Methodischer Beitrag zur Bestimmung der Eicosanoidproduktion in feto-maternalem Gewebe:
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1993
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XNNAITSVERZELCHNLS
1
EINLEITUNG
1.1
EICOSANOIDE
8
1.1.1
DIE
ROLLE
DER
EICOSANOIDE
BEI
DER
GESTOSE
10
1.1.2
IN
VITRO
ANSAETZE
ZUR
UNTERSUCHUNG
DER
ELCOSANOIDBILDUNG
IN
ISOLIERTEN
GEWEBEN
12
1.2
PROBLEMSTELLUNG
13
2.
MATFII
LAL
LEN_AND-MFI.THFIDEN,
15
2.1
CHEMIKALIEN
UND
RADIOCHEMIKALIEN
15
2.2
GEWEBE
UND
GEWEBEENTNAHME
17
2.3
PROBENVORBEREITUNG
18
2.3.1
FESTPHASENEXTRAKTION
VON
RADIOAKTIVEN
AA-METABOLITEN
18
2.3.2
FLUESSLG-FLUESSLG-EXTRAKTLON
VON
RADIOAKTIVEN
ARACHIDONSAEURE
METABOLITEN
(AA)
18
2.3.3
PROBENVORBEREITUNG
UND
FESTPHASENEXTRAKTION
FUER
DIE
HPLC
MIT
FLUORESZENZDETEKTION
19
2.3.4
DERIVATISIERUNG
VON
PROSTAGLANDLNEN
MIT
FLUORESZENZFARBSTOFF
19
2.4
CHROMATOGRAPHISCHE
METHODEN
21
2.4.1
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
21
2.4.2
HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
22
2.5
RADIOAKTIVITAETSMESSUNG
26
2.6
GEWEBEINKUBATION
MIT
RADIOAKTIVER
ARACHIDONSAEURE
28
2.6.1
GEWEBEINKUBATION
MIT
EXOGENER
X
*C
ARACHIDONSAEURE
(METHODE
I)
28
2.6.2
EINBAU
VON
3H
UND
1
4
C-ARACHIDONSAEURE
IN
DIE
GEWEBE
UND
ANSCHLIESSENDE
STIMULATION
MIT
CALCIUM-IONOPHOR
A
23187
(
METHODE
II
)
31
2.6.3
KONTROLLVERSUCH
ZUM
EINBAU
VON
14
C
ARACHIDONSAEURE
IN
DIE
LIPIDFRAKTIONEN
DES
GEWEBES
33
2.6.4
KONTROLLVERSUCH
ZUR
ADSORBTLON
VON
ARACHIDONSAEURE
AN
DIE
KULTURGEFAESSE
UND
EIHAUTABSORBTION
DER
ARACHIDONSAEURE
33
2.6.5
AUSFAELLUNG
DER
14
C-ARACHIDONSAEURE
BEI
PH-WERTAENDERUNGEN
34
2.7
UNTERSUCHUNG
DER
ENDOGENEN
ARACHIDONSAEURE
METABOLISIERUNG
NACH
STIMULATION
MIT
CALCIUM-IONOPHOR
34
2.7.1
INKUBAT
I
ONSBED
INGUNGEN
34
2.7.2
KONTROLLVERSUCHE
35
2.7.3
VERGLEICH
VON
TIEFGEFRORENEM
GEWEBE
MIT
FRISCHEM
GEWEBE
35
3.
ERGEBNISSE
3.1
GEWEBEINKUBATION
MIT
EXOGENER,
RADIOAKTIVER
ARACHIDONSAEURE
UND
VERSUCHS
MOD
I
F
IKAT
I
ONEN
36
3.1.1
INKUBATION
MIF-^C-ARACHIDONSAEURE
36
-
AUSFAELLUNG
DER
14
C-ARACHIDONSAEURE
BEI
PH-WERTAENDERUNGEN
39
3.1.2
EINBAU
VON
'
H
UND
14
C
ARACHIDONSAEURE
IN
DIE
GEWEBE
UND
ANSCHLIESSENDE
STIMULATION
MIT
CALCIUMIONOPHOR
(METHODE
II)
43
3.1.3
UNTERSUCHUNG
VON
14
C-ARACHIDONSAEURE
IN
LIPIDFRAKTIONEN
DER
ZELLE
47
3.1.4
GEFAESSADSORBTION
UND
GEWEBEABSORBTION
47
3.2
ENDOGENE
EICOSANOIDBILDUNG
NACH
STIMULATION
MIT
CALCIUMIONOPHOR
49
3.2.1
PILOTVERSUCH
51
-KONTROLLVERSUCHE
-BLINDVERSUCHE
53
3.2.2
VARIATION
DER
INKUBATIONSDAUER
55
3.2.3
VERGLEICH
DER
VERSCHIEDENEN
GEWEBE
59
3.2.4
PROSTANO
ID-BEST
IMMUNGEN
61
3.3
KLINISCHE
BEOBACHTUNGEN
66
DISKUSSION
4.1
ENZYMATISCHER
UMSATZ
DER
RADIOAKTIVEN
YY
ARACHIDONSAEURE
DURCH
FETO-MATERNALES
GEWEBE
67
4.2
ENDOGENE
EICOSANOIDFREISETZUNG
DURCH
FETO-MATERNALES
GEWEBE
71
4.2.1
15-,
12-,
5-HETE-FREISETZUNG
DURCH
FETO-MATERNALES
GEWEBE
71
4.2.2
PROSTANOLDFREISETZUNG
DURCH
FETO-MATERNALES
GEWEBE
74
5
ZUSAMMENFASSUNG
77
6
LITERATURVERZEICHNIS
78
LEBENSLAUF
85 |
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