Biosynthese der menschlichen sauren Sphingomyelinase: Prozessierung und Transport der sauren Sphingomyelinase in normalen und pathologischen Hautfibroblasten; Trizyklische Antidepressiva stimulieren den proteolytischen Abbau der sauren Sphingomyelinase
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS:
GEUE
1
. EINLEITUNG J
2
. ERGEBNISSE ^
-
BEIFUEGUNG DER SAUREN SPHINGOMVELINASE ANS TJRIN
5
2^2-GEWINNUNG EINE AN
TI-SPHINEOMVELINASE ANTISERUMS
5
2
.
2.1
ISOLIERUNG REKOMBINANTER SPHINGOMYELINASE AUS. E.COLI
6
2
.
2.2
IMMUNISIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG DES ANTISERUMS
7
2.2.3 IMMUNPRAEZIPITATION [
35
S]-METHIONIN MARKIERTERSPHINGOMYELINASE IN
8
TRANSFERIERTEN COS-L-ZELLEN
2J-BIOSYNTHESE DER SAUREN SP
HINGOMVELINASE IN KULTIVIERTEN HAUTFIHROHLASFPN
10
2.3.1 VORBEMERKUNGEN JQ
2.3.2 PROZESSIERUNG UND GLYKOSYLIERUNG IN NORMALEN FIBROBLASTEN
10
2.3.3 PROZESSIERUNG UND GLYKOSYLIERUNG IN MUCOLIPIDOSE II-FIBROBLASTEN
14
2.3.4 EINFLUSS VON NH
4
C1 AUF REIFUNG UND SEKRETION DER SAUREN SPHINGOMYELINASE 15
2.3.5 PHOSPHORYLIERUNG DER SAUREN SPHINGOMYELINASE 16
2.3.6 ENDOCYTOSE EXTRAZELLULAERER SPHINGOMYELINASE DURCH FIBROBLASTEN 16
2.3.7 ZUSAMMENFASSUNG DER PROZESSIERUNGSSTUDIEN
1
G
2.4 EINFLUSS TRIZYKLISCHER ANT
IDEPRESSIVA AUF DIE SAURE SNHINGOMVELINASE
19
2.4.1 VORBEMERKUNGEN
19
2.42 ENZYMATISCHE STUDIEN
19
2.4.3 BIOSYNTHESE DER SPHINGOMYELINASE IN ABHAENGIGKEIT VON DESIPRAMIN
UND LEUPEPTIN
21
3. DISKUSSION
23
3.1
PRODUKTION EINES ANTISERUMS
23
3.2 BIOSYNTHESE
24
3.3 EINFLUSS TRIZYKLISCHER ANTIDEPRESSIVA AUF DIE SAURE SPHINGOMYELINASE
29
4. ZUSAMMENFASSUNG
22
5. MATERIAL UND METHODEN
33
5.1 GERAETE
5.2 CHEMIKALIEN
33
33
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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5,3 METHODEN
35
5.3.1 ENZYMREINIGUNG
35
5.3.2 ISOLIERUNG REKOMBINANTER SPHINGOMYELINASE
35
5.3.3 IMMUNISIERUNG EINES KANINCHENS
35
5.3.4 ELISA
36
5.3.5 IMMUNTITRATION
37
5.3.6 ZELLKULTUR
37
5.3.7 BIOSYNTHESESTUDIEN
3
G
5.3.8 ENDOCYTOSE ~
39
5.3.9 SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE UND FLUOROGRAPHIE 39
5.3.10 DEGLYKOSYLIERUNG
39
5.3
.11
ENZYMATISCHE BESTIMMUNG DER AKTIVITAET DER SAUREN SPHINGOMYELINASE 40
5.3
.12
ENZYMATISCHE BESTIMMUNG DER PHOSPHOLIPASE C-AKTIVITAET
GEGENUEBER PHOSPHATIDYLCHOLIN 40
5.3.13 PROTEINBESTIMMUNG
40
6
. LITERATURVERZEICHNIS
41
LEBENSLAUF
45 |
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