Import- und Exportverhalten von Schließzellchloroplasten von Pisum sativum L.: Charakterisierung des Phospat-Translokators im Hinblick auf die Funktion des Plastiden
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0
INHALTSVERZEICHNIS
I
EINLEITUNG
SEITE
1.
AUFGABE
DER
STOMATA
1
1.1.
MECHANISMUS
DER
STOMABEWEGUNG
1
1.2.
AUFNAHME
UND
ABGABE
VON
IONEN
DURCH
SCHLIESSZELLEN
2
1.3.
SIGNALE
DER
STOMABEWEGUNG
2
1.3.1.
EINFLUSS
VON
LICHT
AUF
DIE
STOMAOEFFNUNG
3
1.3.2.
EINFLUSS
VON
COJ
UND
ABSCISINSAEURE
3
2.
STOFFWECHSEL
DER
SCHLIESSZELLEN
4
2.1.
MALAT-STOFFWECHSEL
DER
SCHLIESSZELLPROTOPLASTEN
4
2.2.
BEDEUTUNG
DER
PHOTOSYNTHESE
IN
DEN
SCHLIESSZELLEN
6
2.3.
ENERGETISIERUNG
DER
H
-
*
-
-ATPASE
7
3.
DER
PHOSPHAT-TRANSLOKATOR
8
3.1.
SUBSTRATSPEZIFITAET
DES
TRANSPORTES
8
4.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
10
II
MATERIAL
UND
METHODEN
1.
MATERIAL
11
2.
METHODEN
11
2.1.
PRAEPARATION
VON
SCHLIESSZELLPROTOPLASTEN
11
2.1.1.
BESCHREIBUNG
DER
MODIFIZIERTEN
PROTOPLASTENPRAEPARATION
12
2.2.
PRAEPARATION
DER
CHLOROPLASTEN
13
2.3.
INTAKTHEIT
DER
CHLOROPLASTEN
UND
ENZYMATISCHE
AKTIVITAETEN
13
2.3.1.
LATENZMESSUNG
ZUR
BESTIMMUNG
DER
INTAKTHEIT
DER
SCHLIESSZELLCHLOROPLASTEN
14
2.3.2.
AKTIVITAET
DER
[NADPJ-ABHAENGIGEN
GAPDH
(EC
5.3.1.1)
14
2.3.3.
A-MANNOSIDASE-AKTIVITAET
(EC
3.2.1.24)
15
2.3.4.
AKTIVITAET
DER
CITRAT-SYNTHASE
(EC
4.1.7.3)
16
2.3.5.
AKTIVITAET
DER
PEP-CARBOXYLASE
(EC
4.1.1.31)
17
2.3.6.
GLUCOSE
6-PHOSPHAT-DEHYDROGENASE
(EC
1.1.1.49)
18
2.3.7.
ADP-GLUCOSE-PYROPHOSPHORYLASE
(EC
2.7.7.27)
18
2.3.8.
6-PHOSPHOGIUCONAT-DEHYDROGENASE
(EC
1.1.1.44)
19
2.3.9.
HEXOKINASE
(EC
2.7.10.1)
20
3.
BEZUGSGROESSEN
21
3.1.
ZELLZAHLBESTIMMUNG
UND
MESOPHYLLKONTAMINATION
21
3.2.
CHLOROPHYLLBESTIMMUNG
21
3.3.
BESTIMMUNG
DES
CHLOROPLASTENVOLUMENS
22
4.
SILIKONOELFILTRATION
23
4.1.
PROBENGEWINNUNG
ZUR
BESTIMMUNG
DER
MARKERENZYMAKTIVITAET
24
4.2.
BESTIMMUNG
VON
WASSER
UND
SORBITRAUM
24
4.3.
EXPERIMENTE
MIT
RADIOAKTIV
MARKIERTEM
SUBSTRAT
26
4.3.1.
TRANSPORTEXPERIMENTE
MIT
|32P]ORTHOPHOSPHAT
ALS
SUBSTRAT
27
4.3.2.
TRANSPORTEXPERIMENTE
MIT
[
14C]GLUCOSE
6-PHOSPHAT
ALS
SUBSTRAT
28
4.3.3.
AUFNAHME
NICHT
PHOSPHORYLIERTER
HEXOSEN
29
4.3.4.
PROBENGEWINNUNG
DER
EXPERIMENTE
ZUM
METABOLITEXPORT
29
5.
METABOLITMESSUNGEN
31
5.1.
3-PHOSPHOGLYCERAT
31
5.2.
MALAT
32
5.3.
GLUCOSE
6-PHOSPHAT,
FRUCTOSE
6-PHOSPHAT
32
5.4.
6-PHOSPHOGLUCONAT
33
5.5.
PYRUVAT,
TRIOSE-PHOSPHAT,
2-OXOGUTARAT
33
5.6.
FRUCTOSE
1,6-BISPHOSPHAT
34
5.7.
ATP
35
5.8.
ADP
36
6.
CHLOROPHYLLFLUORESZENZ-MESSUNGEN
37
III
ERGEBNISSE
1.
KONTROLLUNTERSUCHUNGEN
DER
PRAEPARATION
40
1.1.
INTAKTHEIT
DER
SCHLIESSZELLCHLOROPLASTEN
40
1.2.
AUSBEUTE
UND
REINHEIT
41
2.
CHLOROPHYLLGEHALT
UND
VOLUMEN
DER
SCHLIESSZELLCHLOROPLASTEN
44
3.
UNTERSUCHUNG
DER
PHOSPHAT-AKKUMULATION
45
3.1.
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
PHOSPHAT-AUFNAHME
45
3.2.
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
PHOSPHAT-AKKUMULATION
47
3.3.
PHOSPHAT-AUFNAHME
BEI
GLEICHZEITIGEM
ANGEBOT
VON
KONKURRENZSUBSTRATEN
49
4.
UNTERSUCHUNG
DER
AKKUMULATION
VON
GLUCOSE
6-PHOSPHAT
54
4.1.
AKKUMULATION
VON
GLC6P
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
INKUBATIONSZEIT
54
4.2.
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
G6P-AKKUMULATION
56
4.3.
INHIBITION
DER
G6P-AKKUMULATION
DURCH
KONKURRENZSUBSTRATE
58
5.
INHIBITION
DER
PI-AKKUMULATION
DURCH
PHARMAKOLOGISCHE
SUBSTANZEN
62
5.1.
INHIBITION
DER
PI-AKKUMULATION
DURCH
PYRIDOXALPHOSPHAT
62
5.2.
INHIBITION
DER
PI-AKKUMULATION
DURCH
DIDS
64
6.
AUFNAHME
NICHT-PHOSPHORYLIERTER
HEXOSEN
UND
AKTIVITAETEN
HEXOSE-METABOLISIERENDER
ENZYME
66
7.
METABOLITEXPORT
IM
GEGENTAUSCH
ZU
IMPORTIERTEN
PHOSPHAT
69
7.1.
EXPORT
IM
DUNKELN
70
7.1.1.
ZEITABHAENGIGKEIT
DES
DUNKELEXPORTES
70
7.1.2.
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DES
EXPORTES
IM
DUNKELN
72
7.2.
EXPORT
VON
METABOLITEN
IM
LICHT
74
7.3.
EXPORT
IM
LICHT
BEI
ZUSAETZLICHEM
ANGEBOT
VON
OXALACETAT
76
7.4.
UEBERSICHT
UEBER
DIE
KONZENTRATIONEN
DER
METABOLITE
IM
SCHLIESSZELLCBLOROPLASTEN
78
7.5.
AENDERUNG
DER
ATP-KONZENTRATION
IN
DER
UMGEBENDEN
LOESUNG
82
8.
PSII-FLUORESZENZ
VON
CHLOROPLASTEN
DER
SCHIIESSZELLE
84
8.1.
ELEKTRONEN-TRANSPORT
DES
SCHLIESSZELLCHLOROPLASTEN
85
8.2.
FLUORESZENZLOESCHUNG
NACH
ZUGABE
VERSCHIEDENEN
METABOLITE
90
IV
DISKUSSION
1.
EINORDNUNG
UND
BEWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
97
1.1.
VERGLEICH
DES
PHOSPHAT-TRANSLOKATORS
AUS
SCHLIESSZELLCHLOROPLASTEN
MIT
DEM
AMYLOPLASTIDAEREN
TRANSLOKATOR
97
1.2.
BEWERTUNG
UND
INTERPRETATION
DER
METABOIITGEHALTE,
DES
EXPORTVERHALTENS
UND
DES
ENERGIEZUSTANDS
DER
CHLOROPLASTEN
98
1.2.1.
DAS
DHAP/PGA-VERHAELTNIS
99
1.2.2.
DIE
HEXOSE-PHOSPHATE
99
1.2.3.
MALAT
UND
PYRUVAT-GEHALTE
100
1.Z4.
DAS
REDOXVERHAELTNIS
100
1.2.5.
ERHOEHUNG
DER
ATP-KONZENTRATION
IN
DER
UMGEBENDEN
LOESUNG
102
2.
STOFFWECHSEL
DER
SCHLIESSZELLCHLOROPLASTEN
104
2.1.
DIE
THERMODYNAMISCHE
NOTWENDIGKEIT
DES
EXPORTES
VON
3-PHOSPHOGLYCERAT
104
2.2.
DIE
ROLLE
DER
RUBISCO
107
2.3.
DER
PHOTOSYNTHETISCHE
ELEKTRONENTRANSPORT
110
3.
MODELLVORSTELLUNG
ZUR
STOMAOEFFNUNG
112
3.1.
ABLAUF
IM
DUNKELN
112
3.2.
ABLAUF
IM
LICHT
115
3.3.
DIE
TRANSDUKTION
DES
LICHTSIGNALS
116
V
ZUSAMMENFASSUNG
119
IV
LITERATURVERZEICHNIS
122 |
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| spelling | Overlach, Susanne Verfasser aut Import- und Exportverhalten von Schließzellchloroplasten von Pisum sativum L. Charakterisierung des Phospat-Translokators im Hinblick auf die Funktion des Plastiden vorgelegt von Susanne Overlach 1993 VII, 131 S. graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Göttingen, Univ., Diss., 1993 Carrier-Proteine (DE-588)4213127-3 gnd rswk-swf Chloroplast (DE-588)4147821-6 gnd rswk-swf Schließzelle (DE-588)4179747-4 gnd rswk-swf Stoffwechsel (DE-588)4057699-1 gnd rswk-swf Phosphate (DE-588)4134029-2 gnd rswk-swf Erbse (DE-588)4152604-1 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Erbse (DE-588)4152604-1 s Schließzelle (DE-588)4179747-4 s Chloroplast (DE-588)4147821-6 s Stoffwechsel (DE-588)4057699-1 s DE-604 Phosphate (DE-588)4134029-2 s Carrier-Proteine (DE-588)4213127-3 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006350779&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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