Der Promotor des Gens für Plastocyanin aus Spinat (Spinacia oleracea L.):
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS
0.
ABKFIRZUNGSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
_
1
2.
EINLEITUNG
_
3
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
_
II
3.1
MATERIAL.
_
.
3.1.1
CHEMIKALIEN
UND
ENZYME
.
_
.
11
3.1.2
OLIGONUKLEOTIDE
.
11
3.1.3
DNA-LAENGENSTANDARDS.
_
.
11
3.1.4
VEKTOREN
UND
WIRTSSTAEMME.
11
3.2
METHODEN
.
12
3.2.1
ETABLIERTE
METHODEN
.
.
12
3.2.2
PROMOTORKONSTRUKTIONEN.
13
3.2.2.1
5'-DELETIONEN
MIT
HILFE
VON
RESTRIKTIONSSCHNITTSTELLEN
.
13
3.2.2.2
KLONIERUNG
VOR
DEN
HETEROLOGEN
MINIMALPROMOTOR.
14
3.2.2.3
KLONIERUNG
VOR
DEN
HOMOLOGEN
MINIMALPROMOTOR
.
.
15
3.2.2.4
5
'-DELETIONEN
MIT
EXONUDEASE
III
.
15
3.2.2.5
MUTAGENESE
.
16
3.2.3
PFLANZENTRANSFORMATION.
18
3.2.3.1
KLONIERUNG
IN
PBINL9
.
18
3.2.3.2
TRANSFER
VON
PBINL9
IN
AGROBACTERIUM
TUMEFACIENS
.
18
3.23.3
TRANSFORMATION
VON
TABAKPFLANZEN
UND
WEITERE
KULTUR.
_
.
19
3.2.2.4
GEWINNUNG
DER
FJ-GENERTATION
DER
PRIMAEREN
TRANS
FORMANDEN
UND
SAEMLINGSANZUCHT.
21
3.2.4
ANALYSE
DER
TRANSGENEN
TABAKPFLANZEN
.21
3.2.4.1
FLUORIMETRISCHE
GUS-ENZYMMESSUNGEN.21
3.2.4.2
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
_
.
_
.22
3.2.4.3
HISTOCHEMISCHE
GUS-ANALYSE
.
23
3.2.4.4
IN
SITX-GUS-NACHWEIS
_
23
3.2.4.5
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
UND
STAERKENACHWEIS
.24
3.2.5
DNA/PROTEIN-BINDESTUDIEN.24
3.2.5.1
ISOLATION
VON
KERNPROTEINEN
AUS
TABAKPFLANZEN
.24
3.2.S.2
FRAKTIONIERUNG
DER
KERNPROTEINE
.
25
3.2.53
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN.
25
3.2.S.4
GELRETARDIERUNG
.26
3.2.6
SELEKTION
VON
CDNA
UND
GENOMISCHEN
KLONEN
.
27
.
3.2.6.1
HERSTELLUNG
DER
SONDE
.
27
33.6.2
SICHTEN
VON
SPINATBANKEN
.
.27
4.
ERGEBNISSE
_
29
4.1
ANALYSE
DER
PROMOTORREGION
DES
PLASTOCYANINGENS
AUS
SPINAT
.29
4.1.1
SEQUENZ
DER
UNTERSUCHTEN
5
'-REGION
DES
PLASTOCYANINGENS
AUS
SPINAT.
_
.29
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.2
EINGRENZUNG
QUANTITATIV
WIRKSAMER
PROMOTORBEREICHE
.29
4.1.2.1
5'-DELETIONEN
MITTELS
INTERNER
RESTRIKTIONSSCHNITTE
.
29
4.1.2.2
HETEROLOGE
MINIMALPROMOTORKONSTRUKTIONEN
.31
4.1.2.3
HOMOLOGE
MINIMALPROMOTORKONSTRUKTIONEN.33
4.1.2.4
5
'-DELETIONEN
MIT
EXONUCLEASE
LH
.
34
4.1.2.5
BASENAUSTAUSCHE
.
35
4.1.2.6
WECHSELWIRKUNGEN
DER
-2597-79
PROMOTORREGION
.
36
4.1.2.7
INTERNE
DELETIONEN
IM
BEREICH
-2037-84
.37
4.1.2.8
3'-DELETIONEN
DER
+607+5
REGION.38
4.1.2.9
AKTIVIERUNG
NICHT
AKTIVER
PROMOTOTKONSTRUKTIONEN.38
4.1.3
QUALITAET
DER
EXPRESSION
DES
PLASTOCYANINPROMOTORS
.39
4.1.3.1
ENTWICKLUNGSABHAENGIGKEIT
.39
4.1.3.2
ORGANSPEZIFITAET.
.
39
4.1.3.3
GEWEBESPEZIFITAET
.40
4.1.3.4
CHLOROPLASTENABHAENGIGE
EXPRESSION
.
.44
4.1.3.4.1
TRANSFORMATION
EINER
WEISSEN
TABAKPLASTOMMUTANTE
.
44
4.1.3.4.2
SAEMLINGSVERSUCHE
MIT
NORFLURAZON
.
45
4.1.3.5
LICHTPHYSIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
46
4.1.3.5.1
ROTLICHT
PULSEXPERIMENTE
.
_
.
_
.
46
4.1.3.5.2
DAUERWEIB-,
DAUERROT-,
DAUERBLAULICHTBEHANDLUNG
_
47
4.1.3.5.3
ERGRUENUNG
.
49
4.1.4
DNATPROTEIN-BINDESTUDIEN
MIT
DEM
PLASTOCYANINPROMOTOR
_
.50
4.1.5
KOMPETITORWIRKUNG
VON
EINZELSTRANG-DNA
.52
4.1.6
FRAKTIONIERUNG
VON
KERNEXTRAKTEN
_
.55
4.2
DAS
"G
BOX"-MOTIV
DES
RFRCS-L-PROMOTORS
AUS
SPINAT.
_
.57
4.2.1
ORGANSPEZIFISCHE
EXPRESSION
EINER
CHIMAEREN
FUSION
MIT
DEM
"G
BOX"-MOTIV
.
57
4.2.2
WIRKUNG
VON
LICHT
UND
NORFLURAZON.
57
4.2.3
DNATPROTEIN-BINDESTUDIEN
.
59
4.2.4
ISOLATION
DES
"G
BOX"-FAKTORS
GS1
AUS
SPINAT
.
60
4.2.5
ISOLATION
GENOMISCHER
KLONE
MIT
GS1
ALS
SONDE.
64
5.
DISKUSSION
_
67
5.1
STIMULATION
DES
PLASTOCYANINPROMOTORS
UND
EINES
CHIMAEREN
FUSIONSPRODUKTES
MIR
DEM
"G
BOX"-MOTIV
IN
TRANSGENEN
TABAK
.
70
5.2
LOKALISATION
RELEVANTER
PROMOTORBEREICHE
IM
PLASTOCYANIN
PROMOTOR
_
.
_
.
_
.73
5.3
MECHANISMEN
FUER
DIE
REGULATION
DURCH
DEN
PLASTOCYANIN
PROMOTOR
UND
DIE
CHIMAERE
"G
BOX"-PROMOTORFUSION
.80
5.4
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
PLASTOCYANINPROMOTOREN
.
86
6.
LITERATURVERZEICHNIS
_
89
PUBLIKATIONSLISTE
INHALTSVERZEICHNIS
8.
DANKSAGUNG
106
LEBENSLAUF
107 |
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