Wechselwirkungen zwischen cerebralen kapillären Endothelzellen und Astrocyten in vitro:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Münster, Univ., Diss., 1994 |
| Beschreibung: | VII, 204 S. Ill., graph. Darst. |
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I NHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. VORWORT UND AUFGABENSTELLUNG
1
2. EINLEITUNG
2
2.1.
ALLGEMEINE EIGENSCHAFTEN DES KAPILLARENDOTHELS
2
2.2. DIE BLUT-HIRN-SCHRANKE DES ZENTRALEN NERVENSYSTEMS VON 3
WIRBELTIEREN
2.2.1. DIE NOTWENDIGKEIT EINER BLUT-HIRN-SCHRANKE 3
2.2.2. DIE STRUKTURELLE BLUT-HIRN-SCHRANKE 4
2.2.3. DIE METABOLISCHE BLUT-HIRN-SCHRANKE 4
2.2.4. SPEZIELLE ENZYME DER METABOLISCHEN BLUT-HIRN-SCHRANKE 8
2.2.4.1. L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE 8
2.2.4.2. ALKALISCHE PHOSPHATASE 9
2.2.4.3. BUTYRYLCHOLINESTERASE
7 9
2.3. EINFLUSS VON ASTROCYTEN AUF DIE DIFFERENZIERUNG DER BLUT-HIRN- 10
SCHRANKE
2.4. NEUROEKTODERMALE ZELLEN DES ZENTRALEN NERVENSYSTEMS 12
2.4.1. DIE FAMILIE DER GLIAZELLEN 13
2.4.1.1. PROTOPLASMATISCHE UND FIBRILLAERE ASTROCYTEN 14
2.4.1.2. ASTROCYTEN
IN VITRO 19
2.4.1.3. EPITHELZELLEN DES
PLEXUS CHOROIDEUS 20
2.4.1.4. ANDERE ASTROCYTENTYPEN 20
2.4.1.5. OLIGODENDROCYTEN 20
2.4.2.
NEURONE 20
2.4.3. ZELLEN NICHTEKTODERMALEN URSPRUNGS 21
2.4.3.1. MIKROGLIA 21
2.4.3.2. PERICYTEN 21
2.5.
MARKER DES ZENTRALEN NERVENSYSTEMS
22
2.6.
IN WFRO-MODELLE DER BLUT-HIRN-SCHRANKE 23
2.6.1.
VERLUST DES BLUT-HIRN-SCHRANKE-PHAENOTYPS IN VITRO 23
2.6.2. COKULTUREN MIT ZELLEN GLIALEN URSPRUNGS 23
2.7. SIGNALTRANSDUKTION 24
2.7.1. INTERZELLULAERE SIGNALTRANSDUKTION 24
2.7.1.1. INDIREKTE SIGNALGEBUNG DURCH SEZEMIERTE CHEMISCHE STOFFE 24
2.7.1.2. DIREKTE SIGNALGEBUNG DURCH PLASMAMEMBRAN-GEBUNDENE MOLEKUELE 24
2.7.1.3. DIREKTE SIGNALUEBERTRAGUNG DURCH GAP JUNCTIONS 25
2.7.2.
INTRAZELLULAERE SIGNALTRANSDUKTION 25
2.7.2.1. DIE CYCLISCHES ADENOSINMONOPHOSPHAT-KASKADE 26
2.7.2.2. DIE CYCLISCHES GUANOSINMONOPHOSPHAT-KASKADE 29
2.7.2.3. DIEPHOSPHATIDYLINOSITOL-KASKADE 30
2.7.2.4. CALCIUM ALS INTRAZELLULAERER SIGNALUEBERTRAEGER 34
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
2.7.2.5. TYROSINKINASEN
3. MATERIALIEN UND METHODEN
3.1. MATERIALIEN
3.1.1. GERAETE
3.1.2. CHEMIKALIEN UND ZELLKULTURMATERIALIEN
3.1.3. ANTISERA UND ANTIKOERPER
3.1.4. ZELLEN
3.1.5. VERBRAUCHSMATERIAL
3.2. ZELLPRAEPARATIONEN
3.2.1. CEREBRALE KAPILLAERE ENDOTHELZELLEN
3.2.2. TYP I - ASTROCYTEN
3.2.3. TYP II - ASTROCYTEN
3.3. ALLGEMEINE KULTIVIERUNGSMETHODEN
3.3.1. KULTURBEDINGUNGEN
3.3.2. PASSAGIEREN VON ZELLEN
3.3.3. KLONIEREN VON ASTROCYTEN
3.3.4. EINFRIEREN UND AUFTAUEN VON ASTROCYTEN
3.3.5. BESTIMMUNG VON ZELLZAHLEN
3.3.6. ANLEGEN EINER GEMISCHTEN COKULTUR ZWISCHEN CEREBRALEN KAPILLAREN
ENDOTHELZELLEN UND ASTROCYTEN
3.3.7. BESCHICHTUNG VON KULTURGEFAESSEN
3.3.7.1. COLLAGEN G
3.3.7.2. COLLAGEN S
3.3.7.3. LAMININ
3.3.7.4. FIBRONECTIN
3.3.7.5. POLY-L-LYSIN
3.3.7.6. POLY-D-LYSIN
3.3.8. MIKROSKOPIE UND FOTOGRAFIE
3.4. SPEZIELLE KULTIVIERUNGSMETHODEN
3.4.1. MEDIEN
3.4.11. CHEMISCH DEFINIERTES MEDIUM
3.4.1.2. SELEKTIVMEDIUM FUER ASTROCYTEN
3.4.1.3. GFAP-STIMULIERENDES MEDIUM FUER ASTROCYTEN
3.4.1.4. KULTIVIERUNG VON NEUROBLASTOMAZELLEN
3.4.2. VERSUCHE ZUR CHARAKTERISIERUNG DER INDUKTIONSFAEHIGKEIT VON
ASTROCYTEN IN GEMISCHTEN COKULTUREN
3.4.2.1. VERSCHIEDENE PASSAGEZAHLEN DER ASTROCYTEN
3.4.2.2. VERSCHIEDENE LOKALISATION DER ASTROCYTEN IN DER COKULTUR
3.4.2.3. VERWENDUNG EINER GEMISCHTEN ASTROCYTENZELLINIE
3.4.2.4. VERWENDUNG VON MONIERTEN ASTROCYTENZELLINIEN
3.4.3. CYTOTOXISCHE SUBSTANZEN
3.4.3.1. GLUTAMAT UND 2-AMINOADIPINAT
3.4.3.2. FLUORCITRAT
3.4.3.3. CYTOSINARABINOSID
3.4.3.4.
AMMONIUMCHLORID
3.4.3.5.
5-BROMDESOXYURIDIN UND BISBENZIMID
3.4.3.5.I.
ASTROCYTENMONOKULTUREN
INHALTSVERZEICHNIS
III
3.4.3.5.2. ENDOTHEIZELLMONOKULTUREN
^2
3.4.3.5.3. GEMISCHTE COKULTUREN
^2
3.4.3.5.4. KLONIERTE ASTROCYTENZELLINIE
3.4J.5.5. NACHBEHANDLUNG DER BESTRAHLTEN ZELLEN MIT 5-FIUORDESOIYURIDIN
53
3.4.4.
SECOND MESSENGER
EFTEKTOREN
53
3.4.4.
1
. CYCLISCHE NUKLEOTID-EFFEKTOREN
53
3.4.4.2. PHORBOLESTER 54
3.4.4 3. TYROSINKINASE-EFFEKTOREN 55
3.4.5. ZUGABE VON LATEXPARTIKELN ZU ZELLKULTUREN
55
3.4.6. ANWENDUNG EINES ZELLDISSOZIATIONSPUFFERS AUF GEMISCHTE COKULTUREN
55
3.4.7. GEMISCHTE COKULTUREN MIT DEFINIERTEN KONTAKTBEREICHEN 56
3.4.7.1. ANLEGEN DER KONTROLLKULTUREN
56
3.4.7.2. COKULTUREN MIT TRENNLINIE 56
3.4.7.3. COKULTUREN MIT TRENNLINIE MIT NACHTRAEGLICH ABGESCHABTEN
ENDOTHELZELLEN
57
3.4.7.4. COKULTUREN MIT DIL-GEFARBTEN ENDOTHELZELLEN
57
3.4.8. RAEUMLICH GETRENNTE COKULTURSYSTEME
58
3.4.8.
1
. COKULTUREN IN AGAR
5
G
3.4.
8
.
2
. GESCHUETTELTE COKULTUREN
5
G
3.4.8 3. KULTIVIERUNG VON ASTROCYTEN IN EINER COLLAGENMATRIX 59
3.4.
8
.4. KULTIVIERUNG VON ASTROCYTEN AUF NYLONGAZE 60
3.4.8.5. COKULTIVIERUNG AUF MEMBRANFILTEM MIT 3 PM-PORENWEITE 60
3.5. FAERBEMETHODEN 61
3.5.1. INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ 61
3.5.2. IMMUNOLOGISCHE ANFAERBUNG VON WESTEMBLOTS 63
3.5.3. FLUORESZENZMARKIERUNG VON ENDOTHELZELLEN MIT DIL-AC-LDL 64
3.5.4. FLUORESZENZMARKIERUNG VON ZELLEN MIT DIL UND DIO 64
3.5.5. HISTOCHEMISCHE FAERBEMETHODEN
66
3.5.5.
1
. ALKALISCHE PHOSPHATASE
66
3.5.5.
2
. L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE
66
3.5.5.3. BUTYRYLCHOLINESTERASE 67
3.5.6. VITALITAETSFAERBUNGEN 67
3.5.6.1. DIACETYLFLUORESCEIN 68
3.5.
6
.2. TRYPANBLAU
68
3.5.7. ANWENDUNG DES CALCIUMSENSITIVEN FARBSTOFFS FIUO-3
68
3.5.8. ANFAERBUNG VON PROTEINEN 70
3.5.8.
1
. FAERBUNG MIT COOMASSIE 70
3.5.8.2. FAERBUNG MIT PONCEAU-S 70
3.6. ANWENDUNG VON PROTEASEN AUF ZELLEN 70
3.6.1. PROTEASE TYP XXI
71
3.6.11.
EXPERIMENTE AN ENDOTHELZELLEN
71
3.6.12.
INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT ASTROCYTENVERDAUUNGSLOESUNG 71
3.6.
1
.3. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT NEUROBLASTOMAZELLENVERDAUUNGSLOESUNG 71
3.6.2. PRONASE E 72
3.6.2.
1
. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT ASTROCYTENVERDAUUNGSLOESUNG 72
3.
6
.
2
.
2
. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT NEUROBLASTOMAZELLENVERDAUUNGSLOESUNG 72
3.6.3. TRYPSIN 72
3.7. QUANTITATIVE PROTEIN- UND ENZYMAKTIVITAETSBESTIMMUNGEN 72
3.7.1. PROTEINTESTS
73
3.7.1.1. PROTEINTEST NACH LOWRY 73
INHALTSVERZEICHNIS
IV
3.7.1.2. PROTEINTEST MIT BCA 73
3.7.2. BIOCHEMISCHE ENZYMAKTIVITAETSTESTS 73
3.7.2.1. ALKALISCHE PHOSPHATASE 73
3.7.2.2. L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE 74
3.7.2.3. LACTATDEHYDROGENASE 75
3.8. RADIO-IMMUNO-ASSAYS 75
3.8.1. FUNKTIONSWEISE 75
3.8.2. VORBEREITUNG DER PROBEN 78
3.8.3. VERWENDETE LOESUNGEN 78
3.8.4. DURCHFUEHRUNG 78
3.9. CALCIUMMESSUNGEN AM KONFOKALEN LASER-SCANMNG-MIKROSKOP 79
3.9.1. PRINZIP DES KONFOKALEN LASER-5CFL/I#I*II^-MIKROSKOPS 79
3.9.2. VORBEREITUNG UND VERMESSUNG DER PROBEN 82
3.10. AUFREINIGUNG UND CHARAKTERISIERUNG VON
83
L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE
3.10.1. AUFREINIGUNG VON L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE AUS SCHWEINEHIRN 83
3.10.2. GELELEKTROPHORETISCHE CHARAKTERISIERUNG 85
3.10.2.1. PRAEPARATIVE SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE 85
3.10.2.2. WESTEMBLOTS 87
3.10.2.3. ANALYTISCHE SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE 88
3.10.2.4. TRICIN-SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE 88
3.10.3. PROTEINSPALTUNG UND SEQUENZIERUNG 89
3.10.4. HERSTELLUNG EINES POLYKLONALEN ANTISERUMS 89
4. ERGEBNISSE
90
4.1. CEREBRALE KAPILLAERE ENDOTHELZELLEN 90
4.1.1. CHARAKTERISIERUNG 90
4.1.2. VERLUST DER BLUT-HIRN-SCHRANKE-MARKERENZYME
IN VITRO
92
4.2. ASTROCYTEN ' 94
4.2.1. PRAEPARATION UND CHARAKTERISIERUNG VON TYP I- UND TYP UE-ASTROCYTEN
94
4.2.1.1. TYP I-ASTROCYTEN 94
4.2.1.2. TYP II-ASTROCYTEN 94
4.2.2. KULTIVIERUNG MIT EINEM ASTROCYTENSELEKTIVEN MEDIUM 96
4.2.3. ETABLIERUNG EINER KONTINUIERLICHEN ASTROCYTENZELLINIE 96
4.2.3.1. IMMUNOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER ZELLINIE
97
4 2.3.2. COKULTUR MIT CEREBRALEN KAPILLAEREN ENDOTHELZELLEN 99
4.2.3.3. KLONIERUNG VON SIEBEN KLONEN UND IHRE IMMUNOLOGISCHE 100
CHARAKTERISIERUNG
4.2.3.4. ANWENDUNG EINES GFAP-STIMULIERENDEN MEDIUMS AN DEN KLONEN 103
4.3. VERSUCHE ZUR CHARAKTERISIERUNG DER INDUKTIONSFAEHIGKEIT VON 105
ASTROCYTEN IN GEMISCHTEN COKULTUREN
4.3.1. VERSCHIEDENE PASSAGEZAHLEN DER ASTROCYTEN 105
4.3.2. VERSCHIEDENE LOKALISATION DER ASTROCYTEN IN DER COKULTUR 107
4.3.3. EXPERIMENTE ZUR INDUKTIONSFAEHIGKEIT DER MONIERTEN 110
ASTROCYTENZELLINIEN
INHALTSVERZEICHNIS
V
4.3.4. BUTYRYLCHOLINESTERASE ALS POTENTIELLES BLUT-HIM-SCHRANKE-
1
12
MARKERENZYM
4.3.5.
AUFREINIGUNG UND CHARAKTERISIERUNG VON L-Y-GIUTAMYLTRANSPEPTIDASE
113
4.3.51. AUFREINIGUNG VON L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE AUS SCHWEINEHIM 113
4.3.5 2. SEQUENZIERUNG 116
4.3.5.3. HERSTELLUNG EINES POLYKLONALEN ANTISERUMS 117
4.3.5.3.1. IMMUNISIERUNG 117
4.3.5.3.2. UNTERSUCHUNG DER ANTISEREN
\ ] 7
4.4. VERSUCHE ZUR TRENNUNG DER COKULTUR 120
4.4.1. CYTOTOXISCHE SUBSTANZEN
120
4.4.1.1. GLUTAMAT UND 2-AMINOADIPINAT 120
4.4.1.1.1. EFFEKTE AUF ASTROCYTENMONOKULTUREN 120
4.4.
1.1.2. EFFEKTE AUF ENDOTHEIZELLMONOKULTUREN 120
4.4.1.1.3. EFFEKTE AUF GEMISCHTE COKULTUREN 120
4.4.1.2. FLUORCITRAT 121
4.4.1.2.1. EFFEKTE AUF ASTROCYTENMONOKULTUREN 121
4.4.
1.2.2. EFFEKTE AUF ENDOTHEIZELLMONOKULTUREN 121
4.4.1.2.3. EFFEKTE AUF GEMISCHTE COKULTUREN
122
4.4.1.3. CYTOSINARABINOSID 122
4.4.1.3.1. EFFEKTE AUF ENDOTHEIZELLMONOKULTUREN 122
4.4.1.3.2. EFFEKTE AUF ASTROCYTENMONOKULTUREN UND GEMISCHTE COKULTUREN
122
4.4.1.4. AMMONIUMCHLORID 122
4.4.1.5. 5-BROMDESOXYURIDIN UND BISBENZIMID 122
4.4.1.5.1. EFFEKTE AUF ASTROCYTENMONOKULTUREN 122
4.4.1.5.2. EFFEKTE AUF ENDOTHEIZELLMONOKULTUREN UND GEMISCHTE COKULTUREN
123
4.4.1.5.3. NACHBEHANDLUNG BESTRAHLTER KULTUREN MIT 5-FLUORDESOXYURIDIN
123
4.4.1.5.4. EFFEKTE AUF DIE KLONIERTE ASTROCYTENZELLINIE A3 123
4.4.2. TRENNUNG NACH UNTERSCHIEDLICHER SPEZIFISCHER DICHTE DER ZELLEN
124
4.4.2.1. ERHOEHUNG DER SPEZIFISCHEN DICHTE DER ASTROCYTEN DURCH
INKORPORATION 124
VON LATEXPARTIKELN
4.4.2.2. VERWENDUNG EINES ZELLDISSOZIATIONSPUFFERS 124
4.4.3.
AUSSAAT DER ZELLEN IN DER COKULTUR MIT DEFINIERTEN KONTAKTBEREICHEN
124
4.4.3.1. ANLEGEN DER KONTROLLKULTUREN 124
4.4.3.2. COKULTUREN MIT TRENNLINIE 125
4.4.3.3. COKULTUREN MIT TRENNLINIE MIT NACHTRAEGLICH ABGESCHABTEN
ENDOTHELZELLEN 127
4.4.3.4. COKULTUREN MIT DIL-GEFARBTEN ENDOTHELZELLEN 128
4.4.4. ERSTELLUNG RAEUMLICH GETRENNTER COKULTURSYSTEME 129
4.4.4.1. ZELLKULTIVIERUNG IN AGAR 129
4.4.4. L1. ASTROCYTEN 129
4.4.4.I.2. ENDOTHELZELLEN 129
4.4.4.2. GESCHUETTELTE COKULTUREN 129
4.4.4.3. ASTROCYTEN IN EINER COLLAGENMATRIX 133
4.4.4.4. KULTIVIERUNG VON ASTROCYTEN AUF NYLONGAZE 135
4.4.4.5. COKULTIVIERUNG AUF MEMBRANFILTEM MIT 3 PM-PORENWEITE 138
4.5. VERSUCHE ZUM
FIRST MESSENGER, DER INDUKTIONSFAKTOR 139
4.5.1. PROTEASE TYP XXI 140
4.5.1.1. EXPERIMENTE AN ENDOTHELZELLEN 140
4.5.1.2. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT ASTROCYTENVERDAUUNGSLOESUNG 140
4.5.1.3. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT NEUROBLASTOMAZELLENVERDAUUNGSLOESUNG
142
4.5.2. PRONASE E 143
INHALTSVERZEICHNIS
VI
4.5.2.1. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT ASTROCYTENVERDAUUNGSLOESUNG 143
4.5.2.2. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT NEUROBLASTOMAZELLENVERDAUUNGSLOESUNG
144
4.5.3. TRYPSIN 144
4.5.3.1. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT NEUROBLASTOMAZELLENVERDAUUNGSLOESUNG
144
4.5.3.2. INDUKTIONSEXPERIMENTE MIT VERDAUUNGSLOESUNG DER KONTINUIERLICHEN
144
ASTROCYTENZELLINIE
4.6. SIGNALTRANSDUKTION IN CEREBRALEN KAPILLAEREN ENDOTHELZELLEN: 145
SECOND MESSENGER- SYSTEME
4.6.1. CYCLISCHES ADENOSINMONOPHOSPHAT 145
4.6.1.1. RADIO-IMMUNO-/4SSARY FUER CYCLISCHES ADENOSINMONOPHOSPHAT 145
4.6.1.2. WIRKUNG VON EFFEKTOREN AUF DIE CAMP-KONZENTRATION IN
ENDOTHELZELLEN 146
4.6.1.3. WIRKUNG VON CPT-CAMP AUF DIE AKTIVITAET VON ALP UND Y-GT 151
4.6.2. CYCLISCHES GUANOSINMONOPHOSPHAT
156
4.6.2.1. RADIO-IMMUNO-/4SSUERY FUER CYCLISCHES GUANOSINMONOPHOSPHAT 156
4.6.2.2. WIRKUNG VON EFFEKTOREN AUF DIE CGMP-KONZENTRATION IN
ENDOTHELZELLEN 157
4.6.3. PROTEINKINASE C 158
4.6.3
1.
PHORBOLESTERBEHANDLUNG UND COKULTIVIERUNG VON ASTROCYTEN UND 1
58
ENDOTHELZELLEN
4.6.3.2. IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS VON PROTEINKINASE C 159
4.6.4. CALCIUM 161
4.6.4.1. CALCIUMMESSUNGEN AM KONFOKALEN LASER-5CAWN//7G-MIKROSKOP 161
4.6.5. TYROSINKINASEN 166
4.6.5.1. IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS VON PHOSPHOTYROSIN 166
5. DISKUSSION
*69
5.1. DAS VERHALTEN VON CEREBRALEN KAPILLAEREN ENDOTHELZELLEN
IN VITRO 170
5.2. ASTROCYTENPRAEPARATIONEN UND KULTIVIERUNGEN
170
5.3. CHARAKTERISIERUNG DER INDUKTIONSFAEHIGKEIT VON ASTROCYTEN IN 172
GEMISCHTEN COKULTUREN
5.3.1. VERSCHIEDENE PASSAGEZAHLEN DER ASTROCYTEN 172
5.3.2. VERSCHIEDENE LOKALISATION DER ASTROCYTEN IN DER COKULTUR 173
5.3.3. EXPERIMENTE ZUR INDUKTIONSFAEHIGKEIT DER KLONIERTEN 173
ASTROCYTENZELLINIEN
5.3.4. BUTYRYLCHOLINESTERASE ALS POTENTIELLES BIUT-HIRN-SCHRANKE- 173
MARKERENZYM
5.4. AUFREINIGUNG UND CHARAKTERISIERUNG VON 174
L-Y-GLUTAMYLTRANSPEPTIDASE
5.5. VERSUCHE ZUR TRENNUNG DER COKULTUR 175
5.5.1. ANWENDUNG VON CYTOTOXISCHEN SUBSTANZEN
175
5.5.1.1. GLUTAMAT UND 2-AMINOADIPINAT 175
5.5.1.2. FLUORCITRAT 176
5.5.1.3. CYTOSINARABINOSID 176
5.5.1.4. 5-BROMDESOXYURIDIN UND BISBENZIMID 176
5.5.2. TRENNUNG NACH UNTERSCHIEDLICHER SPEZIFISCHER DICHTE DER ZELLEN
177
5.5.3. AUSSAAT DER ZELLEN IN DER COKULTUR MIT DEFINIERTEN
KONTAKTBEREICHEN 177
5.5.4. ERSTELLUNG RAEUMLICH GETRENNTER COKULTURSYSTEME 177
INHALTSVERZEICHNIS
VII
5.5.4.1. ZELLKULTIVIEMNG IN AGAR
177
5.5.4 2. GESCHUETTELTE COKULTUREN 178
5.5.4.3. ASTROCYTEN IN EINER COLLAGENMATRIX 178
5.5.4.4. KULTIVIERUNG VON ASTROCYTEN AUF NYLONGAZE 1
79
5.5.4.5. COKULTIVIERUNG AUFMEMBRANFILTEM MIT 3 GM-PORENWEITE 179
5.6. VERSUCHE ZUM
FIRST MESSENGER DER INDUKTION 179
5.7. UNTERSUCHUNGEN DER
SECOND MESSENGER-SYSTEME IN CEREBRALEN
181
KAPILLAEREN ENDOTHELZELLEN
5.7.1. CYCLISCHES ADENOSINMONOPHOSPHAT 181
5.7.2. CYCLISCHES GUANOSINMONOPHOSPHAT 182
5.7.3. PROTEINKINASE C 183
5.7.4. CALCIUM 183
5.7.5. TYROSINKINASEN 184
6. ZUSAMMENFASSUNG
186
7. LITERATURVERZEICHNIS
188 |
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