Expression und Regulation des BDNF-Gens während der Entwicklung des visuellen Systems des Huhns:
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS
L
EINLEITUNG
1
N.
ABKUERZUNGEN
11
M.
MATERIAL
&
METHODEN
13
I.
BESONDERE
CHEMIKALIEN,
VERBRAUCHS
UND
BIOLOGISCHES
MATERIAL
13
2.
BESONDERE
GERAETE
19
3.
VERWENDETE
LOESUNGEN
19
4.
METHODEN
26
4.1.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
26
4.1.1.
GELE
ZUR
ANALYSE
VON
DNS
26
4.1.1.1.
AGAROSEGEL
26
4.1.1.2.
POLYACRYLAMIDGELE
26
4.1.2.
MESSEN
VON
NUKLEINSAEUREN
26
4.1.3.
OLIGODESOXYNUKLEOTIDE
27
4.1.4.
RESTRIKTIONSVERDAU
27
4.1.5.
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
27
4.1.6.
HERSTELLEN
VON
SONDEN
28
4.1.6.1.
RADIOAKTIVES
MARKIEREN
VON
OLIGODESOXYNUKLEOTIDEN
28
4.1.6.2.
RADIOAKTIVES
MARKIEREN
VON
CRNS
28
4.1.6.3.
HERSTELLEN
DER
MARKIERTEN
CDNS
29
4.1.7.
RNS-ISOLIERUNG
31
4.1
8.
POLYA+MRNS-PRAEPARATION
32
4
1.9.
DENATURIERENDES
FORMALDEHYDGEL
32
4.1.10.
NORTHERN-TRANSFER
33
4.1.11
CDNS-SYNTHESE
34
4.1.12.
PCR
34
4
1.13
RT-PCR
35
4
1.14.
ANALYSE
VON
PCR-PRODUKTEN
35
4.1.14.1.
GELELEKTROPHORESE
UND
TRANSFER
AUFNYLONFILTER
35
4
1.14.2.
HYBRIDISIERUNG
36
4
1.14.3.
NACHWEIS
DER
DIGOXYGENINMARKIERTEN
SONDE
36
4
1.15
AUSWERTUNG
DER
AUTORADIOGRAMME
37
4.1.16.
HERSTELLEN
DES
STANDARDS
FUER
DIE
RT-PCR
37
4
1
16
1.
HERSTELLEN
DER
INSERTIONS-DNS
38
4.1.16
2.
LIGATION
38
4
1.163.
ELEKTROTRANSFORMATION
39
4.2.
GEWEBEPRAEPARATION
YY42
4.3
EMBRYOMANIPULATIONEN
42
4.3
1.
DURCHTRENNUNG
DES
OPTISCHEN
STIELS
43
4.3.2.
APPLIKATION
VON
DROGEN
43
4
3
2.1.
INJEKTION
VON
TTX
43
43
22.
APPLIKATION
VON
DROGEN
AUF
DIE
CHORIOALLANTOISMEMBRAN
43
4.3.2.3.
INJEKTION
VON
PHARMAKA
IN
DAS
OPTISCHE
TEKTUM
44
IV.
ERGEBNISSE
45
1.
1.1.
1.2.
1.3.
1.4.
1.4.1.
1.4.2.
1.4.3.
1.4.4.
1.4.5.
1.5.
1.6.
1.7.
1.8.
1.9.
1.10.
2.
2.1.
2.2.
3.
3.1.
OPTIMIERUNG
DER
RT-PCR
45
UEBERPRUEFEN
DER
RNS-QUALITAET
45
CDNS-SYNTHESE
46
PCR
46
STEIGERUNG
DER
SENSITIVITAET
47
VERSCHIEDENE
TAQ-POLYMERASEN
47
VERSCHIEDENE
REVERSE
TRANSKRIPTASEN
48
REVERSE
TRANSKRIPTIONS-PCR
48
OPTIMIERUNG
DER
BEDINGUNGEN
FUER
DIE
REVERSE
TRANSKRIPTION
49
VERSCHIEDENE
SONDEN
51
HERSTELLEN
DES
STANDARDS
51
OPTIMIERUNG
DER
ZYKLENZAHL
55
DNS-KONTAMINATION
56
UNSPEZIFISCHE
AMPLIFIKATIONSPRODUKTE
57
QUANTIFIZIERUNG
MIT
RT-PCR
58
VERGLEICH
DER
QUANTIFIZIERUNG
DURCH
RT-PCR
MIT
NORTHERN TRANSFER
61
VERTEILUNG
VON
BDNFMRNS
65
ZEITVERLAUF
DER
BDNFMRNS-EXPRESSION
IM
EMBRYONALEN
TEKTUM
65
ZEITVERLAUF
DER
BDNFMRNS-EXPRESSION
IN
DER
RETINA
67
REGULATION
DER
BDNFMRNS
68
BDNFMRNS-EXPRESSION
IM
TEKTUM
NACH
DURCHTRENNEN
DES
OPTISCHEN
STIELS
68
3.2.
3.3.
3.4.
BDNFMRNS-EXPRESSION
IM
TEKTUM
NACH
APPLIKATION
VON
TTX
69
EINFLUSS
VON
GLUTAMAT
AUF
DIE
BDNFMRNS-EXPRESSION
70
EINFLUSS
VON
ACETYLCHOLIN
UND
GABA
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
BDNFMRNS
IN
VIVO
73
V.
DISKUSSION
76
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
106
VH.
LITERATUR
107 |
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