Untersuchung der Kopplung von Thrombinrezeptor und inhibitorischen Guaninnukleotid-bindenden Proteinen (Gi) in Thrombozyten:
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
1
2.
THEORETISCHE
GRUNDLAGEN
5
2.1.
THROMBIN-REZEPTOR
VON
THROMBOZYTEN
5
2.2.
GUANINNUKLEOTID-BINDENDE
(G)-PROTEINE
9
2.2.1.
EINTEILUNG
9
2.2.2.
STRUKTUR
UND
WIRKUNGSWEISE
DER
HETEROTRIMEREN
G-PROTEINE
10
2.2.3.
NACHWEISVERFAHREN
FUER
HETEROTRIMERE
G-PROTEINE
UND
DIE
KOPPLUNG
REZEPTOR/G-PROTEIN
13
2.2.4.
BETEILIGUNG
VON
HETEROTRIMEREN
G-PROTEINEN
AN
PATHOLOGISCHEN
PROZESSEN
16
2.2.5.
GA-UNTEREINHEITEN
IN
THROMBOZYTEN
18
2.3.
EFFEKTORSYSTEME
UND
"SECOND
MESSENGER"
IN
THROMBOZYTEN
19
2.3.1.
ADENYLAT
ZYKLASE
19
2.3.2.
PHOSPHOLIPASE
C
21
2.3.3.
KALZIUM
22
2.4.
PERTUSSIS
TOXIN
23
2.4.1.
STRUKTUR
UND
WIRKUNGSWEISE
23
2.4.2.
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
26
VON
GJ
A
-PROTEINEN
2.5.
ENDOGENE
ADP-RIBOSYLIERUNG
28
2.6.
WIRKUNGSMECHANISMEN
29
2.6.1.
THROMBIN
29
2.6.2.
KOLLAGEN
30
2.6.3.
1)46619
31
2.6.4.
VASOPRESSIN
32
2.6.5.
ADRENALIN
32
2.6.6.
A23187
33
2.6.7.
PHORBOL
ESTER
34
2.6.8.
LLOPROST
34
SEITE
3.
FRAGESTELLUNG
35
4.
MATERIAL
UND
METHODIK
37
4.1.
MATERIAL
37
4.1.1.
SUBSTANZEN
37
4.1.2.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
39
4.2.
METHODIK
42
4.2.1.
THROMBOZYTEN-PRAEPARATION
42
4.2.2.
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
43
IN
PERMEABILISIERTEN
THROMBOZYTEN,
IN
THROMBOZYTEN-MEMBRANEN
UND
IM
ZYTOSOL
4.2.3.
GELELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
DER
ADP
45
RIBOSYLIERTEN
PROTEINE,
AUTORADIOGRAPHIE
UND
LASERDENSITOMETRISCHE
AUSWERTUNG
4.2.4.
MESSUNG
DER
INTRAZELLULAEREN
KALZIUM-KONZENTRATION
47
5.
ERGEBNISSE
49
5.1.
METHODIK
49
5.2.
VERGLEICH
DER
GJ-PROTEIN-AKTIVIERUNG
DURCH
THROMBIN
57
UND
DEN
CA-IONOPHOR
A23187
5.2.1.
EINFLUSS
VON
THROMBIN
UND
DEM
CA-LONOPHOR
A23187
57
AUF
DIE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
41
KDA
GJYYIN
SAPONISIERTEN
THROMBOZYTEN
UND
IHRE
BEZIEHUNG
ZUR
KALZIUMMOBILISIERUNG
5.2.2.
EINFLUSS
VON
THROMBIN
UND
A23187
AUF
DIE
ABNAHME
62
DER
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGEN
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
41
KDA
GJYY-PROTEIN
IN
THROMBOZYTEN-MEMBRANEN
5.2.3.
WEITERE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIG
ADP-RIBOSYLIERTE
64
PROTEINE
IN
THROMBOZYTEN
UND
AUTO-ADP
RIBOSYLIERUNG
VON
PERTUSSIS
TOXIN
5.3.
VERGLEICH
DER
GJ-PROTEIN-AKTIVIERUNG
DURCH
DAS
THROMBIN
68
REZEPTOR
AKTIVIERENDE
PEPTID
(TRAP)
UND
THROMBIN
5.3.1.
EINFLUSS
VON
TRAP
UND
THROMBIN
AUF
DIE
68
THROMBOZYTENAKTIVIERUNG
LITERATURVERZEICHNIS
SEITE
5.3.2.
EINFLUSS
VON
TRAP
UND
THROMBIN
AUF
DIE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
MEMBRANSTAENDIGEN
UND
ZYTOSOLISCHEN
GI-PROTEINEN
70
5.3.3.
EINFLUSS
VON
Y-THROMBIN
AUF
DIE
PERTUSSIS
TOXIN
ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
GI-PROTEINEN
77
5.3.4.
WEITERE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIG
ADP-RIBOSYLIERTE
PROTEINE
IN
THROMBOZYTEN
NACH
STIMULATION
MIT
TRAP
79
5.3.5.
EINFLUSS
DES
PROSTAZYKLIN-ANALOGS
LLOPROST
AUF
DIE
WIRKUNG
VON
TRAP
UND
THROMBIN
81
5.4.
EINFLUSS
WEITERER
THROMBOZYTEN-STIMULI
AUF
DIE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
GJ-PROTEINEN
83
6.
DISKUSSION
85
6.1.
METHODIK
85
6.2.
VERGLEICH
DER
GJ-PROTEIN-AKTIVIERUNG
DURCH
THROMBIN
UND
KALZIUM-IONOPHOR
A23187
87
6.3.
EINFLUSS
DER
STIMULATION
DES
KLONIERTEN
THROMBIN
REZEPTORS
AUF
DIE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP
RIBOSYLIERUNG
VON
GJ-PROTEINEN
88
6.4.
BEEINFLUSSUNG
DER
KOPPLUNG
THROMBIN-REZEPTOR/
GJ-PROTEINE
DURCH
INTRAZELLULAERES
CAMP
92
6.5.
EINFLUSS
ANDERER
THROMBOZYTEN-STIMULI
AUF
DIE
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
GJ-PROTEINEN
95
6.6.
PERTUSSIS
TOXIN-ABHAENGIGE
ADP-RIBOSYLIERUNG
WEITERER
THROMBOZYTAERER
PROTEINE
97
7.
ZUSAMMENFASSUNG
100
102 |
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