Kapillarelektrophorese: Analytik von homologen Polynukleotiden
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Marburg/Lahn, Univ., Diss., 1993 |
| Beschreibung: | III, 202 S. Ill., graph. Darst. |
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I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
UND
PROBLEMSTELLUNG
.
1
1.1
CHROMATOGRAPHIE,
ELEKTROPHORESE
UND
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
1
1.2
TRENNUNGEN
VON
POLYNUKLEOTIDEN
ALS
VERTRETER
GROSSER
BIOMOLEKUELE
.
2
2
THEORIE
ELEKTROPHORETISCHER
TRENNUNGEN
IN
KAPILLAREN
.
7
2.1
ELEKTROPHORESE
UND
ELEKTROPHORETISCHE
MOBILITAET
.
7
2.2
ELEKTROPHORETISCHE MOBILITAET
VON
POLYNUKLEOTIDEN
IN
FREIER
LOESUNG
.
10
2.3
ELEKTROOSMOSE
UND
ELEKTROOSMOTISCHER
FLUSS
.
14
2.4
METHODEN
DER
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
19
2.4.1
DIE
KAPILLARELEKTROPHORESE
ALS
TRENNMETHODE
.
20
2.4.2
KAPILLARZONENELEKTROPHORESE
.
22
2.4.3
KAPILLARGELELEKTROPHORESE
.
23
2.4.4
ELEKTROKINETISCHE-KAPILLAR-CHROMATOGRAPHIE
(EKC)
.
24
2.4.5
ELEKTROCHROMATOGRAPHIE
IN
KAPILLAREN
(CEC)
.
25
2.4.6
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
(IEF)
.
25
2.4.7
ISOTACHOPHORESE
(ITP)
.
26
2.5
PARAMETER
DER
ANALYTISCHEN
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
27
2.5.1
MIGRATIONSZEIT
EINES
ANALYTEN
.
27
2.5.2
EFFIZIENZ
UND
AUFLOESUNG
.
28
2.5.3
VERBREITERUNG
DER
PROBENZONE
.
29
2.5.4
PROBENAUFGABE
UND
QUANTITATIVE
ANALYSE
.
32
2.6
ELEKTROPHORETISCHE MOBILITAET
IN
POLYMEREN
NETZWERKEN:
MECHANISMUS
DER
TRENNUNG
NACH
DER
MOLEKUELGROESSE
.
34
2.6.1
OGSTON-MODELL
.
35
2.6.2
"REPTATION"-MODELL
.
37
2.6.3
"BIASED-REPTATION"-MODELL
.
38
2.7
BETRACHTUNGEN
ZU
POLYMEREN
TRENNMATRICES
IN
DER
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
40
2.7.1
VERNETZTE
POLYACRYLAMIDGELE
.
41
2.7.2
PHYSIKALISCHE
NETZWERKE
.
43
2.7.3
VERDUENNTE
POLYMERLOESUNGEN
.
45
2.7.4
EIGENSCHAFTEN
VON
GELEN
UND
POLYMERLOESUNGEN
FUER
DIE
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
49
N
3
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
DER
CGE-TRENNUNGEN
.
50
3.1
LINEARE
POLYACRYLAMIDGELE
ALS
TRENNMATRICES
FUER
DNA-FRAGMENTE
.
50
3.2
EINFLUSS
DER
TEMPERATUR
AUF
TRENNUNGEN
VON
DNA-FRAGMENTEN
IN
DER
CGE
.
56
3.3
REPRODUZIERBARKEIT
DER
MIGRATIONSZEITEN
IN
DER
CGE
.
59
3.4
TRENNUNGEN
MIT
GELEN
AUS
N
-
SUBSTITUIERTEN
ACRYLAMIDEN
.
68
4
YY
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION:
TRENNUNGEN
VON
POLYNUKLEOTIDEN
MIT
VERDUENNTEN
POLYMERLOESUNGEN
.
72
4.1
ASPEKTE
DER
KAPILLARVORBEHANDLUNG
.
73
4.2
EINFLUSS
DER
TEMPERATUR
AUF
TRENNUNGEN
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
81
4.3
EINFLUSS
DER
FELDSTAERKE
.
87
4.4
EINFLUSSDESPUFFERS
.
91
4.4.1
EINFLUSS
DER
KONZENTRATION
DER
POLYMERLOESUNG
.
91
4.4.2
EINFLUSS
DER
KETTENLAENGE
DES
POLYMERS
.
108
4.4.3
TRENNUNGEN
MIT
UNTERSCHIEDLICHEN
POLYMEREN
IN
DER
PUFFERLOESUNG
.
113
4.4.3.1
VERGLEICH
VON
HEC,
PAA
UND
PDMA
.
114
4.4.3.2
PVA
ALS
POLYMERES
NETZWERK
.
121
4.4.4
EINFLUSS
DER
IM
PUFFER
ENTHALTENEN
KLEINEN
IONEN
.
127
4.4.4.1
EXPERIMENTE
MIT
PUFFERN
VERSCHIEDENER
LONENSTAERKE
.
127
4.4.4.2
VERGLEICH
EINES
PHOSPHAT-PUFFERS
MIT
EINEM
TRIS/
BORAT-PUFFER
.
128
4.4.4.3
EINFLUSS
VON
ETHIDIUMBROMID
ALS
PUFFERZUSATZ
.
132
4.4.5
EINFLUSS
DER
VISKOSITAET
DES
PUFFERLOESUNGSMITTELS
.
141
5
ANWENDUNGEN
.
148
5.1
TRENNUNG
VON
EINZELSTRAENGIGEN
OLIGONUKLEOTIDEN
(10.000-20.000
DALTON)
.
148
5.2
TRENNUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
GLEICHER
GROESSE,
ABER
UNTERSCHIEDLICHER
SEQUENZ
.
151
5.3
ANWENDUNG
DER
CE
AUF
PRAKTISCHE
PROBEN
.
155
6
VERGLEICH
VON
POLYNUKLEOTID-TRENNUNGEN
MIT
CGE
UND
CE
.
163
7
EXPERIMENTELLER
TEIL
.
168
7.1
BESCHREIBUNG
DES
CE-INSTRUMENTES
.
168
7.2
TRENNKAPILLAREN
.
172
7.2.1
HERSTELLUNG
VON
FENSTERN
FUER
DIE
"ON-COLUMN"-DETEKTION
.
172
7.2.2
MODIFIZIERUNG
DER
KAPILLAROBERFLAECHE
.
173
IN
7.2.2.1
PERMANENTE
BESCHICHTUNG
DER
KAPILLAROBERFLAECHE
NACH
HJERTEN
.
173
7.2.2.2
DYNAMISCHE
OBERFLAECHENVORBEHANDLUNG
.
176
7.2.3
HERSTELLUNG
VON
GELGEFFLLLTEN
KAPILLAREN
FUER
DIE
CGE
.
177
7.2.3.1
RADIKALISCHE
VINYLPOLYMERISATION
MIT
APS
UND
TEMED
.
177
7.2.3.2
RADIKALISCHE
VINYLPOLYMERISATION
MIT
"/-STRAHLUNG
.
179
7.3
HERSTELLUNG
DER
PUFFERLOESUNGEN
FUER
DIE
CGE
UND
CE
.
179
7.3.1
PHOSPHAT-PUFFER
.
179
7.3.2
TRIS/BORAT-PUFFER
.
180
7.3.3
HERSTELLUNG
DER
POLYMERLOESUNGEN
.
180
7.3.4
HERSTELLUNG
VON
VERDUENNTEN
PAA-TRENNPUFFEM
FUER
DIE
CE
.
181
7.4
DURCHFUEHRUNG
DER
MESSUNGEN
.
182
7.4.1
MESSUNGEN
ZUM
EOF
.
182
7.4.2
DURCHFUEHRUNG
DER
DNA-TRENNUNGEN
.
183
7.4.3
MESSUNG
DER
DYNAMISCHEN
VISKOSITAET
DER
POLYMERLOESUNGEN
.
184
7.5
UEBERSICHT
UEBER
DIE
VERWENDETEN
CHEMIKALIEN
.
184
8
ZUSAMMENFASSUNG
.
186
9
ANHANG
.
190
10
LITERATURVERZEICHNIS
.
192
11
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
.
201 |
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