Beiträge zur Verbesserung der Proteinkristallisation: Kristallisation durch periodische Gradientenumkehr und Beobachtung des Aggregationsverhaltens präkristalliner Proteinlösungen mit dynamischer Lichtstreuung
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1993
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INHALT:
1.
EINLEITUNG
1
2.
ANSAETZE
ZUR
VERBESSERUNG
DER
PROTEINKRISTALLISATION
5
2.1.
KRISTALLISATIONSMETHODEN
5
2.1.1.
KRISTALLISATION
KLEINER
TEILCHEN
5
2.1.2.
KRISTALLISATION
VON
PROTEINEN
6
2.1.3.
LOESLICHKEIT
VON
PROTEINEN
10
2.2.
PHASEN
DER
KRISTALLISATION
14
2.2.1.
KEIMUNG
14
2.2.2.
OSTWALD-REIFUNG
19
2.2.3.
WACHSTUM
21
2.2.4.
WACHSTUMSSTOP
25
2.3.
PROBLEME
BEI
DER
PROTEINKRISTALLISATION
27
2.4.
ANSAETZE
ZUR
PROBLEMLOESUNG
28
2.4.1.
KRISTALLISATION
IN
DER
NAEHE
DES
LOESLICHKEITSGLEICHGEWICHTS
-
DIE
METHODE
DER
PERIODISCHEN
GRADIENTENUMKEHR
28
2.4.2.
KRISTALLISATION
IN
STARK
UEBERSAETTIGTER
LOESUNG
-
INFORMATIONEN
UEBER
DIE
AGGREGATBILDUNG
DURCH
PHOTONENKORRELATIONSSPEKTROSKOPIE
3
6
3.
APPARATUREN
UND
METHODEN
46
3.1.
VERWENDETE
CHEMIKALIEN
UND
LOESUNGEN
46
3.2.
EINE
APPARATUR
ZUR
DURCHFUEHRUNG
DES
PERIODISCHEN
GRADIENTENWECHSELS
49
3.3
BEOBACHTUNG
UND
AUSWERTUNG
DER
KRISTALLISATION
55
3.4.
EINE
NEUE
LICHTSTREUZELLE
57
3.5.
AUFNAHME
UND
INTERPRETATION
DER
KORRELATIONSFUNKTIONEN
61
4.
ERGEBNISSE
63
4.1.
KRISTALLISATION
IM
PERIODISCH
WECHSELNDEN
LOESLICHKEITSGRADIENTEN
63
4.1.1.
VERSUCHE
MIT
KONSTANTEM
GRADIENTEN:
LOESLICHKEITEN
VON
LYSOZYM
63
4.1.2.
VERSUCHE
MIT
PERIODISCH
WECHSELNDEM
GRADIENTEN
64
4.1.2.1.
OPTIMIEREN
DER
KRISTALLISATIONSBEDINGUNGEN
64
4.1.2.2.
BEOBACHTUNG
DES
KRISTALLWACHSTUMS
66
4.2.
BEOBACHTUNG
DES
AGGREGATIONSVERHALTENS
VON
PRAEKRISTALLINEN
PROTEINLOESUNGEN
BEI
TEMPERATURWECHSELN
72
5.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
79
5
1.
ZUR
KRISTALLISATION
IM
PERIODISCH
WECHSELNDEN
LOESLICHKEITSGRADIENTEN
79
5.2.
ZUR
AGGREGATION
IM
UEBERSAETTIGTEN
BEREICH
84
6.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
87
7.
LITERATUR
89 |
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