Isolierung und funktionelle Charakterisierung der hämatopoetischen Stammzelle beim Menschen:
Gespeichert in:
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|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
1.
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
19
2.1
ZELLMATERIAL
19
2.1.1
HUMANES
PERIPHERES
BLUT/KNOCHENMARK
19
2.1.2
HUMANE
ZELLINIEN
19
2.2
MEDIEN
20
2.3
FAKTOREN
21
2.4
LOESUNGEN
22
2.5
PUFFER
22
2.6
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
23
2.6.1
ANTIKOERPER
GEGEN
ADHAESIONSMOLEKUELE
23
2.6.2
ANTIKOERPER
GEGEN
LEUKOCYTEN-AG
25
2.6.3
ANTIKOERPER
GEGEN
EXTRAZELLULAERE
MATRIX
26
2.6.4
KONTROLLEN
26
2.6.5
ZWEITANTIKOERPER
26
2.6.6
BLOCKIERENDE
ANTIKOERPER
27
2.7
PEPTIDE
28
2.8
IMMUNOASSAYS
28
2.9
CHEMIKALIEN
29
2.10
FESTMATERIAL
30
2.11
GERAETE
30
3.
METHODEN
31
3.1
ZELLULAERE
METHODEN
31
3.1.1
ISOLIERUNG
MONONUKLEAERER
ZELLEN
31
3.1.2
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
31
3.1.3
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
32
3.1.4
KULTIVIERUNG
VON
ZELLINIEN
32
3.1.5
KULTUR
DER
ZELLEN
AUF
OBJEKTTRAEGERN
33
3.1.6
INDUKTION
VON
ZELLEN
33
3.1.7
BLAST-ASSAY
33
3.1.8
BINDUNGSASSAY
35
3.2
FAKTOREN
36
3.3
BLOCKIERENDE
ANTIKOERPER/PEPTIDE
37
3.4
ANTIGENNACHWEIS
MITTELS
DURCHFLUSSZYTO
METRIE
38
3.5
ELISA
38
3.6
BESTIMMUNG
VON
OBERFLAECHENMOLEKUELEN
MIT
HILFE
DER
APAAP
(ALKALISCHE
PHOSPHATASE
ANTI-ALKALISCHE
PHOSHATASE)
-
FAERBUNG
39
4.
ERGEBNISSE
41
4.1
ETABLIERUNG
DES
BLAST-ASSAYS
41
4.1.1
BLAST-ASSAY
OHNE
HFFF-LAYER
42
4.1.1.1
STAMMZELLGEHALT
VON
KNOCHENMARK
(KM)
42
4.1.1.2
STAMMZELLGEHALT
VON
NABELSCHNURBLUT
42
4.1.1.3
STAMMZELLGEHALT
VON
PERIPHEREM
BLUT
(PB)
45
4.1.1.4
STAMMZELLGEHALT
VON
GH-CSF
BEHANDELTEN
PATIENTEN
45
4.1.2
BLAST-ASSAY
MIT
HFFF-LAYER
48
4.1.2.1
STAMMZELLGEHALT
VON
KNOCHENMARK
(KM)
49
4.1.2.2
STAMMZELLGEHALT
VON
NABELSCHNURBLUT
49
4.1.2.3
STAMMZELLGEHALT
VON
PERIPHEREM
BLUT
(PB)
49
4.1.2.4
STAMMZELLGEHALT
VON
GM-CSF
BEHANDELTEN
PATIENTEN
52
4.1.3
VERGLEICH
DER
KOLONIEBILDUNG
MIT/OHNE
HFFF-LAYER
55
4.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
FIBROBLASTEN
ALS
STR
OMAANA
LOGA
56
4.2.1
EXPRESSION
VON
OBERFAECHEN-ANTIGENEN
AUF
DEN
ZELLINIEN
HFFF
UND
HS68
56
4.2.2
KONSTITUTIVE
FAKTORPRODUKTION
DER
ZELLINIEN
HFFF
UND
HS68
59
4.2.3
VERGLEICH
DER
FIBROBLASTENZELLINIEN
MIT
KM-STROMA
60
4.3
STIMULATION
DER
HFFF
MIT
VERSCHIEDENEN
FAKTOREN
62
4.3.1
WIRKUNG
VON
IL-LA
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
OBERFLAECHENMOLEKUELEN
62
4.3.2
WIRKUNG
VON
IL-LA
AUF
DIE
FAKTORPRO
DUKTION
63
4.3.3
WIRKUNG
VON
IL-6
UND
GM-CSF
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
CD49D
UND
CD49F
64
4.3.4
WIRKUNG
VON
IL-1,
IL-6
UND
GM-CSF
AUF
DIE
IL-6
UND
GM-CSF
PRODUKTION
66
4.3.5
WIRKUNG
VON
TGF-/3
67
4.3.5.1
WIRKUNG
VON
TGF-/3
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
ADHAESIONSMOLEKUELEN
67
4.3.5.2
WIRKUNG
VON
TGF-0
AUF
DIE
FAKTORPRO
DUKTION
68
4.3.5.3
ZUSAETZLICHER
EINFLUSS
VON
IL-LA
ZUR
TGF-SS
INDUKTION
68
4.4
EINFLUSS
DES
ALTERS
VON
HFFF
70
4.4.1
CD49D
UND
CD49F
EXPRESSION
AUF
HFFF
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
ALTER
DER
ZELLEN
70
4.4.2
FAKTORPRODUKTION
DURCH
HFFF
IN
ABHAENGIG
KEIT
VOM
ALTER
DER
ZELLEN
73
4.5
WIRKUNG
VON
IL-1RA
AUF
HFFF
75
4.6
EXPRESSION
DER
IL-2R
A
UND
SS
-KETTE
76
4.7
NACHWEIS
DER
BINDUNG
VON
MNC
AN
DEN
FIBROBLASTENLAYER
(APAAP)
77
4.8
BINDUNGSASSAY
79
4.8.1
ETABLIERUNG
DES
BINDUNGSASSAYS
79
4.8.2
BINDUNGSVERHALTEN
VON
STAMMZELLANALOGA
(KG1,
K562,
1329DL)
AN
HFFF
80
4.8.3
BLOCKIERUNG
DER
BINDUNG
DER
STAMMZELL
ANALOGA
KG1,
K562
UND
1329DL
AN
HFFF
81
4.8.4
BINDUNGSVERHALTEN
VON
PBMNC
AN
HFFF
83
5.
DISKUSSION
84
6.
ZUSAMMENFASSUNG
112
7.
LITERATUR
113 |
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