Isolierung und Charakterisierung einer Chitin-Deacetylase aus Mucor rouxii: Entwicklung eines enzymatischen Verfahrens zur Isolierung und Reindarstellung von Chitin und Chitosan
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
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1994
|
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INHALTSVERZEICHNIS
X
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
CHITIN
UND
CHITOSAN
.
1
1.2
NATUERLICHE
VORKOMMEN
.
2
1.3
INDUSTRIELLE
DARSTELLUNG
.
2
1.4
STRUKTUR
UND
EIGENSCHAFTEN
.
3
1.5
ANWENDUNGSMOEGLICHKEITEN
.
6
1.6
DIE
CHITIN
UND
CHITOSAN-BIOSYNTHESE
IN
DEN
ZVAOMVCETEN
.7
1.7
AUFGABENSTELLUNG
.
11
XX.
_
MATERIAL
UND
METHODEN
.
12
2.1
MUSER
REUXII
.
12
2.2
CHEMIKALIEN,
CHITIN
UND
CHITOSAN
.
12
2.3
WACHSTUMSMEDIEN
.
12
2.4
ANZUCHTVERFAHREN
.
13
2.5
HERSTELLUNG
VON
ZELLEXTRAKTEN
.
14
2.6
ZELLWANDISOLIERUNG
MIT
ANSCHLIESSENDER
CHITOSAN
EXTRAKTION
.
15
2.7
DER
CHITIN-DEACETYLASE-TEST
.
17
2.8
ISOLIERUNG
DER
CHITIN-DEACETYLASE(N)
.
19
2.9
CHARAKTERISIERUNG
DER
CHITIN-DEACETYLASE
.
23
2.10
GEWINNUNG,
DERIVATISIERUNG
UND
KONDITIONIERUNG
VON
CHITIN
UND
CHITOSAN
.
25
2.11
HOCHDRUCKBEHANDLUNG
VON
ZELLEXTRAKTEN
UND
ENZYMLOESUNGEN.
.27
2.12
BIOCHEMISCHE
UND
ANALYTISCHE
BESTIMMUNGEN
.
28
3.
ERGEBNISSE
.
32
3.1
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
MILIEUBEDINGUNGEN
FUER
DIE
ANZUCHT
VON
MUCOR
ROUXII
UND
FUER
DIE
STABILISIERUNG
DES
FAEDIGEN
WACHSTUMS
.
32
3.1.1
NAEHR
STOF
FANSPRUECHE
.
32
3.1.2
TEMPERATUR
.
33
3.1.3
SAUERSTOFF
.
33
3.1.4
PH-WERT
.
34
3.1.5
ZUSAMMENWIRKEN
DER
MILIEUBEDINGUNGEN
.
35
3.2
CHITOSAN-EXTRAKTION
AUS
DER
ZELLWAND
VON
MUCOR
ROUXII
.
37
3.2.1
FERMENTATION
.
37
3.2.2
ZELLWANDISOLIERUNG-.
.
.'38
3.2.3
CHITOSAN-EXTRAKTION,
REINHEITSANALYSE
UND
DER
CHITOSAN
GEHALT
IN
DER
ZELLWAND
VON
MUCOR
ROUXII
.
39
3.3
NACHWEIS
UND
REINDARSTELLUNG
DER
CHITIN-DEACETYLASE(N)
AUS
MUCOR
ROUXII
.
42
3.3.1
DER
CHITIN-DEACETYLASE-TEST
.
42
3.3.2
DIE
REINDARSTELLUNG
EINER
CHITIN-DEACETYLASE
.
44
3.3.3
SOLUBILISIERUNG
DES
GEBUNDENEN
CHITIN-DEACETYLASE
ANTEILS
.
53
INHALTSVERZEICHNIS
_
II
3.4
CHARAKTERISIERUNG
DER
13
KDA-CHITIN-DEACETYLASE
AUS
M
UCOR
ROUXII
.
55
3.4.1
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
UND
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
55
3.4.2
LINEARITAET
DER
CHITIN-DEACETYLIERUNG
UND
ABHAENGIGKEIT
DER
REAKTIONSGESCHWINDIGKEIT
VON
DER
ENZYMKONZENTRATION
.
57
3.4.3
BESTIMMUNG
DES
PH
UND
TEMPERATUR-OPTIMUMS
DER
CHITIN
DEACETYLIERUNG
.
59
3.4.4
BESTIMMUNG
VON
K_
UND
DER
MAXIMALEN
REAKTIONSGESCHWINDIG
KEIT
BEI
NICHTINNIBIERTER
UND
INHIBIERTER
REAKTION
.
61
3.4.5
EINFLUSS
VON
BIVALENTEN
KATIONEN,
SULFHYDRYLREDUZIERENDEN
REAGENTIEN
UND
CHELATOREN
AUF
DIE
ENZYMAKTIVITAET
.
65
3.4.6
ENZYMSTABILITAET
GEGENUEBER
HOHEN
UND
NIEDRIGEN
TEMPERATUREN
UND
NACHWEIS
DER
DENATURIERUNG
IN
ANWESENHEIT
VON
HARNSTOFF
.
67
3.5
DIE
SUBSTRATSPEZIFITAET
DER
CHITIN-DEACETYLASE(N)
.
69
3.5.1
CHITIN
UND
CHITINHALTIGE
SCHALENABFAELLE
VON
CRANGON
CRANGON
.
69
3.5.2
CHITOSAN
.
72
3.5.3
CHITIN
UND
CHITOSANDERIVATE
.
74
3.6
HOCHDRUCKBEHANDLUNG
VON
ZELLEXTRAKTEN
UND
ENZYMLOESUNGEN.
.78
.
_
DISKUSSION
.
80
4.1
DIE
CHITOSAN-BIOSYNTHESE
IN
MUCOR
ROUXII
.
80
4.1.1
DER
CHITOSAN-GEHALT
IN
DER
ZELLWAND
VON
MUCOR
ROUXII
.
81
4.2
ISOLIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
13
KDA-CHITIN
DEACETYLASE
AUS
MUCOR
ROUXII
.
84
4.2.1
DAS
MOLEKULARGEWICHT
UND
DER
ISOELEKTRISCHE
PUNKT
.
89
4.2.2
DIE
KINETISCHEN
KONSTANTEN
.
90
4.2.3
DIE
ENZYMAKTIVITAET
.
93
4.3
VERGLEICH
DER
PHYSIKALISCH-CHEMISCHEN
EIGENSCHAFTEN
VON
UNTERSCHIEDLICHEN
CHITIN-DEACETYLASEN
.
96
4.3.1
DIE
CHITIN-DEACETYLASEN
AUS
MUCOR
ROUXII
.
96
4.3.2
DIE
CHITIN-DEACETYLASEN
AUS
MUCQX
ROUXII
.
COLLETOTRICHUM
LINDEMUTHIANUM
UND
QECOPHILA
LONGINODA
(KOENIGIN)
.
99
4.4
ENTWICKLUNG
EINES
ENZYMATISCHEN
VERFAHRENS
ZUR
ISOLIERUNG
UND
REINDARSTELLUNG
VON
CHITIN
UND
CHITOSAN
AUS
CRANAON
CRANG
ON
.
103
4.4.1
DIE
DEMINERALISIERUNG
UND
DIE
ENTFAERBUNG
DER
SCHALENABFAELLE
.
106
4.4.2
DIE
PROTEINEXTRAKTION
.
106
4.4.3
DIE
DEACETYLIERUNG
DER
SCHALENABFAELLE
BZW.
DES
CHITINS.
.107
4.5
AUSBLICK
.
109
_
ZUSAMMENFASSUNG
.
110
FL*
_
LITERATURVERZEICHNIS
.
112 |
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