Enantioselektive Effekte bei der genotoxischen Wirkung chiraler Epoxide in Bakterien und Säugerzellen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
Max-von-Pettenkofer-Inst. des Bundesgesundheitsamtes
1993
|
| Schriftenreihe: | Max-von-Pettenkofer-Institut <Berlin>: MvP-Hefte
1993,4 |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Berlin, Freie Univ., Diss. |
| Beschreibung: | 166 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
.
6
DEFINITIONEN
CHEMISCHER
FACHBEGRIFFE
.
8
1.
EINLEITUNG
.
11
1.1
BEISPIELE
FUER
DIE
BEDEUTUNG
ENANTIOSELEKTIVER
EFFEKTE
IN
DER
GENETISCHEN
TOXIKOLOGIE
.
11
1.2
ZIEL
DER
ARBEIT
.
12
1.3
EPOXIDE
ALS
TESTSUBSTANZEN
.
13
1.4
MOEGLICHE
MECHANISMEN
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
GENOTOXISCHEN
WIRKUNGEN
VON
ENANTIOMEREN
EPOXIDEN
.
16
1.5
GRUNDLAGEN
ZU
VERWENDETEN
METHODEN
.
17
1.5.1
PRINZIP DES
SCE-TESTS
.
17
1.5.2
PRINZIP
DES
SOS-CHROMOTESTS
.
18
1.5.3
PRINZIP
DES
AMES-TESTS
.
21
1.5.4
PRINZIP
DER
POSTLABELING-METHODE
ZUM
NACHWEIS
VON
DNA-ADDUKTEN
.
22
2.
MATERIALIEN
.
26
2.1
CHEMIKALIEN
.
26
2.1.1
T
ESTSUBSTANZEN
.26
2.1.2
WEITERE
SUBSTANZEN
UND
LOESUNGSMITTEL
.
28
2.1.3
NAEHRMEDIEN
UND
LOESUNGEN
.
31
2.2
ENZYME
.
40
2.3
GERAETE
.
41
2.4
V79-ZELLEN
.
41
2.5
BAKTERIEN
.
42
3.
METHODEN
.
43
3.1
BESTIMMUNG
DER
LOESLICHKEIT
VON
EPOXIDEN
.
43
3.2
BESTIMMUNG
DER
ALKYLIERUNGSAKTIVITAET
VON
EPOXIDEN
.
43
3.3
BESTIMMUNG
DER
STABILITAET
DER
EPOXIDE
IN
WAESSRIGER
LOESUNG
.
44
3.4
KULTIVIERUNG
DER
V79-ZELLEN
.
45
3.5
KULTIVIERUNG
DER
BAKTERIEN
.
45
3.6
GENOTOXIZITAETSTESTS
AN
SAEUGERZELLEN
UND
BAKTERIEN
.
46
3.6.1
SCE-TEST
.
46
3.6.2
SOS-CHROMOTEST
.
48
3.6.3
AMES-TEST
.
50
4
3.7
BESTIMMUNG
DER
ENZYMATISCHEN
INAKTIVIERUNG
DER
EPOXIDE
BEI
DER
INKUBATION
MIT
ZYTOSOL
.
51
3.7.1
PRAEPARATION
VON
V79
UND
BAKTERIEN-ZYTOSOL
UND
VON
S9-FRAKTIONEN
.
51
3.7.1.1
BESTIMMUNG
VON
PROTEIN-KONZENTRATIONEN
.
52
3.7.1.2
BESTIMMUNG
DER
GLUTATHION-S-T
RANSFERASE-AKTI
VITAET
.
52
3.7.2
INAKTIVIERUNG
DER
EPOXIDE
MIT
ZYTOSOL
.54
3.8
BESTIMMUNG
DER
DNA-ADDUKT-BILDUNG
VON
EPOXIDEN
.
55
3.8.1
EXPOSITION
VON
ISOLIERTER
DNA
MIT
EPOXIDEN
.
55
3.8.2
EXPOSITION
VON
V79-ZELLEN
MIT
EPOXIDEN
.
55
3.8.3
ISOLIERUNG
DER
DNA
AUS
V79-ZELLEN
.
55
3.8.4
BESTIMMUNG
VON
DNA-KONZENTRATIONEN
.
56
3.8.5
SPALTUNG
DER
DNA
IN
NUCLEOTIDE
.
57
3.8.6
MARKIERUNG
DER
NUCLEOTIDE
MIT
P-32
(POSTLABELING)
.
58
3.8.7
DUENNSCHICHT-CHROMATOGRAFIE
.
58
3.8.8
AUTORADIOGRAFIE
.
60
3.8.9
STRAHLENSCHUTZ
.
60
3.9
STATISTISCHE
BEURTEILUNG
VON
BEFUNDEN
.
61
4.
ERGEBNISSE
.
62
4.1
LOESLICHKEIT
UND
ZYTOTOXIZITAET
DER
ENANTIOMEREN
EPOXIDE
.
62
4.2
ALKYLIERUNGSAKTIVITAET
DER
ENANTIOMEREN
EPOXIDE
.
65
4.3
STABILITAET
DER
ENANTIOMEREN
EPOXIDE
IN
WAESSRIGER
LOESUNG
.
72
4.4
GENOTOXISCHE
AKTIVITAET
DER
ENANTIOMEREN
EPOXIDE
.
73
4.4.1
GENOTOXISCHE
AKTIVITAET
IM
SCE-TEST
.
73
4.4.2
GENOTOXISCHE
AKTIVITAET
IM
SOS-CHROMOTEST
.
81
4.4.3
MUTAGENE
AKTIVITAET
IM
AMES-TEST
.
89
4.5
ENZYMATISCHE
INAKTIVIERUNG
AUSGEWAEHLTER
ENANTIOMERER
EPOXIDE
BEI
DER
INKUBATION
MIT
ZYTOSOL
.
105
4.6
DNA-ADDUKT-BILDUNG
AUSGEWAEHLTER
ENANTIOMERER
EPOXIDE
.
112
4.6.1
AKTIVITAETEN
DER
VERWENDETEN
ENZYME
.
113
4.6.2
SENSITIVITAET
VERSCHIEDENER
VERSIONEN
DER
POSTLABELING-METHODE
BEIM
NACHWEIS
VON
EPOXID-DNA-ADDUKTEN
.
116
4.6.3
DNA-ADDUKT-BILDUNG
AN
ISOLIERTER
DNA
.
119
4.6.4
DNA-ADDUKT-BILDUNG
IN
V79-ZELLEN
.
122
5
5.
DISKUSSION
.
1
.
125
5.1
DISKUSSION
DER
EXPERIMENTELLEN
ERGEBNISSE
UND
METHODEN
.
125
5.1.1
EIGNUNG
DER
PRUEFSUBSTANZEN
UND
DER
CHEMISCHEN
ANALYTIK
.
125
5.1.2
GENOTOXIZITAET
DER
ENANTIOMEREN
EPOXIDE
.
127
5.1.3
ENZYMATISCHE
INAKTIVIERUNG
VON
STYROLOXID
UND
EMPN
.
130
5.1.4
DNA-ADDUKT-BILDUNG
VON
STYROLOXID
UND
EMPN
.
134
5.2
MOEGLICHE
URSACHEN
FUER
UNTERSCHIEDLICHE
GENOTOXISCHE
WIRKUNGEN
VON
ENANTIOMEREN
EPOXIDEN
.
137
5.2.1
ENZYMATISCHE
INAKTIVIERUNG
VON
EPOXIDEN
.
138
5.2.2
DNA-ADDUKT-BILDUNG
VON
EPOXIDEN
.
140
5.2.3
ENZYMATISCHE
REPARATUR
VON
DNA-SCHAEDEN
.
143
5.3
SCHLUSSFOLGERUNGEN
.
145
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
149
7.
LITERATUR
.
151 |
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