUEHRUNG
.
17
TEIL
I:
ARTHROBACTER
SP.
DSM
3745
.17
STAMMHALTUNG
.17
STICKSTOFFKONSERVE
.17
GLYCERINKONSERVE
.17
BEREITSTELLUNG
DES
INOKULUMS
FUER
DIE
BIOREAKTORKULTIVIERUNG
.17
VOR
UND
HAUPTKULTUR
.17
BIOREAKTORKULTIVIERUNG
IM
50-LITER-MASSSTAB
.
18
BESTIMMUNG
VON
WACHSTUMSPARAMETEM
.
19
ZELLDICHTE
.
19
BAKTERIENFEUCHT
UND
BAKTERIENTROCKENMASSE
.
20
SAUERSTOFFVERBRAUCHSRATE
(QO2)
UND
KOHLENDIOXIDBILDUNGSRATE
(QCO2)
.
20
BERECHNUNG
DER
MAXIMALEN
SPEZIFISCHEN
WACHSTUMSRATE
(PMAX)
.
21
INHALTSVERZEICHNIS
V
KULTURFUEHRUNG
.
22
TEIL
II:
PSEUDOMONAS
ACIDOVORANS
DSM
50251
.
22
STAMMHALTUNG
.
22
STICKSTOFFKONSERVE
.
22
SCHRAEGAGAR
.
22
SCHUTTEIKULTUREN
.
22
GEWINNUNG
DER
BIOMASSE
.
22
VORKULTUR
.
22
HAUPTKULTUR
.
23
DARSTELLUNG
VON
L-(-)-ALLANTOIN
.
23
ANALYTIK
.
24
PROTEINBESTIMMUNG
.
24
GLUCOSEBESTIMMUNG
.
25
AMMONIUMBESTIMMUNG
.
25
1H
UND
^C-NMR-SPEKTROSKOPIE
UND
IR-SPEKTREN
.
25
BESTIMMUNG
DES
OPTISCHEN
DREHWINKELS
UND
ENZYMATISCHE
RACEMISIERUNG
VON
(-)-ALLANTOIN
UND
(-)-CITRULLINHYDANTOIN
.
26
HOCHLEISTUNGSFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
(HPLC)
.
27
GASCHROMATOGRAPHIE
.
29
SCHMELZPUNKTBESTIMMUNG
.
29
LOESLICHKEITSUNTERSUCHUNGEN
UND
EXTRAKTIONSVERSUCHE
MIT
ORGANISCHEN
LOESUNGSMITTELN
.
30
LOESLICHKEIT
IN
ORGANISCHEN
LOESUNGSMITTELN
.
30
MAXIMALLOSHCHKEIT
.
30
BESTIMMUNG
DES
EXTRAKTIONSGRADES
.
30
ENANTIOMERENTRENNUNG
MITTELS
KAPILLAR-GAS-CHROMATOGRAPHIE
.
32
AKTIVITAETSBESTIMMUNGEN
.
34
BESTIMMUNG
DER
HYDANTOINASE
UND
CARBAMOYLASE-AKTIVITAET
RUHENDER
ZELLEN
.
34
STANDARDASSAY
ZUR
BESTIMMUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE-AKTIVITAET
.
35
BERECHNUNG
DER
ENZYMATISCHEN
AKTIVITAET
.
37
IMMOBILISIERUNG
.
39
UMPUFFERUNG
.
39
AUFREINIGUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
40
ZELLAUFSCHLUSSMETHODEN
.
40
ZELLAUFSCHLUSS
MIT
DER
RUEHRWERKSKUGELMUEHLE
.
41
ANREICHERUNG
DURCH
FAELLUNGEN
.
43
FEINREINIGUNG
MITTELS
FPLC
(FAST-PROTEIN-LIQUID-CHROMATOGRAHPY)
.
44
KONZENTRIERUNG
DER
PROBEN
.
46
GEFRIERTROCKNUNG
.
46
ULTRAFILTRATION
.
46
SEQUENZIERUNG
.
47
INHALTSVERZEICHNIS
VI
ELEKTROPHORETISCHE
METHODEN
ZUR
ENZYMCHARAKTERISIERUNG
AM
PHAST-SYSTEM
.
48
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
49
SDS-GELELEKTROPHORESE
.
50
NATIVE-GELELEKTROPHORESE
.
52
EICHKITS
ZUR
BESTIMMUNG
DER
MOLMASSEN
UND
DES
ISOELEKTRISCHEN
PUNKTES
.
53
TROCKNEN
DER
GELE
.
53
SCANNEN
DER
GELE
.
53
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSIONEN
.
54
TEIL
I:
ENTWICKLUNG
DER
ANALYTIK
U.
EHERN.
RACEMISIERUNG
.
54
SCHMELZPUNKTBESTIMMUNG
AUSGEWAEHLTER
SUBSTRATE
.
54
AUSWAHL
DER
KAPILLARSAEULE
.
55
LOESLICHKEITSUNTERSUCHUNGEN
.
57
BESTIMMUNG
DER
MAXIMALLOESLICHKEIT
.
57
BESTIMMUNG
DES
EXTRAKTIONSGRADES
.
59
ENANTIOMERENTRENNUNG
MITTELS
KAPILLAR-GAS-CHROMATOGRAPHIE
.
64
CHEMISCHE
RACEMISIERUNG
VON
D-5-IPH
UND
D-5-IBH
.
72
TEIL
II:
PRODUKTION
DER
BIOMASSE,
ENZYMASSAY
UND
ROHEXTRAKT-TESTS
.
75
BIOREAKTORKULTIVIERUNG
.
75
ENTWICKLUNG
DES
ENZYMASSAYS
.
79
NACHWEIS
DER
RACEMASEAKTIVITAET
.
79
ROHEXTRAKTUNTERSUCHUNGEN
.
80
TEIL
III:
ISOLIERUNG
U.
CHARAKTERISIERUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
86
ISOLIERUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
ZELLAUFSCHLUSS
VON
ARTHROBACTER
SP.
DSM
3745
.
86
ZELLAUFSCHLUSS
MIT
DER
RUEHRWERKSKUGELMTIHLE
.
87
ANREICHERUNG
DER
RACEMASE
DURCH
FAELLUNGEN
.
90
FRAKTIONIERTE
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
.
92
FEINREINIGUNG
MITTELS
FPLC
.
95
HYDROPHOBE
INTERAKTIONS-CHROMATOGRAPHIE
(H1C).
95
HIC AN
HILOAD
PHENYL-SEPHAROSE
.
96
IAC
AN
MONO
Q
HR
10/10
.
99
AUFREINIGUNGSSCHEMA
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
.
103
CHARAKTERISIERUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
107
NATIVE
GELELEKTROPHORESE
.
110
SDS-GELELEKTROPHORESE
.
113
SEQUENZIERUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
116
INHALTSVERZEICHNIS
VII
FORTSETZUNG:
CHARAKTERISIERUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
SUBSTRATSPEZIFITAET
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
118
ENZYMKINETIK
.
121
TEMPERATUROPTIMUM
DER
HYDANTOINRACEMASE
.129
PH-OPTIMUM
DER
HYDANTOINRACEMASE
.130
EINFLUSS
VON
EFFEKTOREN
.
132
ZUSAMMENFASSUNG
DER
CHARAKTERISIERUNG
.
135
TEIL
IV:
STABILITAET
U.
IMMOBILISIERUNG
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
137
STABILITAET
DER
HYDANTOINRACEMASE
.
TEMPERATURSTABILITAET
.
137
PH-STABILITAET
.
138
AUFBEWAHRUNGSMETHODEN
.
140
LYOPHILISATION
.140
ULTRAFILTRATION
.
141
IMMOBILISIERUNG
.
141
ENZYMATISCHE
RACEMISIERUNG
VON
L-(-)-ALLANTOIN
.
142
ANZUCHT
UND
DARSTELLUNG
VON
L-(-)-AUANTOIN
.142
ENZYMATISCHE
U.
CHEMISCHE
RACEMISIERUNG
VON
L-(-)-ALLANTOIN
.
143
NATUERLICHE
FUNKTION
UND
BEDEUTUNG
VON
AUANTOIN
.
144
DISKUSSION
.147
ZUSAMMENFASSUNG
.
153
PUBLIKATIONSLISTE
.
155
LITERATURVERZEICHNIS
.
155 |
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| spelling | Lickefett, Holger Verfasser aut Isolierung und Charakterisierung einer mikrobiellen Racemase für 5-Alkyl-Hydantoine aus Arthrobacter sp. DSM 3745 und Entwicklung einer Analytik zur Enantiomerentrennung von 5-Alkyl-Hydantoinen mittels Kapillar-Gas-Chromatographie von Holger Lickefett 1994 VII, 163 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Braunschweig, Techn. Univ., Diss., 1994 Arthrobacter - Hydantoinracemase - Isolierung <Chemie> Hydantoinderivate - Enantiomerentrennung - Kapillargaschromatographie Arthrobacter (DE-588)4278200-4 gnd rswk-swf Kapillargaschromatographie (DE-588)4252082-4 gnd rswk-swf Enantiomerentrennung (DE-588)4135272-5 gnd rswk-swf Hydantoinracemase (DE-588)4292007-3 gnd rswk-swf Isolierung Chemie (DE-588)4122223-4 gnd rswk-swf Hydantoinderivate (DE-588)4330792-9 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Hydantoinderivate (DE-588)4330792-9 s Enantiomerentrennung (DE-588)4135272-5 s Kapillargaschromatographie (DE-588)4252082-4 s DE-604 Arthrobacter (DE-588)4278200-4 s Hydantoinracemase (DE-588)4292007-3 s Isolierung Chemie (DE-588)4122223-4 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006458182&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Lickefett, Holger Isolierung und Charakterisierung einer mikrobiellen Racemase für 5-Alkyl-Hydantoine aus Arthrobacter sp. DSM 3745 und Entwicklung einer Analytik zur Enantiomerentrennung von 5-Alkyl-Hydantoinen mittels Kapillar-Gas-Chromatographie Arthrobacter - Hydantoinracemase - Isolierung <Chemie> Hydantoinderivate - Enantiomerentrennung - Kapillargaschromatographie Arthrobacter (DE-588)4278200-4 gnd Kapillargaschromatographie (DE-588)4252082-4 gnd Enantiomerentrennung (DE-588)4135272-5 gnd Hydantoinracemase (DE-588)4292007-3 gnd Isolierung Chemie (DE-588)4122223-4 gnd Hydantoinderivate (DE-588)4330792-9 gnd |
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