Verfügbarkeit: Durchflußzytometrie in der klinischen Zelldiagnostik

Durchflußzytometrie in der klinischen Zelldiagnostik: mit 61 Tabellen

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Format:	Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	Stuttgart [u.a.] Schattauer 1994
Schlagworte:	Flow Cytometry Cell Separation Cytodiagnostik Durchflusscytometrie
Online-Zugang:	Inhaltsverzeichnis
Beschreibung:	Literaturangaben
Beschreibung:	XLI, 559 S. Ill., graph. Darst.
ISBN:	3794515781

Internformat

MARC


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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS EINFUEHRUNG IN DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE 1 GRUNDLAGEN DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 3 1 EINLEITUNG . 3 2 PHYSIKALISCHE GRUNDLAGEN . 5 2.1 LICHTQUELLE . 6 2.2 FLUORESZENZ . 8 2.3 STREULICHT . 13 3 AUFBAU EINES ANALYTISCHEN DURCHFLUSSZYTOMETERS . 14 3.1 FLUESSIGKEITSSYSTEM . 15 3.2 OPTISCHES SYSTEM . 16 3.3 SIGNALVERARBEITUNG . 17 3.4 DARSTELLUNG DER MESSERGEBNISSE . 19 3.5 DEFINIEREN VON AUSWERTEFENSTEM (GATING) . 25 3.6 STATISTIK . 26 3.7 FLUORESZENZKOMPENSATION . 29 3.8 ANALYSE VON DNA-MESSUNGEN . 30 3.9 ANALYSE VON IMMUNFLUORESZENZMESSUNGEN . 33 4 HINWEISE ZUR GERAETEEINSTELLUNG . 34 4.1 DNA-MESSUNGEN . 35 4.2 IMMUNFLUORESZENZMESSUNGEN . 35 4.3 RETIKULOZYTEN . 36 5 QUALITAETSSICHERUNG .38 5.1 INTERNE QUALITAETSKONTROLLE . 39 5.2 EXTERNE QUALITAETSKONTROLLE . 47 6 LITERATUR . 48 IMMUNOLOGIE 51 IMMUNFLUORESZENZ: FAERBUNG - MESSUNG - DATENAUSWERTUNG 53 1 EINLEITUNG . 53 2 PROBENVORBEREITUNG UND FAERBUNG . 54 2.1 DAS ZELLMATERIAL . 54 2.2 FAERBEPRINZIPIEN . 54 2.3 FAERBEPARAMETER . 55 3 MESSUNG . 57 4 DATENAUSWERTUNG .58 XXII INHALTSVERZEICHNIS 4.1 "GATING" . 58 4.2 DARSTELLUNG . 59 4.3 AUSWERTUNG . 60 5 AUSBLICK . 61 MONOKLONALE ANTIKOERPER IN DER DIAGNOSTIK VON ZELLOBERFLAECHENANTIGENEN 63 1 EINLEITUNG . 63 2 DIAGNOSTIK VON IMMUNDEFEKTEN . 64 2.1 SCHWERE KOMBINIERTE IMMUNDEFEKTE (SCID) . 65 2.2 ERWORBENE IMMUNDEFIZIENZ DURCH HIV (AIDS) . 66 2.3 VARIABLE IMMUNDEFEKTE BEI ERWACHSENEN . 67 2.4 SEKUNDAERE IMMUNDEFEKTE . 67 3 TABELLE . 68 6 LITERATUR . 74 IMMUNPHAENOTYPISIERUNG AKUTER LEUKAEMIEN UND LEUKAEMISCH VERLAUFENDER NIEDRIG-MALIGNER NON-HODGKIN-LYMPHOME (METHODEN, RELEVANTE ANTIGENE, INTERPRETATION) 77 1 EINLEITUNG . 77 1.1 INDIKATIONEN . 78 1.2 TESTMATERIAL FUER IMMUNOLOGISCHE MARKERUNTERSUCHUNGEN AN ZELLSUSPENSIONEN . 78 2 MATERIAL . 80 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 80 2.2 MONOKLONALE ANTIKOERPER BZW. HETEROLOGE ANTISEREN . 80 2.3 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 82 2.4 EINWEGARTIKEL .83 2.5 GERAETE . 83 3 METHODE . 83 3.1 VERSUCHSANSATZ . 83 3.2 MESSUNG . 85 4 PROBLEMSTELLEN (LOESUNGSVORSCHLAEGE) . 86 4.1 PROBENVORBEREITUNG, FAERBUNG . 86 4.2 MESSUNG . 86 4.3 DATENAUSWERTUNG . 87 5 AUSWERTUNG . 87 5.1 ANALYSE . 87 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 91 5.3 BEWERTUNG . 93 6 LITERATUR . 101 INHALTSVERZEICHNIS XXIII MULTIPARAMETRISCHE CHARAKTERISIERUNG VON LEUKAEMIE UND LYMPHOMZELLEN 105 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 105 1.1 PROBENMATERIAL . 105 2 MATERIAL . 105 2.1 REAGENZIEN . 105 2.2 SELBSTHERGESTELLTE LOESUNGEN . 106 2.3 EINWEGARTIKEL . 107 2.4 GERAETE . 107 3 METHODE . 107 3.1 AUFARBEITUNG DER PROBEN . 107 3.2 FAERBEPROTOKOLL . 108 3.3 GERAETEEINSTELLUNG . 108 4 MESSUNG UND AUSWERTUNG . 110 4.1 MESSUNG . HO 4.2 AUSWERTUNG . 110 5 ERGEBNISSE . HO 5.1 DIAGNOSTIK . 110 5.2 VERLAUFSKONTROLLEN . 112 6 KRITISCHE BEWERTUNG DER METHODE . 112 6.1 ERYTHROZYTENLYSE ODER GRADIENTENTRENNUNG . 112 6.2 EIN ODER MEHRPARAMETERANALYSE . 113 6.3 PROBLEMBEREICHE . 113 7 LITERATUR . 115 7.1 METHODE . 115 7.2 KLINIK . 115 KLINISCHE BEDEUTUNG DER IMMUNPHAENOTYPISIERUNG VON LYMPHOZYTEN IN DER DIAGNOSTIK VON IMMUNDEFEKTEN 116 1 EINLEITUNG . 116 2 DIAGNOSTISCHE STRATEGIE . 117 2.1 PRIMAERE IMMUNDEFEKTE . 117 2.1.1 GEHAEUFTE BAKTERIELLE INFEKTE . 117 2.1.2 GEHAEUFTE VIRUS UND PILZINFEKTIONEN . 118 2.1.3 SCHWERE KOMBINIERTE IMMUNDEFEKTE IM SAEUGLINGSALTER . 118 2.2 SEKUNDAERE IMMUNDEFEKTE . 118 3 HAEUFIGE KLINISCHE ANWENDUNGEN DER LYMPHOZYTENTYPISIERUNG IM RAHMEN EINER IMMUNDEFEKTDIAGNOSTIK . 119 3.1 ABKLAERUNG VON ANTIKOERPERMANGELSYNDROMEN . 119 3.2 UEBERWACHUNG DES ERWORBENEN IMMUNDEFEKTS IM RAHMEN EINER HIV-INFEKTION . 120 3.3 ABKLAERUNG EINER LYMPHOZYTOSE MIT IMMUNMANGELSYNDROM . 120 XXIV INHALTSVERZEICHNIS 3.4 NIEDRIGMALIGNE LYMPHATISCHE NEOPLASIEN MIT IMMUNMANGELSYNDROM ALS MOEGLICHEM LEITSYMPTOM . 121 4 LITERATUR . 126 IMMUNPHAENOTYPISIERUNG VON LYMPHOZYTEN IN DER DIAGNOSTIK VON IMMUNDEFEKTEN 127 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 127 1.1 PROBENMATERIAL . 127 1.2 GESICHERTE INDIKATIONEN IN DER KLINISCHEN DIAGNOSTIK VON IMMUNMANGELSYNDROMEN . 127 2 MATERIALIEN . 128 2.1 ALLGEMEINES . 128 2.2 ANTIKOERPERPANEL . 128 3 METHODE . 129 3.1 ZELLPRAEPARATION . 129 3.2 NEGATIV-UND POSITIVKONTROLLEN . 129 3.3 ANTIGENMARKIERUNGEN . 130 3.4 MESSUNG . 130 4 AUSWERTUNG . 131 4.1 AUSWERTUNG DER ANALYSE . 131 4.2 ZELLINIENZUORDNUNG UND ABSOLUTWERTBERECHNUNG . 131 4.3 FEHLERMOEGLICHKEITEN . 132 5 BEFUNDPRAESENTATION . 132 6 KLINISCHE BEDEUTUNG . 133 7 LITERATUR . 133 5-PART-DIFFERENTIAL IM VOLLBLUT 135 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 135 1.1 T ESTMATERIAL . 135 1.2 INDIKATIONEN . 135 1.3 TESTPRINZIP . 135 2 MATERIAL . 136 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 136 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 136 2.3 EINWEGARTIKEL . 136 2.4 GERAETE . 136 3 METHODE . 136 3.1 VERSUCHSANSATZ . 136 3.2 MESSUNG . 137 4 PROBLEMSTELLEN . 137 5 AUSWERTUNG . 138 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 138 5.3 BEWERTUNG . 139 INHALTSVERZEICHNIS XXV 6 LITERATUR . 139 7 ANHANG . 139 7.1 NORMALWERTBEREICH . 139 7.2 VALIDITAET DER OPERATOR-DEFMIERTEN ARBITRAEREN ANALYSEREGIONEN . 141 7.3 VERGLEICH VON STANDARD UND ALTEMATIVMETHODE . 141 IDENTIFIZIERUNG, CHARAKTERISIERUNG UND QUANTIFIZIERUNG ZIRKULIERENDER HAEMOPOETISCHER STAMM UND VORLAEUFERZELLEN (CD34-POSITIVE ZELLEN) 143 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 143 1.1 TESTMATERIAL . 143 1.2 INDIKATIONEN . 143 1.3 TESTPRINZIP . 143 2 MATERIAL . 144 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 144 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 144 2.3 EINWEGARTIKEL . 144 2.4 GERAETE . 144 3 METHODE . 145 3.1 KOMBINIERT INDIREKTER/DIREKTER TEST (PBMNC) . 145 3.2 "VOLLBLUT-LYSE-METHODE" . 145 3.3 MESSUNG . 146 4 PROBLEMSTELLEN . 146 4.1 GERINGE ZAHL VON CD34-POSTIVEN ZELLEN . 146 4.2 "FALSCHE CD34-ZELLEN" . 148 5 AUSWERTUNG . 148 5.1 ANALYSE . 148 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 148 5.3 BEWERTUNG . 151 6 LITERATUR . 152 IDENTIFIZIERUNG UND QUANTIFIZIERUNG "UNREIFER" ERYTHROZYTEN, D.H. RETIKULOZYTEN, IM VOLLBLUT 153 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 153 1.1 TESTMATERIAL . 153 1.2 INDIKATIONEN . 153 1.3 TESTPRINZIP . 153 2 MATERIAL . 154 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 154 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 154 2.3 EINWEGARTIKEL . 154 2.4 GERAETE . 154 3 METHODE . 155 XXVI INHALTSVERZEICHNIS 3.1 VERSUCHSANSATZ . 155 3.2 MESSUNG . 155 4 PROBLEMSTELLEN . 157 5 AUSWERTUNG . 157 5.1 ANALYSE . 157 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 162 5.3 BEWERTUNG . 162 6 LITERATUR . 162 MONITORING DER MONOZYTAEREN HLA-DR-ANTIGEN-EXPRESSION BEI TRANSPLANTATION UND SEPSIS 163 1 EINLEITUNG . 163 1.1 TESTMATERIAL . 165 1.2 BENOETIGTE ZEIT . 165 2 MATERIAL . 165 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 165 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 166 2.3 EINWEGARTIKEL . 166 2.4 GERAETE . 166 3 METHODE . 167 3.1 ANSAETZE . 167 3.2 MESSUNG . 168 4 PROBLEMSTELLEN . 169 4.1 KONTAMINATION DER PRAEPARATION MIT ERYTHROZYTAEREN ZELLEN . 169 4.2 VERAENDERUNG DER MEAN-PEAKS UND DER PROZENTWERTE DR+-ZELLEN DURCH DIE DOPPELMARKIERUNG MIT CD 14 . 169 4.3 GERAETEABHAENGIGKEIT DER DISKRIMINATIONSWERTE FUER DIE DIAGNOSE "IMMUNPARALYSE" . 170 4.4 STARKE SCHWANKUNGEN DER UNSPEZIFISCHEN ANTIKOERPERBINDUNG . 170 5 AUSWERTUNG . 171 5.1 ANALYSE . 171 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 171 5.3 BEWERTUNG . 171 6 LITERATUR . 172 7 ANLAGE - GATING UND MESSUNG . 173 7.1 GATING . 173 7.2 MESSUNG UND AUSWERTUNG . 175 STANDARDISIERUNG DER BLUTENTNAHMEBEDINGUNGEN BEI DER LEUKOZYTENPHAENOTYPISIERUNG UNTER BESONDERER BERUECKSICHTIGUNG AKUTER KOERPERLICHER ARBEIT 178 1 ZIEL DES PROTOKOLLS . 178 2 EINLEITUNG . 178 INHALTSVERZEICHNIS XXVII 3 METHODOLOGIE . 179 3.1 PROBENAUFBEREITUNG ZUR LEUKOZYTENPHAENOTYPISIERUNG . 179 3.2 ENDOGENE UND EXOGENE EINFLUSSFAKTOREN . 179 4 EMPFEHLUNGEN FUER DIE PRAXIS . 182 5 LITERATUR . 183 6 TABELLEN . 184 ANALYSE VON LYMPHOZYTEN-SUBPOPULATIONEN IM LIQUOR CEREBROSPINALIS 189 1 ZIEL DES TESTS . 189 2 INDIKATIONEN . 189 3 TESTPRINZIP . 189 4 KLINISCHE BEWERTUNG UND REFERENZBEREICHE . 191 5 LITERATUR . 195 ANALYSE VON ACHT LYMPHOZYTEN-SUBPOPULATIONEN IN NATIVEN ODER ANGEREICHERTEN LIQUORPROBEN IM VERGLEICH ZU VENOESEM BLUT MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 199 1 NAME DES TESTS . 199 1.2 INDIKATIONEN UND ZIEL DER TESTS . 199 1.3 TESTPRINZIP . 199 1.4 TESTMATERIAL . 199 2 MATERIAL . 200 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 200 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 200 2.3 EINWEGARTIKEL . 201 2.4 GERAETE . 201 3 METHODE . 202 3.1 ANALYSE VON LEUKOZYTEN IN LIQUORPROBEN . 202 3.2 MESSUNG . 203 4 PROBLEMSTELLEN . 204 5 AUSWERTUNG . 205 5.1 ANALYSE . 205 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG DER UNTERSUCHUNGEN . 207 5.3 BEWERTUNG . 207 6 LITERATUR . 207 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ANALYTIK DES ANGEREICHERTEN LIQUOR CEREBROSPINALIS BEI LAENGEREN PROBENTRANSPORTZEITEN UND UNTER VERWENDUNG NICHT STANDARDISIERTER ANTIKOERPER 209 1 NAME DES TESTS . 209 1.2 INDIKATIONEN UND ZIEL DES TESTS (ANALOG METHODE 2) . 209 1.3 TESTPRINZIP . 209 XXVIII INHALTSVERZEICHNIS 1.4 TESTMATERIAL . 209 2 MATERIAL . 210 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 210 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 210 2.3 EINWEGARTIKEL . 210 2.4 GERAETE . 211 3 METHODE . 211 3.1 ANSAETZE . 211 3.2 MESSUNG . 214 4 AUSWERTUNG . 214 5 BEWERTUNG . 215 6 LITERATUR . 215 DIFFERENZIERUNG VON LEUKOZYTENUNTERGRUPPEN MITTELS DER DIREKTEN ZWEIFARBENFLUORESZENZ IM LYSIERTEN VOLLBLUT 217 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 217 1.1 INDIKATIONEN UND ZIEL DES TESTS . 217 1.2 TESTPRINZIP . 217 1.3 TESTMATERIAL . 218 2 MATERIAL . 218 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 218 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 219 2.3 EINWEGARTIKEL . 220 2.4 GERAETE . 220 3 METHODE . 221 3.1 VERSUCHSANSATZ . 221 3.2 PROBENVORBEREITUNG . 221 3.3 MESSUNG . 221 4 PROBLEMSTELLEN . 222 5 AUSWERTUNG . 223 5.1 AUSWERTEPRINZIP . 223 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 227 5.3 BEWERTUNG . 227 6 LITERATUR . 227 ANALYSE VON FETALTYP-LYMPHOZYTEN IN ANGEREICHERTEM LIQUOR CEREBROSPINALIS IM VERGLEICH ZUM VENOESEN BLUT 229 1 NAME DES TESTS . 229 1.2 INDIKATIONEN UND ZIEL DES TESTS . 229 1.3 TESTPRINZIP . 229 1.4 TESTMATERIAL . 229 2 MATERIAL . 230 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 230 INHALTSVERZEICHNIS XXIX 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 230 2.3 EINWEGARTIKEL . 231 2.4 GERAETE . 231 3 METHODEN . 232 3.1 PROBENVORBEREITUNG . 232 3.2 MESSUNG . 233 4 PROBLEMSTELLEN . 234 5 AUSWERTUNG . 235 5.1 ANALYSE . 235 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 237 5.3 BEWERTUNG UND REFERENZBEREICHE . 237 6 LITERATUR . 237 BRONCHOALVEOLAERE LAVAGE UND DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE LYMPHOZYTENDIFFERENZIERUNG 239 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 239 1.1 T ESTMATERIAL . 239 1.2 INDIKATIONEN . 239 1.3 UNTERSUCHUNGSABLAUF . 240 2 MATERIAL . 241 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 241 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 242 2.3 EINWEGARTIKEL . 242 2.4 GERAETE . 242 3 METHODE DER LYMPHOZYTENDIFFERENZIERUNG . 242 3.1 VERSUCHSANSATZ . 242 3.2 DAUER DER UNTERSUCHUNGEN . 243 3.3 MESSUNG . 243 4 PROBLEME . 244 5. AUSWERTUNG . 245 5.1 ANALYSE . 245 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 246 5.3 BEWERTUNG . 248 6 ZUSAMMENFASSUNG . 248 7 LITERATUR . 248 LYMPHOZYTENSUBTYPISIERUNG ANHAND MORPHOLOGISCHER MERKMALE MIT EINEM BILDANALYSESYSTEM 251 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 251 2 TESTMATERIAL . 251 3 AUSWERTUNG . 251 4 ERGEBNIS . 252 5 INTERPRETATION . 254 XXX INHALTSVERZEICHNIS 6 LITERATUR . 255 ONKOLOGIE 257 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE DNA-ANALYSE 259 LITERATUR . 267 DNA-ANALYSE VON TUMORGEWEBE MIT DER VINDELOV-METHODE 269 1 NAME UND ZIEL DES TESTES . 269 1.1 MATERIAL . 269 1.2 INDIKATIONEN . 269 1.3 TESTPRINZIP . 269 2 MATERIAL . 270 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 270 2.3 EINWEGARTIKEL . 271 2.4 GERAETE . 271 3 METHODE . 271 3.1 MESSUNG . 273 4 PROBLEMSTELLEN . 273 5 AUSWERTUNG . 274 5.1 MESSANALYSE . 275 5.2 ERGEBNISAUSDRUCK . 275 5.3 BEWERTUNG . 276 6 LITERATUR . 278 DAPI-FAERBUNG SOLIDER TUMOREN FUER DIE HOCHAUFLOESENDE DNA-MESSUNG 279 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 279 1.1 TESTMATERIAL . 279 1.2 INDIKATIONEN . 279 1.3 TESTPRINZIP . 279 2 MATERIALIEN . 280 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 280 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 280 2.3 EINWEGARTIKEL . 280 2.4 GERAETE . 281 3 METHODE . 281 3.1 VERSUCHSANSATZ . 281 3.2 MESSUNG . 281 4 PROBLEMSTELLEN . 282 5 AUSWERTUNG . 283 INHALTSVERZEICHNIS XXXI 5.1 ANALYSE . 283 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG UND BEWERTUNG . 283 6 LITERATUR . 285 BESTIMMUNG VON PLOIDIE UND PROLIFERATIONSAKTIVITAET AN SOLIDEN EPITHELIALEN TUMOREN 286 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 286 1.1 TESTMATERIAL . 286 2 MATERIAL . 286 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 286 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 287 2.3 EINWEGARTIKEL . 287 2.4 GERAETE . 287 3 METHODE . 288 3.1 VERSUCHSANSATZ . 288 3.2 MESSUNG . 289 4 PROBLEMSTELLEN . 290 5 AUSWERTUNG . 290 5.1 ANALYSE . 290 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 291 5.3 BEWERTUNG . 291 6 LITERATUR . 292 DNA/ZYTOKERATIN-DOPPELMARKIERUNG VON BLASENSPUELFLUESSIGKEITEN 293 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 293 1.1 MATERIAL . 293 1.2 INDIKATIONEN . 293 1.3 TESTPRINZIP . 294 2 MATERIAL . 294 2.1 REAGENZIEN . 294 2.3 EINWEGARTIKEL . 295 2.4 GERAETE . 295 3 METHODE . 296 3.1 VERSUCHSANSATZ . 296 3.2 MESSUNG . 297 4 PROBLEMSTELLEN . 298 5 AUSWERTUNG . 298 5.1 MESSANALYSE . 299 5.2 ERGEBNISAUSDRUCK . 300 5.3 BEWERTUNG . 302 6 LITERATUR . 305 XXXII INHALTSVERZEICHNIS GLEICHZEITIGE IMMUNPHAENOTYPISIERUNG UND ZELLZYKLUSPHASENANALYSE VON HAEMATOPOETISCHEN ZELLEN 307 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 307 1.1 TESTMATERIAL . 308 1.2 INDIKATIONEN . 308 1.3 ZEITDAUER DES TESTS . 308 2 MATERIAL . 308 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 308 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 309 2.3 EINWEGARTIKEL . 309 2.4 GERAETE . 309 3 METHODE . 310 3.1 VERSUCHSANSATZ . 310 3.2 MESSUNG . 310 4 PROBLEMSTELLEN . 311 4.1 PITFALLS . 311 4.2 TROUBLESHOOTINGS . 311 5 AUSWERTUNG . 311 5.1 ANALYSE . 311 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG FUER DEN OPERATOR . 312 5.3 BEWERTUNG . 312 6 LITERATUR . 313 TUMORPROLIFERATION, BRDU 315 1 NAME DES TESTS . 315 1.1 PROBENMATERIAL . 315 1.2 INDIKATION . 315 1.3 TESTPRINZIP . 316 2 MATERIAL . 316 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 316 2.2 ANGESETZTE REAGENZIEN . 317 2.3 EINWEGARTIKEL . 318 2.4 GERAETE . 318 3 METHODE . 319 3.1 ZELLGEWINNUNG, FIXIERUNG UND FAERBUNG . 319 3.2 MESSUNG . 320 4 PROBLEMSTELLEN . 321 5 AUSWERTUNG . 321 5.1 ANALYSE . 321 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 322 5.3 BEWERTUNG . 323 6 LITERATUR . 324 INHALTSVERZEICHNIS XXXIII FUNKTIONELLE ZELLCHARAKTERISIERUNG 325 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE METHODEN ZUR FUNKTIONELLEN CHARAKTERISIERUNG VON ZELLEN 327 1 EINLEITUNG . 327 2 PROBENAUFARBEITUNG UND MESSUNG . 328 3 DATENAUSWERTUNG . 329 4 INTERPRETATION FUNKTIONELLER ZELLMESSUNGEN . 329 MESSUNG DER PHAGOSOMALEN WASSERSTOFFPEROXIDPRODUKTION VON GRANULOZYTEN UND MONOZYTEN MIT DIHYDRORHODAMIN 123 331 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 331 1.1 ANWENDUNGSBEREICHE . 331 1.2 TESTMATERIAL . 332 1.3 TESTPRINZIP . 332 2 MATERIAL . 333 2.1 KAEUFLICHE REAGENZIEN . 333 2.2 SYNTHESEN / KULTUREN . 335 2.3 EINWEGARTIKEL . 335 2.4 GERAETE . 335 3 METHODE . 336 3. 1 VERSUCHSANSATZ . 336 3.2 MESSUNG . 341 4 PROBLEME . 344 5 AUSWERTUNG . 345 5.1 ANALYSE . 345 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 347 5.3 BEWERTUNG . 347 6 LITERATUR . 348 6.1 UEBERSICHTSARTIKEL . 348 6.2 ORIGINALARBEITEN . 349 MESSUNG DES INTRAZELLULAEREN PH-WERTS VON GRANULOZYTEN UND MONOZYTEN MIT SNARF-1 351 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 351 1.1 ANWENDUNG: ERWORBENE GRANULOZYTENFUNKTIONSSTOERUNGEN . 351 1.2 TESTMATERIAL . 352 1.3 TESTPRINZIP . 352 2 MATERIAL . 352 2.1 KAEUFLICHE REAGENZIEN . 352 2.2 SYNTHESEN / KULTUREN . 354 2.3 EINWEGARTIKEL . 354 XXXIV INHALTSVERZEICHNIS 2.4 GERAETE . 355 3 METHODE . 355 3.1 VERSUCHSANSATZ . 355 3.2 MESSUNG . 360 4 PROBLEME . 362 5 AUSWERTUNG . 362 5.1 ANALYSE . 362 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 364 5.3 BEWERTUNG . 364 6 LITERATUR . 365 6.1 UEBERSICHTSARTIKEL . 365 6.2 ORIGINALARBEITEN . 366 MESSUNG INTRAZELLULAERER SERIN UND CYSTEINPROTEINASEN VON GRANULOZYTEN UND MONOZYTEN MIT RHODAMIN-110-DERIVATEN 367 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 367 1.1 ANWENDUNGSBEREICHE . 367 1.2 TESTMATERIAL . 368 1.3 TESTPRINZIP . 368 2 MATERIAL . 369 2.1 KAEUFLICHE REAGENZIEN . 369 2.2 SYNTHESEN / KULTUREN . 370 2.3 EINWEGARTIKEL . 370 2.4 GERAETE . 370 3 METHODE . 371 3.1 VERSUCHSANSATZ . 371 3.2 MESSUNG . 372 4 PROBLEME . 374 5 AUSWERTUNG . 374 5.1 ANALYSE . 374 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 376 5.3 BEWERTUNG . 376 6 LITERATUR . 377 6.1 UEBERSICHTSARTIKEL . 377 6.2 ORIGINALARBEITEN . 377 DETEKTION INTRAZELLULAERER ZYTOKINE: FUNKTIONELLE CHARAKTERISIERUNG VON IMMUNKOMPETENTEN ZELLEN BEI IMMUNDEFEKTEN UND MONITORING EINER IMMUNSUPPRESSIVEN THERAPIE 379 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 379 1.1 TESTMATERIAL . 379 1.2 INDIKATION . 379 INHALTSVERZEICHNIS XXXV 1.3 TESTPRINZIP . 380 2 MATERIAL . 380 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 380 2.2 KULTURZUBEHOER UND PUFFER . 381 2.3 CHEMIKALIEN UND STIMULI . 381 2.4 DURCHFLUSSZYTOMETER . 381 3 METHODE . 382 3.1 ZELLISOLIERUNG . 382 3.2 ZELLKULTUR . 382 3.3 FAERBUNG . 382 3.4 ERSTELLEN VON PROBEN ZUR PMT UND KOMPENSATIONSEINSTELLUNG . 383 3.5 MESSUNG . 384 4 PROBLEMSTELLEN . 385 4.1 FIXIERUNG . 385 4.2 KONZENTRATION DER ANTIKOERPER . 385 4.3 LINEARE VERSUS LOGARITHMISCHE VERSTAERKUNG . 385 4.4 KREUZREAKTIONEN . 385 5 AUSWERTUNG . 386 6 LITERATUR . 391 BESTIMMUNG DER PHAGOZYTOSEAKTIVITAET VON MONOZYTEN UND GRANULOZYTEN IM VOLLBLUT 393 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 393 1.1 TESTMATERIAL . 393 1.2 TESTPRINZIP . 393 1.3 TESTDAUER . 394 2 MATERIAL . 394 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 394 2.2 NICHT IM TESTKIT ENTHALTENE MATERIALIEN . 394 2.3 NOTWENDIGE GERAETE . 395 3 METHODE . 396 3.1 VERSUCHS VORBEREITUNGEN . 396 3.2 VERSUCHSANSATZ . 397 4 PROBLEMSTELLEN . 398 5 AUSWERTUNG UND BEWERTUNG DER ERGEBNISSE . 399 5.1 ANALYSE . 399 5.2 GRAPHISCHE ERGEBNISDARSTELLUNG . 401 5.3 BEWERTUNG . 403 6 LITERATUR . 404 XXXVI INHALTSVERZEICHNIS PROTOKOLL ZUR MESSUNG DER CALCIUMMOBILISATION IN NEUTROPHILEN GRANULOZYTEN MITTELS FLUO-3 UND DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 405 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 405 1.1 ZIEL DER METHODE . 405 1.2 TESTDAUER . 405 1.3 TESTMATERIAL . 406 2 MATERIAL . 406 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 406 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 406 2.3 EINWEGARTIKEL . 407 2.4 GERAETE . 407 3 METHODE . 407 3.1 VERSUCHSANSATZ . 407 3.2 MESSUNG DER CALCIUMKONZENTRATION (CA2+) IM ZYTOMETER . 408 4 PROBLEMSTELLEN . 409 5 AUSWERTUNG . 410 5.1 ANALYSE . 410 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 410 5.3 BEWERTUNG . 410 6 LITERATUR . 413 PROTOKOLL ZUR BESTIMMUNG DES F-ACTINS, GESAMTACTINS UND TUBULINS IN NEUTROPHILEN GRANULOZYTEN 415 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 415 1.2 ZIEL DER TESTMETHODE . 415 1.3 DAUER DER TESTDURCHFUHRUNG . 415 1.4 TESTMATERIAL . 415 2 MATERIAL . 416 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 416 2.2, 2.3 UND 2.4 . 416 3 METHODEN . 417 3.1 F-ACTINNACHWEIS . 417 3.2 GESAMTACTINNACHWEIS . 417 3.3 NACHWEIS VON TUBULIN . 417 3.4 MESSUNG . 418 4 PROBLEMSTELLEN . 418 5 AUSWERTUNG . 418 5.1 ANALYSE . 418 5.2 BEWERTUNG . 419 6 LITERATUR . 420 INHALTSVERZEICHNIS XXXVII BESTIMMUNG DES LDL-REZEPTORS AN MONOZYTEN ZUR DIAGNOSESICHERUNG DER FAMILIAEREN HYPERCHOLESTERINAEMIE (FH) 421 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 421 1.1 T ESTMATERIAL . 421 1.2 TESTPRINZIP . 421 2 METHODOLOGIE . 422 2.1 REAGENZIEN . 422 2.2 EINWEGMATERIALIEN . 423 2.3 GERAETE . 423 3 METHODE . 424 3.1 VERSUCHSANSATZ . 424 3.2 MESSUNG . 425 4 PROBLEMSTELLEN (PITFALLS) . 425 5 AUSWERTUNG UND BEWERTUNG DER ERGEBNISSE . 425 5.1 ANALYSE . 425 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 425 5.3 BEWERTUNG . 426 6 LITERATUR . 427 MARKERANALYSE UND FUNKTIONSTESTS AN THROMBOZYTEN 429 1 RATIONALE FUER DEN EINSATZ DURCHFLUSSZYTOMETRISCHER METHODEN IN DER THROMBOZYTENDIAGNOSTIK . 429 2 BESONDERHEITEN DER DURCHFLUSSZYTOMETRISCHEN THROMBOZYTENANALYSE . 429 3 BLUTABNAHME UND MATERIALGEWINNUNG . 430 DIH-ASSAY / BESTIMMUNG VON AKTIVIERUNGSMARKERN AUF THROMBOZYTEN IM DURCHFLUSSZYTOMETER 433 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 433 1.1 TESTMATERIAL . 433 2 MATERIAL . 433 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 433 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 435 2.3 EINWEGARTIKEL . 436 2.4 GERAETE . 436 3 METHODE . 436 3.1 VERSUCHSANSATZ . 436 3.2 MESSUNG . 437 4 PROBLEMSTELLEN . 438 5 AUSWERTUNG . 439 5.1 ANALYSE . 439 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG UND BEWERTUNG . 439 6 LITERATUR . 442 XXXVIII INHALTSVERZEICHNIS DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE BESTIMMUNG JUNGER THROMBOZYTEN 443 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 443 1.1 T ESTMATERIAL . 443 1.2 INDIKATIONEN . 443 1.3 TESTABLAUF . 443 1.4 GESAMTDAUER UND "HANDS-ON-TIME" . 444 2 MATERIAL . 444 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 444 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 445 2.3 EINWEGARTIKEL . 445 2.4 GERAETE . 445 3 METHODE . 445 3.1 VERSUCHSANSATZ . 445 3.2 MESSUNG . 446 4 PROBLEMSTELLEN . 446 5 AUSWERTUNG . 447 5.1 ANALYSE . 447 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 449 5.3 BEWERTUNG . 449 6 LITERATUR . 450 ZELLZYKLUSTEST: DIAGNOSTIK VON ENDOGEN ODER EXOGEN BEDINGTEN PROLIFERATIONSSTOERUNGEN MENSCHLICHER BLUTLYMPHOZYTEN 451 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 451 1.1 TESTMATERIAL . 451 1.2 INDIKATION . 451 1.3 TESTPRINZIP . 452 2 MATERIAL . 452 2.1 MATERIAL FUER DIE ZELLKULTUR . 452 2.2 MATERIAL FUER DIE DURCHFLUSSZYTOMETRIE UND AUSWERTUNG . 454 3 METHODE . 455 3.1 PROBENMATERIAL . 455 3.2 PROBENBEARBEITUNG, ISOLATION DER MONONUKLEAEREN ZELLEN . 455 3.3 KULTIVIERUNG DER ISOLIERTEN ZELLEN . 456 3.4 ERNTE DER ZELLEN . 457 3.5 MESSUNG DER ZELLPROBEN . 458 4 PROBLEMSTELLEN . 459 4.1 PROBENMATERIAL . 459 4.2 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE MESSUNG DER ZELLPROBEN . 460 5 AUSWERTUNG . 460 5.1 ANALYSE DER DATENFILES . 460 5.2 FANCONI-ANAEMIE . 462 INHALTSVERZEICHNIS XXXIX 5.3 ATAXIA TELEANGIECTASIA . 465 6 LITERATUR . 467 6.1 METHODE UND GRUNDLAGEN . 467 6.2 FANCONI ANAEMIE . 468 6.3 ATAXIA TELEANGIECTASIA . 468 METHODEN UM WIRKUNGEN VON ZYTOKINEN AUF HAEMATOLOGISCHE NEOPLASIEN MIT DER DURCHFLUSSZYTOMETRISCHEN ZELLZYKLUSANALYSE NACHZUWEISEN 469 1 EINLEITUNG . 469 1.1 NAME DES TESTS . 469 1.2 TESTPRINZIP . 470 1.3 PROBENMATERIAL . 470 2 MATERIAL . 470 2.1 REAGENZIEN . 470 2.2 VERBRAUCHSMATERIALIEN . 471 2.3 GERAETE . 471 3 METHODE . 471 3.1 MONOZYTENLYSE MIT I-LEUCIN-METHYL-ESTER (LME) . 471 3.2 T-ZELL-DEPLETION MIT DEM MACS (MAGNETIC CELL SEPARATOR) . 472 3.3 BRDU-METHODE MIT SAEUREDENATURIERUNG . 473 4 FEHLERSUCHE . 475 4.1 MACS-DEPLETION . 475 4.2 BRDU-METHODE . 475 5 AUSWERTUNG . 476 5.1 ANALYSE . 476 5.2 ANWENDUNGEN . 480 6 LITERATUR . 481 DURCHFLUSSZYTOFLUOROMETRISCHE ANALYSE DES REZEPTORS FUER DEN PLASMINOGENAKTIVATOR UROKINASE (UPA) AUF NORMALEN ZELLEN UND TUMORZELLEN MITTELS FLUORESZENTER UPA-LIGANDEN ODER MONOKLONALER ANTIKOERPER 483 1 PROBLEMSTELLUNG . 483 2 METHODEN . 488 2.1 ZELLKULTUR . 488 2.2 PRAEPARATION VON FLUORESZENTEM FITC-PRO-UPA ODER FITC-HMW-UPA . 489 2.3 PRAEPARATION DES AMINOTERMINALEN FRAGMENTS VON PRO-UPA DURCH ENZYMATISCHE BEHANDLUNG MIT DER BAKTERIELLEN ENDOPROTEINASE ASP-N . 489 2.4 PRAEPARATION DES SYNTHETISCHEN PEPTIDS UPAL 7-34 . 490 2.5 NACHWEIS DES UPA-REZEPTORS AUF U937-ZELLEN . 490 XL INHALTSVERZEICHNIS 2.6 KOMPETITIVE VERDRAENGUNG VON FITC-PRO-UPA (FITC-HMW UPA) DURCH MONOKLONALE ANTIKOERPER ODER DURCH KOMPETITIVE ANALOGA DES UPA ODER UPA-REZEPTORS . 491 3 PRAKTISCHE BEISPIELE UND BEWERTUNG . 492 5 LITERATURVERZEICHNIS . 495 DATENANALYSE 499 SELBSTLERNENDE KLASSIFIZIERUNG DURCHFLUSSZYTOMETRISCHER LISTENDATEN MIT DEM CLASSIFL-PROGRAMMSYSTEM 501 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 501 1.1 ANWENDUNGSBEREICHE . 501 1.2 AUSWERTEPRINZIP . 501 2 MATERIAL . 505 3 DATENAUSWERTUNG . 505 3.1 THROMBOZYTEN . 506 3.2 LYMPHOZYTEN . 512 4 LITERATUR . 514 QUALITAETSKONTROLLE 517 QUALITAETSKONTROLLE UND -SICHERUNG IN DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE: DERZEITIGER STAND UND ALLGEMEINE GRUNDLAGEN 519 1 EINFUEHRUNG . 519 2 EXISTIERENDE QUALITAETSSICHERUNGSSYSTEME . 519 2.1 GROSSBRITANNIEN . 519 2.2 ITALIEN . 521 2.3 NIEDERLANDE . 523 2.4 BELGIEN . 523 2.5 VEREINIGTE STAATEN . 524 2.6 DEUTSCHLAND . 525 3 SYNOPSIS DER GEGENWAERTIGEN QUALITAETSKONTROLLSYSTEME . 527 3.1 ALLGEMEINE RICHTLINIEN FUER DIE QUALITAETSGESICHERTE IMMUNPHAENOTYPISIERUNG VON PERIPHEREN BLUTLYMPHOZYTEN . 528 3.2 ZUSAMMENFASSUNG . 530 4 LITERATUR . 530 INHALTSVERZEICHNIS XLI HERSTELLUNG EINES SEMISTABILEN KONTROLLMATERIALS FUER DIE QUALITAETSKONTROLLE IN DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 533 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 533 1.1 TESTMATERIAL (AUSGANGSMATERIAL) . 533 2 MATERIAL . 534 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 534 2.2 SELBST HERGESTELLTE REAGENZIEN . 534 2.3 EINWEGARTIKEL . 534 2.4 GERAETE . 534 3 METHODE . 535 3.1 ANSAETZE . 535 3.2 MESSUNG . 536 4 PROBLEMSTELLEN . 536 5 AUSWERTUNG . 537 5.1 ANALYSE . 537 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 537 5.3 BEWERTUNG . 537 REFERENZMETHODE ZUR LYMPHOZYTENTYPISIERUNG MIT MONOKLONALEN ANTIKOERPERN IN UNLYSIERTEM VOLLBLUT 539 1 NAME UND ZIEL DES TESTS . 539 1.1 TESTMATERIAL . 539 1.2 INDIKATIONEN . 539 1.3 TESTABLAUF . 539 1.4 GESAMTDAUER UND "HANDS-ON-TUENE" . 540 2 MATERIAL . 540 2.1 GEKAUFTE REAGENZIEN . 540 2.3 EINWEGARTIKEL . 541 2.4 GERAETE . 541 3 METHODE . 541 3.1 VERSUCHSANSATZ . 541 3.2 MESSUNG . 542 4 PROBLEMSTELLEN . 544 5 AUSWERTUNG . 546 5.1 ANALYSE . 546 5.2 ERGEBNISDARSTELLUNG . 546 5.3 BEWERTUNG . 553 6 LITERATUR . 554 STICHWORTVERZEICHNIS 556
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