Cytoskelett und Gravitropismus des Chara Rhizoids:
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Format: | Buch |
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1994
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Beschreibung: | Bonn, Univ., Diss., 1994 |
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INHALTSVERZEICHNIS:
SEITE
1. EINLEITUNG 1
2. MATERIAL UND METHODEN 7
2.1 PFLANZENMATERIAL 7
2.2
CHARA-PRAEPARATION UND RHIZOID-ANZUCHT 7
2.3 AUFLISTUNG, HERKUNFT UND ZUSAMMENSETZUNG VERWENDETER 8
SUBSTANZEN UND LOESUNGEN
2.3.1 UEBERSICHT UBER DIE VERWENDETEN IMMUNOLOGISCHEN REAGENZIEN 8
2.3.2 CHEMIKALIEN 9
2.3.3 MEDIEN, PUFFER UND WEITERE LOESUNGEN 11
2.4 VERWENDETE KUEVETTENTYPEN 13
2.5 LICHTMIKROSKOPISCHE AUSRUESTUNG MIT ZUBEHOER 14
2.5.1 INVERSMIKROSKOP "AXIOVERT 405 M" (FA. ZEISS) 14
2.5.2 LASERSCAN-MIKROSKOP LSM 10 (FA. ZEISS) 15
2.5.3 FOTOMIKROSKOP "AXIOPHOT" (FA. ZEISS) 15
2.5.4 ACE-VIDEOKAMERASYSTEM (FA. ZEISS) MIT ZUBEHOER 16
2.6 ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE AUSRUESTUNG MIT ZUBEHOER 16
2.7 FOTO-DOKUMENTATION UND FILMMATERIAL 17
2.8 ZENTRIFUGEN 17
2.8.1 NIEDERGESCHWINDIGKEITS-ZENTRIFUGEN-MIKROSKOP (NIZEMI) 17
2.8.2 TISCHZENTRIFUGE (FA. HETTICH) 18
2.9 DURCHFUEHRUNG DER ZENTRIFUGATIONSVERSUCHE 18
2.9.1 ZENTRIFUGATIONEN VON
LG- 6.5G MIT DEM NIZEMI 18
2.9.2 ZENTRIFUGATIONEN VON 10G- 300# MIT DER HETTICH ZENTRIFUGE 18
2.10 EXPERIMENTE UNTER MIKROGRAVITATIONSBEDINGUNGEN WAEHREND DES
PARABELFLUGES EINER TEXUS-RAKETE (TEXUS 30) 19
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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SEITE
2.11 STATISTIK 20
2.12 FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE DARSTELLUNG DES MIKROFILAMENT-SYSTEMS 20
2.13 INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ-MARKIERUNG MIT ANTIKOERPERN 21
2.13.1 PRAEPARATIONEN FUER DIE MIKROTUBULI-MARKIERUNG 21
2.13.1.1 PRAEPARATION I: VERWENDUNG VON ENZYMLOESUNGEN 21
2.13.1.2 PRAEPARATION II: VERWENDUNG DER "GEFRIER-BRUCH-METHODE" 22
2.13.1.3 INKUBATION UND EINBETTUNG 22
2.13.2 PRAEPARATIONEN FUER DIE MYOSIN-MARKIERUNGEN 23
2.13.2.1 ISOLIERUNG VON STATOLITHEN 23
2.13.2.2 "WHOLE CELL" PRAEPARATE 23
2.14 HEMMSTOFF-EXPERIMENTE 24
2.14.1 CYTOCHALASIN D 24
2.14.2 ORYZALIN 25
2.15 PRAEPARATION FUER DIE ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE ULTRASTRUKTUR
UNTERSUCHUNG 26
3. ERGEBNISSE 28
3.1 ZENTRIFUGATIONSEXPERIMENTE 28
3.1.1 INVERSION UND BASIPETALE ZENTRIFUGATION 29
3.1.1.1 INVERSION DER RHIZOIDE (1
G) 29
3.1.1.2 BASIPETALE BESCHLEUNIGUNG (6.5
G) 30
3.1.1.3 BASIPETALE BESCHLEUNIGUNGEN (10G-80G) 31
3.1.2 AKROPETALE ZENTRIFUGATION 35
3.1.2.1 AKROPETALE BESCHLEUNIGUNGEN (LG-LOG) 35
3.1.2.2 AKROPETALE BESCHLEUNIGUNGEN (10G-50G) 36
3.1.2.3 AKROPETALE BESCHLEUNIGUNGEN (50G-300G) 37
SEITE
3.1.3 LATERALE ZENTRIFUGATION 41
3.2 EXPERIMENTE UNTER MIKROGRAVITATIONSBEDINGUNGEN (TEXUS) 44
3.3 DIE ULTRASTRUKTUR VON ZENTRIFUGIERTEN RHIZOIDEN 46
3.3.1 DIE WIRKUNG AKROPETALER ZENTRIFUGATION 46
3.3.2 DIE WIRKUNG LATERALER ZENTRIFUGATION 47
3.4 NACHWEIS UND ORGANISATION DER CYTOSKELETT-ELEMENTE 48
3.4.1 DAS MIKROFILAMENT-SYSTEM DER RHIZOIDE 48
3.4.1.1 VERGLEICHENDE RAEUMLICHE DARSTELLUNG DER BASALEN MIKROFILAMENT-
POPULATIONEN 48
3.4.1.2 DAS MIKROFILAMENT-SYSTEM DER APIKAL- UND SUBAPIKALZONE 50
3.4.2 DAS MIKROTUBULUS-SYSTEM DER RHIZOIDE 50
3.4.3 ERGEBNISSE DER MYOSIN-MARKIERUNGEN 54
3.4.3.1 MYOSIN-NACHWEIS AN ISOLIERTEN STATOLITHEN 54
3.4.3.2 MYOSIN-NACHWEIS AN "WHOLE CELL" PRAEPARATEN 55
3.5 DIE WIRKUNGEN VON CYTOSKELETT-HEMMSTOFFEN AUF DIE CYTO
PLASMATISCHE UND CYTOSKELETTALE ORGANISATION DER RHIZOIDE 56
3.5.1 CYTOCHALASIN D 56
3.5.1.1 FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE VERAENDERUNGEN DES MIKROFILAMENT-
CYTOSKELETTS NACH CYTOCHALASIN-APPLIKATION 56
3.5.1.2 WIRKUNG VON CYTOCHALASIN AUF DAS MIKROTUBULUS-CYTOSKELETT 57
3.5.1.3 STATOLITHENVERLAGERUNG UNTER BASIPETALER ZENTRIFUGATION NACH
CYTOCHALASIN-APPLIKATION 58
3.5.2 COLCHICIN 58
3.5.3 ORYZALIN 59
3.5.3.1 LICHTMIKROSKOPISCHE VERAENDERUNGEN DER RHIZOIDE DURCH
VERSCHIEDENE ORYZALIN-KONZENTRATIONEN 59
SEITE
3.5.3.2 STATOLITHENVERLAGERUNG DURCH BASIPETALE ZENTRIFUGATION
NACH ORYZALIN-BEHANDLUNG 62
3.5.3.3 DIE WIRKUNG VON ORYZALIN AUF DAS MIKROTUBULUS-SYSTEM 63
3.5.3.4 DIE WIRKUNG VON ORYZALIN AUF DAS MIKROFILAMENT-SYSTEM 63
4. DISKUSSION 65
4.1 ZENTRIFUGATION: EINE GEEIGNETE METHODE FUER UNTERSUCHUNGEN UEBER
DAS MIKROFILAMENT-CYTOSKELETT DER
CHARA RHIZOIDE 65
4.2 ERWEITERTES MODELL ZUM GRAVITROPEN KRUEMMUNGSWACHSTUM 70
4.3 AENDERUNG DER KEM-VERTEX-DISTANZ DURCH ZENTRIFUGATION 76
4.4 WIRKUNG VON CYTOCHALASIN B UND D AUF AKTIN-ABHAENGIGE PROZESSE 77
4.5 DAS AKTIN-CYTOSKELETT 78
4.6 DAS MIKROTUBULUS-CYTOSKELETT 79
4.7 DIE FUNKTION DES MIKROTUBULUS-CYTOSKELETTS IM RHIZOID 81
4.8 INTERAKTION VON MIKROTUBULI UND MIKROFILAMENTEN 83
4.9 NACHWEIS UND LOKALISATION VON MYOSIN IM RHIZOID 86
4.10 MODELL I: REKONSTRUKTION DER RHIZOIDSPITZE 89
4.11 MODELL II: REKONSTRUKTION EINES BASALEN RHIZOIDABSCHNITTS 89
5. ZUSAMMENFASSUNG 90
6. LITERATURVERZEICHNIS 92
ANHANG: ABBILDUNGEN |
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