Die mitochondriale Fettsäuresynthese in Neurospora crassa:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
1
2.
EINLEITUNG
2.1
DIE
FETTSAEURESYNTHESE
IN
PRO
UND
EUKARYONTEN
3
2.2
DAS
ACYL-CARRIER
PROTEIN
(ACP)
6
2.3
DAS
MITOCHONDRIALE
ACYL-CARRIER
PROTEIN
8
2.4
DIE
NADH:UBICHINION
OXIDOREDUKTASE
(KOMPLEX
I)
11
2.5
DIE
LIPIDE
DER
MITOCHONDRIENMEMBRAN
14
2.6
THEMA
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
16
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
3.1
ANZUCHT
DER
MIKROORGANISMEN
18
3.2
IN-VIVO
MARKIERUNG
VON
KOMPLEX
I
MIT
[
14
C]-
19
PANTOTHENSAEURE,
[
14
C]-MALONSAEURE,
[
14
C]-MYRISTIN
SAEURE
UND
[
3
5
S]-METHIONIN
3.3
ISOLIERUNG
KLEINER
MENGEN
RADIOAKTIV
MARKIERTER
20
MITOCHONDRIEN
UND
AUFTRENNUNG
DER
MITOCHONDRIALEN
PROTEINE
DURCH
ZUCKERGRADIENTEN-ZENTRIFUGATION
3.4
IMMUNPRAEZIPITATION,
SDS-GELELEKTROPHORESE
UND
21
AUTORADIOGRAPHIE
VON
RADIOAKTIV
MARKIERTEM
KOMPLEX
I
3.5
ISOLIERUNG
DER
NATIVEN
ACP-UNTEREINHEIT
VON
22
KOMPLEX
I
3.6
GASCHROMATOGRAPHISCHE
ANALYSE
DER
ACYLGRUPPEN
24
DES
ACPS
3.7
CHROMATOGRAPHISCHER
NACHWEIS
DER
PROSTHETISCHEN
24
GRUPPE
DES
ACPS
3.8
PRAEPARATION
DES
ACYL-CARRIER
PROTEINS
AUS
E.
COLI
27
3.9
CHEMISCHE
SYNTHESE
VON
OLEYL-ACP
28
3.10
ENZYMATISCHE
SYNTHESE
VON
OLEYL-ACP
UND
OLEYL-COA
29
3.11
TESTANSATZ
ZUR
UNTERSUCHUNG
VON
OLEYL-ACP
UND
31
OLEYL-COA
ALS
SUBSTRATE
EINER
DE
NOVO
LIPIDSYNTHESE
BZW.
EINER
TRANSACYLIERUNG
3.12
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE
AUFTRENNUNG
DER
32
REAKTIONSPRODUKTE
DER
ACYLIERUNGSTESTS
3.13
GEWINNUNG
POLYVALENTER
ANTISEREN
UND
WESTERN-BLOT
32
ANALYSE
3.14
VERSCHIEDENE
ANALYTISCHE
METHODEN
34
4.
ERGEBNISSE
4.1
IN
VIVO
MARKIERUNG
DER
ACP-UNTEREINHEIT
DES
35
KOMPLEX
I
MIT
[
14
C]-PANTOTHENSAEURE
4.2
IN
VIVO
MARKIERUNG
DER
ACP-UNTEREINHEIT
DES
38
KOMPLEX
I
MIT
(
14
C]-MALONSAEURE
4.3
KEINE
IN
VIVO
MARKIERUNG
DER
ACP-UNTEREINHEIT
DURCH
40
[
14
C]-MYRISTINSAEURE
4.4
CHROMATOGRAPHISCHER
NACHWEIS
VON
PANTETHEIN
ALS
42
PROSTHETISCHER
GRUPPE
DER
ACP-UNTEREINHEIT
4.5
ISOLIERUNG
DES
KOMPLEX
I
AUS
N.
CRASSA
44
4.6
ISOLIERUNG
DER
ACP-UNTEREINHEIT
VON
KOMPLEX
I
47
4.7
GASCHROMATOGRAPHISCHE
IDENTIFIZIERUNG
DER
50
ACYLGRUPPEN
AN
DER
ACP-UNTEREINHEIT
4.8
ISOLIERUNG
DES
ACYL-CARRIER
PROTEINS
AUS
E.
COLI
51
4.9
UNTERSUCHUNG
VON
OLEYL-ACP
UND
OLEYL-COA
ALS
53
SUBSTRATE
EINER
MOEGLICHEN
DE
NOVO
LIPIDSYNTHESE
IN
N.
CRASSA
MITOCHONDRIEN
4.10
UNTERSUCHUNG
VON
OLEYL-ACP
UND
OLEYL-COA
ALS
55
SUBSTRATE
EINER
TRANSACYLIERUNG
IN
N.
CRASSA
MITOCHONDR
IEN
4.11
SPEZIFITAET
DER
GEWONNENEN
ANTISEREN
57
5.
DISKUSSION
5.1
UBIQUITAERES
VORKOMMEN
DES
MITOCHONDRIALEN
ACYL
59
CARRIER
PROTEINS
5.2
NACHWEIS
WEITERER
ENZYME
EINES
FAS
TYP
II
IN
DEN
61
MITOCHONDRIEN
5.3
WEITERE
HINWEISE
AUF
EINE
DE
NOVO
FETTSAEURESYNTHESE
62
IN
DEN
MITOCHONDRIALEN
5.4
WAS
SIND
DIE
ENDPRODUKTE
DER
MITOCHONDRIALEN
FETT
64
SAEURESYNTHESE?
5.5
WOZU
WERDEN
DIE
PRODUKTE
DER
MITOCHONDRIALEN
65
FETTSAEURESYNTHESE
BENOETIGT?
5.6
WARUM
IST
DAS
MITOCHONDRIALE
ACP
EINE
UNTEREINHEIT
67
DES
KOMPLEX
I?
6.
LITERATURVERZEICHNIS
68 |
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