Untersuchungen zu den Wechselwirkungen des a2-Makroglobulins mit immobilisierten Metallen:
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| Format: | Buch |
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1993
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| Beschreibung: | Leipzig, Univ., Diss., 1993 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
1.1.
1.1.1.
1.1.1.1.
1
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1
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1
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2
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2.1
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2.2
1.1.3.
1.1.4.
1.1.5.
1
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1
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6
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1
.
2
.
1.3.
EINFUEHRUNG
STRUKTUR UND FUNKTION VON O^MAKROGLOBULIN 1
PHYSIKO-CHEMLSCHE EIGENSCHAFTEN 1
THIOLESTERSTRUKTUR ^
2
BAIT-REGION
3
FUNKTION
3
PROIEASENINHIBLTOR
TRANSPORTPROTEIN 4
5
METABOLISMUS
3
VORKOMMEN
P
KLINISCHE ASPEKTE
CX2-MAKROGLOBULLN ALS METALLBINDENDES PROTEIN 9
WECHSELWIRKUNGEN ZWISCHEN PROTEINEN UND LMMOBILISIEITCN METALLEN 10
AUFGABENSTELLUNGEN UND ZIELE DER ARBEIT
15
2. MATERIALIEN UND METHODEN
2.1. MATERIALIEN
2.1.1. LABORCHEMIKALIEN UND TECHNISCHE HILFSMITTEL
2.1.2. CHARAKTERISIERUNG DER PLASMEN
2.2. METHODEN
2.2.1. AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
2.2.1.1. PRAEPARATION DER IDA-SEPHAROSE
2.2.1.2. HERSTELLUNG DER METALL-IDA-SEPHAROSE
2.2.1.3. BESCHREIBUNG EINES ANALYTISCHEN CHROMATOGRAPHISCHEN
EXPERIMENTES
2.2.2. ZWEI-PHASEN-VERTEILUNG
2.2.2.1. PRAEPARATION VON IDA-PEG UND TED-PEG
2.2.2.2. HERSTELLUNG DES METALL-IDA-PEG
2.2.2.3. VERTEILUNGSKOEFFIZIENT
2.2.2.4. VERTEILUNGSEXPERIMENTE
2.2.2.4.1. EIN-SCHRILT-VERTEILUNG IN WAESSRIGEN ZWEI-PHASEN-SYSTEMEN
2.2.2.4.2. GEGENSTROMVERTEILUNG IN WAESSRIGEN ZWEI-PHASEN-SYSTEMEN
2.2.3. ELEKTROPHORETISCHE METHODEN
2.2.3.1. PORENGRADIENTENELEKTROPHORESE
2.2.3.2. PLATTENELEKTROPHORESE
2.2.4. BESTIMMUNG DER PROTEINKONZENTRATION
2.2.5. ELISA
2.2.5.1. HERSTELLUNG MONOKLONALER ANTIKOERPER
16
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23
24
24
24
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/940666448
2.2.5.1.1. IMMUNISIERUNG DER MAEUSE 24
2 2.5.1.2. KULTIVIERUNG DER MYELOMZELLEN 25
2.2.5.1.3. GEWINNUNG DER PERITONEALMAKROPHAGEN 25
2.2.5.1.4. GEWINNUNG ANTIGENSENSIBILISIERTER IMMUNOBLASTEN AUS DER MILZ
25
2.2.5.1.5. ZELLLUSION 25
2.2 5.1.6. TEST DER FUSIONIERTEN ZELLEN AUF ANTIKOERPERPRODUKTION 26
2.2.51.7. REKLONIERUNG 26
2.2.5.1.8. KONSERVIERUNG DER HYBRIDOME 26
2.2.5.1.9. ANTIKOERPERPRODUKTION IN DER MAUS 26
2.2.5.1.10. REINIGUNG DER MONOKLONALEN ANTIKOERPER AUS ASCITES 27
2.2.5.2. GEWINNUNG UND ENZYMMARKIERUNG DES POLYKLONALEN ANTIKOERPERS 27
2.2.5.3. AUFBAU DES ELISA ZUM NACHWEIS DES TRANSFORMIERTEN UND DES
GESAMT- X
2
MAKROGLOBULINS 28
2.2.6. HERSTELLUNG VON A
2-MAKROGLOBULIN UND O^-MAKROGLOBULIN-DERIVATEN 29
2.2.6.1. REINIGUNG VON (X
2-MAKROGLOBULIN 29
2.2.6.2. HERSTELLUNG VON
2-MAKROGLOBULIN-DERIVATEN 29
2.2.6 3. HERSTELLUNG VON ZN
2*-FREIEM UND ZN24--BELADENEM C^-MAKROGLOBULIN 30
2.2.6.4. MODIFIZIERUNG DES A
2-MAKROGLOBULINS MIT DIETHYLPYROCARBONAT 30
2.2.7. PRAEPARATION DES C-TENNINALEN PEPTIDS DES OT
2-MAKROGLOBULINS 31
3. ERGEBNISSE 32
3.1. AULBAU EINES ELISA ZUR BESTIMMUNG DER KONZENTRATION DER GESAMT-
UND DER TRANSFORMIERTEN FORM DES O^-MAKROGLOBULINS 32
3.1.1. AUSWAHL DER MONOKLONALEN ANTIKOERPER 32
3.1.1.1. CHARAKTERISIERUNG KONFONNALIONSSPEZIFISCHER ANTIKOERPER DURCH
ELISA 32
3.1.1.2. CHARAKTERISIERUNG KONFONNALIONSSPEZIFISCHER ANTIKOERPER DURCH
ELEKTROPHORESE 38
3.1.2. AUFBAU DES ELISA ZUR BESTIMMUNG DER GESAMLKONZENTRAUON DES
RA
2-MAKROGLOBULINS 40
3.1.3. AULBAU DES ELISA ZUR BESTIMMUNG DER KONZENTRATION DER TRANSFOR
MIERTEN FONN DES A
2-MAKROGLOBULINS 42
3.2. WECHSELWIRKUNGEN DES CX
2-MAKROGLOBULINS MIT METALLCHELALEN 43
3.2.1. AFFINITAETSVERTEILUNG VONOE
2-MAKROGLOBULIN IN WAESSRIGEN ZWEI-PHASEN-
SYSTEMEN 43
3.2.1.1. WECHSELWIRKUNGEN VONA
2-MAKROGLOBULIN MIT IMMOBILISIERTEN
METALLEN IN PEG-DEXTRAN-SYSTEMEN 43
3.2.1.2. BEDEUTUNG DER CHELATSTRUKTUR FUER DIE BINDUNG VON
IMMOBILISIERTEN
METALLEN AN
2-MAKROGLOBULIN 45
3.2.1.3. EFFEKT VON IMMOBILISIERTEN METALLEN AUF DIE VERTEILUNG VON
TRANSFOR
MIERTEM
2
-MAKROGLOBULIN 45
3.2.1.4. EINFLUSS VON ENDOGEN GEBUNDENEM ZN
2+ AUF DIE AFFINILAETSVERTEILUNG VON
2
-MAKROGLOBULIN 47
3.2.1.5. EINFLUSS DES PH-WERTES AUF DIE
2-MAKROGLOBULIN -BINDUNG 48
3.2.1.6. BCEINFLUSSUNG DES VERTEILUNGSVERHALTENS DES
2-MAKROGLOBULINS
DURCH EFFEKTOREN 51
3.2.1.7. VERTEILUNG VON
2
-MAKROGLOBULIN IN PEG-SALZ-SYSTEMEN 54
3.2.1.8. EINFLUSS DER PROTEINKONZENTRATION AUF DIE AFFLNLTAETSVERTCLLUNG
VON
2-MAKROGLOBULIN 56
3.2.1.9. CCD VON
2-MAKROGLOBULIN UND PLASMA 59
3.2.2. ANALYTISCHE SAEULENCHROMATOGRAPHISCHE UNTERSUCHUNGEN 62
3.2.2.1. ERMITTLUNG BINGUNGSANALYLISCHER DATEN 62
3.2.2.2. UNTERSUCHUNGEN ZUR DISSOZIATION DES
PROTELN-METALLCHELAT-KOMPLEXES 64
3.2.2.2.1. ELUTION DES PROTEINS MITTELS EINES IMIDAZOLGRADIENTEN 64
3.2.2.2.2. ELUTION DES PROTEINS MITTELS EINES EDTA-GRADIENTEN 65
3.2.2.2.3. ELUTION DES PROTEINS MITTELS EINES PII-GRADIENTEN 66
3.3. PRAEPARATION VON
2
-MAKROGLOBULIN 69
4. DISKUSSION
73
4.1. AUIBAU UND ERGEBNISSE DES ELISA 73
4.2. CHARAKTERISIERUNG DER WECHSELWIRKUNGEN ZWISCHEN IMMOBILISIERTEN
METALLCHELATEN UND
2
-MAKROGLOBULIN 76
4.3. EINSCHAETZUNG DER ERGEBNISSE DER A
2-MAKROGLOBULIN-PRAEPARATION 81
5. ZUSAMMENFASSUNG
83 |
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