Untersuchungen zum Einfluß der Aktin-gebundenen Nukleotide auf die Aktinpolymerisation und die ATP-Hydrolyse:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
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| Beschreibung: | Bochum, Univ., Diss., 1993 |
| Beschreibung: | 92 S. graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2
MATERIAL
UND
METHODEN
12
2.1
PRAEPARATION
DER
PROTEINE
12
2.1.1
PRAEPARATION
VON
ACETONTROCKENPULVER
AUS
KANINCHEN-SKELETTMUSKULATUR
12
2.1.2
ISOLIERUNG VON
MONOMEREM
AKTIN
AUS
ACETONTROCKENPULVER
12
2.1.3
PRAEPARATION
VON
NBD-AKTIN
13
2.1.4
PRAEPARATION
VON
ADP-AKTIN
15
2.1.5
PRAEPARATION
VON
E-ATP-AKTIN
15
2.1.6
PRAEPARATION
VON
MONOMEREM
ATP-AKTIN
L:L-KOMPLEX
16
2.1.7
PHOTOMETRISCHE
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
DER
PROTEINE
17
2.2
PRAEPARATION,
REINIGUNG
UND
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER NUKLEOTIDE
17
2.2.1
DARSTELLUNG
VON
1
,N
6
-ETHENOADENOSIN-
5'-TRIPHOSPHAT
(E-ATP)
17
2.2.2
REINIGUNG
VON
ADP
18
2.2.3
PHOTOMETRISCHE
BESTIMMUNG
DER
NUKLEOTID
KONZENTRATION
19
2.2.4
NACHWEIS
UND
BESTIMMUNG
DER
NUKLEOTIDE
MIT
HILFE
DER
HPLC
19
2.2.5
GLEICHZEITIGE
MESSUNG
DER
POLYMERISATION
UND
DER
ATP-HYDROLYSE
20
2.3
FLUORESZENZSPEKTROSKOPISCHE
MESSUNGEN
21
2.3.1
VORBEMERKUNGEN
21
2.3.2
GERAETEBESCHREIBUNG
22
2.3.3
VORBEREITUNG
DER
MESSPROBEN
23
2.3.4
BESTIMMUNG
DER
KRITISCHEN
MONOMERENKONZEN
TRATION
AM
STUMPFEN
ENDE
DER
AKTINFILAMENTE
23
2.3.5
UMRECHNUNG
DER
GEMESSENEN
FLUORESZENZ
INTENSITAETEN
IN
KONZENTRATIONEN
DER
REAKTIONSPRODUKTE
25
2.3.6
BESTIMMUNG
DER
GLEICHGEWICHTSKONSTANTEN
FUER
DEN
AUSTAUSCH
E
-ATP/ATP
UND
S-ATP/ADP
AN
MONOMEREM
AKTIN
26
3
ERGEBNISSE
28
3.1
DER
AUSTAUSCH
VON
ATP
UND
ADP
AN
MONO
MEREM
AKTIN
28
3.1.1
DIE
RELATIVE
GLEICHGEWICHTSKONSTANTE
FUER
DEN
AUSTAUSCH
VON
ADP
UND
ATP
AN
MONOMEREM
AKTIN
28
3.1.2
BESTIMMUNG
DER
RELATIVEN
AUSTAUSCHKONSTANTEN
K
T/E
UND
K
D/E
FUER
DEN
AUSTAUSCH
VON
E-ATP
GEGEN
ATP
UND
ADP
29
3.2
DIE
COPOLYMERISATION
VON
ATP-AKTIN
UND
ADP-AKTIN
34
3.2.1
MESSUNG
DER
KRITISCHEN
KONZENTRATIONEN
VON
COPOLYMEREN
AUS
ATP-AKTIN
UND
ADP-AKTIN
34
3.2.2
DAS
GLEICHGEWICHT
DER
COPOLYMERISATION
VON
ATP-AKTIN
UND
ADP-AKTIN
37
3.2.3
UNCOOPERATIVE
(STATISTISCHE)
COPOLYMERISATION
41
3.2.4
COOPERATIVE
COPOLYMERISATION
42
3.2.5
VERGLEICH
DER
GEMESSENEN
KRITISCHEN
MONOMEREN
KONZENTRATIONEN
MIT
DEN
BERECHNETEN
DATEN
43
3.2.6
DIE
ATP-HYDROLYSE
IM
STEADY
STATE
45
3.2.7
DIE
REAKTIONSGESCHWINDIGKEIT
DER
COPOLYMERI
SATION
VON
ATP-AKTIN
UND
ADP-AKTIN
47
3.2.8
VORBEMERKUNGEN
ZUR
KINETIK
DER
NUKLEIERTEN
AKTINPOLYMERISATION
49
3.2.9
KINETIK
DER
UNCOOPERATIVEN
STATISTISCHEN
COPOLYMERISATION
VON
ATP-AKTIN
UND
ADP-AKTIN
50
3.3
DIE
ATP-HYDROLYSE
VON
POLYMEREM
AKTIN
53
3.3.1
DIE
ATP-HYDROLYSE
VON
POLYMEREM
AKTIN
UNTER
DEM
ASPEKT
DER
WECHSELWIRKUNGEN
ZWISCHEN
DEN
UNTEREINHEITEN
53
3.3.2
GLEICHZEITIGE
MESSUNG
DER
HYDROLYSEGESCHWIN
DIGKEIT
UND
DER
POLYMERISATIONSGESCHWINDIGKEIT
53
3.3.3
DAS
MODELL
DER
UNCOOPERATIVEN
STATISTISCHEN
ATP-HYDROLYSE
58
3.3.4
DAS
MODELL
DER
SEQUENTIELLEN
ATP-HYDROLYSE
60
3.3.5
DAS
MODELL
DER
COOPERATIVEN
ATP-HYDROLYSE
61
3.3.6
AUSWERTUNG
DER
EXPERIMENTELLEN
DATEN
67
4
DISKUSSION
72
5
ZUSAMMENFASSUNG
81
LITERATURVERZEICHNIS
83 |
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