Frühe molekulare Veränderungen im Zellstoffwechsel pilzinfizierter Kartoffelblätter:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
|
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1993 |
| Beschreibung: | 139 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
PATHOGENABWEHRREAKTIONEN
BEI
PFLANZEN
.
1
1.2
KARTOFFEL
/
PHYTOPHTHORA
IN/ESTANS-INTERAKTIONEN
.
5
1.2.1
KULTIVAR
/
RASSE-SPEZIFITAET
.
5
1.2.2
INFEKTIONSVERLAUF
.
6
1.2.3
MOLEKULARE
VERAENDERUNGEN
IN
INFIZIERTEN
KARTOFFELBLAETTEM
.
7
1.3
ANALYSE
PHOTOCHEMISCHER
PROZESSE
MIT
HILFE
DER
CHL-A-FLUORESZENZ
.
8
1.4
ZIEL
DER
ARBEIT
.
16
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
17
2.1
MATERIAL
.
17
2.1.1
CHEMIKALIEN,
ENZYME
UND
RADIOISOTOPE
.
17
2.1.2
MEDIEN,
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
18
2.1.2.1
MEDIEN
UND
PUFFER
.
18
2.1.2.2
ANTIBIOTIKAKONZENTRATIONEN
.
19
2.1.2.3
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
19
2.1.3
BAKTERIENSTAEMME
UND
VEKTOREN
.
25
2.1.4
OLIGONUKLEOTIDE
.
25
2.1.5
GENOMISCHE
FRAGMENTE
.
26
2.1.6
HETEROLOGEDNA-SONDEN
.
26
2.1.7
HOMOLOGE
DNA-SONDEN
.
27
2.1.8
ANTISEREN,
DIE
BEI
DEN
IMMUNOLOGISCHEN
NACHWEISREAKTIONEN
EINGESETZT
WURDEN
.
28
2.2
METHODEN
.
29
2.2.1
ANZUCHT
DER
PFLANZEN
.
29
2.2.2
ANZUCHT
DER
PILZE
UND
ZOOSPORENGEWINNUNG
.
'29
2.2.3
INOKULATION
VON
ABGESCHNITTENEN
KARTOFFELBLAETTEM
MIT
ZOOSPOREN
.
30
2.2.4
KONTROLLE
DES
INFEKTIONSVERLAUFS
.
30
2.2.5
ETHANOLFAELLUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
31
2.2.6
PHENOLEXTRAKTION
.
31
2.2.7
DNA-ISOLIERUNG
.
31
2.2.7.1
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
.
31
2.2.7.2
SCHNELLPRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
.
31
2.2.7.3
,
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
AUS
PFLANZEN
.
31
2.2.8
EXTRAKTION
VON
GESAMT-DNA
AUS
KARTOFFELBLAETTEM
.
32
2.2.9
PHOTOMETRISCHE
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
33
2.2.10
SPALTUNG
VON
DNA
MIT
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
.
33
2.2.10.1
SPALTUNG
VON
PLASMID
-
DNA
.
33
2.2.10.2
SPALTUNG
VON
GENOMISCHER
KARTOFFEL-DNA
.
33
2.2.11
PHOSPHATASE-BEHANDLUNG
VON
PLASMID
VEKTOREN
.
34
2.2.12
LIGASEREAKTION
.
34
2.2.13
KOMPETENTE
ZELLEN
.
34
2.2.14
TRANSFORMATION
VON
BAKTERIEN
.
35
2.2.15
GELELEKTROPHORESEN
.
35
2.2.15.1
DISKONTINUIERLICHE
GELELEKTROPHORESE
.
35
2.2.16
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
36
2.2.16.1
ELEKTROELUTION
.
36
2.2.16.2
ELUTION
MIT
HILFE
DES
"
QUIAEX
GEL
-
EXTRACTION
-
KITS"
.
36
2.2.17
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DS
DNA
.
37
2.2.18
TRANSFER
VON
DNA
UND
RNA
AUF
NYLONMEMBRANEN
.
37
2.2.19
PRAEHYBRIDISIERUNG
UND
HYBRIDISIERUNG
MIT
RADIOAKTIVEN
DNA
-
SONDEN
.
37
2.2.20
ENTFERNEN
UNSPEZIFISCH
GEBUNDENER
SONDEN
.
38
2.2.21
REINIGUNG
SYNTHETISCHER
OLIGONUKLEOTIDE
.
38
2.2.22
DNA-SEQUENZANALYSE
.
39
2.2.23
COMPUTERANALYSE
VON
DNA
-
SEQUENZEN
.
39
2.2.24
ISOLIERUNG
VON
CHLOROPLASTENPROTEINEN
(ZELLFRAKTIONIERUNG)
.
40
2.2.25
ACETONFAELLUNG
VON
PROTEINEN
.
41
2.2.26
BESTIMMUNG
DER
CHLOROPHYLLKONZENTRATION
.
41
2.2.27
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
.
42
2.2.28
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
FILTERGEBUNDENER
PROTEINE
("WESTERN
-BLOT")
.
42
2.2.29
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ-MESSUNG
.
43
2.2.29.1
CHLOROPHYLL-FLUOROMETER
.
43
2.2.29.2
MESSBEDINGUNGEN
UND
DUNKELADAPTION
DES
PFLANZENMATERIALS
.
43
2.2.30
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
CHLOROPHYLLFLUORESZENZ-DATEN
.
44
3.
ERGEBNISSE
.
48
3.1
VORVERSUCHE
.
48
3.1.1
KONTROLLE
DER
PATHOGENITAET
DES
PILZES
.
48
3.1.2
BEURTEILUNG
VON
NORTHEM-HYBRIDISIERUNGSEXPERIMENTEN
.
50
3.2
ANALYSE
DER
EXPRESSIONSMUSTER
VERSCHIEDENER
GENE
BEI
DER
PATHOGENABWEHR
.
52
3.2.1
SONDEN
FUER
ELI-GENE
AUS
PETERSILIE
.
52
3.2.1.1
KREUZHYBRIDISIERUNG
ZWISCHEN
ELI-GENEN
UND
GENOMISCHER
DNA
AUS
KARTOFFEL
.
53
3.2.1.2
RNA-BLOT-HYBRIDISIERUNGEN
MIT
HETEROLOGEN
ELI-SONDEN
AUS
PETERSILIE
.
55
3.2.1.3
RNA-HYBRIDISIERUNGEN
MIT
WEITEREN
HETEROLOGEN
SONDEN
.
58
3.2.2
ANALYSE
DES
KLONS
AEI
1
.
61
3.2.2.1
AKKUMULATIONSMUSTER
VON
XLL-KODIERTEN
GENEN
.
61
3.2.2.2
SEQUENZANALYSE
DES
GENOMISCHEN
INSERTS
VON
PXIL
.
66
3.2.3
AKKUMULATION
VON
MRNA
WEITERER
KOMPONENTEN
DER
PHOTOSYNTHESE
.
75
3.3
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ-MESSUNGEN
AN
KARTOFFELBLAETTEM
.
80
3.3.1
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ-MESSUNGEN
.
81
3.3.2
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ-MESSUNGEN
3
H
NACH
BEGINN
DER
BEHANDLUNG
YY
YY
(MESSREIHEN
1-3)
.
83
3.3.3
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ-MESSUNGEN
18
H
NACH
BEGINN
DER
BEHANDLUNG
(MESSREIHEN
4)
.
89
3.3.4
BERECHNUNG
VON
F
V
/
FYY
(4
P
-WERTE)
.
91
3.3.5
FLUORESZENZINDUKTIONSKURVEN
(MESSREIHE
6)
.
93
3.3.6
QUENCHING-ANALYSEN
(MESSREIHE5)
.
95
3.3.7
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ
INTAKTER
PFLANZEN
IM
VERGLEICH
ZU
ABGESCHNITTENEN
BLAETTERN
(MESSREIHE
7)
.
97
3.4
BESTIMMUNG
DES
CHLOROPHYLLGEHALTS
3
H
NACH
INOKULATION
.
98
3.5
STEADY-STATE-LEVEL
AUSGEWAEHLTER
PROTEINE
AUS
DEM
PHOTOSYNTHESEAPPARAT
.
99
4.
DISKUSSION
.
100
4.1
ANALYSE
DER
GENEXPRESSIONSMUSTER
ELI-AEHNLICHER
KARTOFFEL-GENE
BEI
DER
PATHOGENABWEHR
.
101
4.2
ANALYSE
VON
ALL
.
104
4.3
STEADY-STATE-LEVEL
VON
MRNAS,
DIE
PROTEINE
DER
PHOTOSYNTHESE
KODIEREN
107
4.4
EINFLUSS
EINER
P.I.
INFEKTION
AUF
DEN
PHOTOSYNTHETISCHEN
ELEKTRONENTRANSPORT
VON
KARTOFFELBLAETTEM
.
111
4.4.1
MAXIMALE
FLUORESZENZ
.
113
4.4.2
PHOTOCHEMISCHE
EFFIZIENZ
: D
P
-WERTE
(F
V
/
FYY)
.
117
4.4.3
CHLOROPHYLL-FLUORESZENZ-INDUKTIONSKURVE
.
119
4.4.4
QUENCHING-ANALYSEN
.
122
4.5.5
STEADY-STATE-LEVEL
VON
PROTEINEN
AUS
DEM
PHOTOSYNTHESEAPPARAT
.
125
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
127
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
129 |
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| title_short | Frühe molekulare Veränderungen im Zellstoffwechsel pilzinfizierter Kartoffelblätter |
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