Organellkompartimentierung und Cytoskelettarchitektur der Riesenganglienzelle des Zitterwelses Malapterurus electricus:
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1993
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I
INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
.
IV
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
STRUKTUR
UND
FUNKTION
DES
NEURONS
.
1
1.2.
ULTRASTRUKTURELLE
ORGANISATION
DES
NEURONS
.
3
1.2.1.
SOMA
UND
DENDRITEN
.
3
1.2.2.
DER
AXON
.
4
1.3.
KOMPARTIMENTIERUNG
DES
NEURONALEN
CYTOSKELETTS
.
5
1.3.1
AKTIN
UND
AKTINBINDENDE
PROTEINE
.
5
1.3.2.
NEUROFILAMENTE
.
6
1.3.3.
MIKROTUBULI
.
8
1.4.
TRANSPORT
UND
LOKALISATION
DER
ORGANELLEN
.
11
1.5.
PROBLEMSTELLUNG
.
12
1.6.
DIE
RIESENGANGLIENZELLE
DES
ZITTERWELSES
.
12
2.
MATERIAL
UND
METHODE
.
15
2.1.
VERSUCHSTIERE
.
15
2.2.
PERFUSIONSFIXIERUNG
.
15
2.3.
LICHTMIKROSKOPISCHE
IMMUNCYTOCHEMIE
.
15
2.3.1.
IMMUNFLUORESZENZ
.
15
2.3.2.
PHALLOIDINMARKIERUNG
.
17
2.3.3.
DOPPELMARKIERUNG
MIT
A-BUNGAROTOXIN
.
17
2.3.4.
DEPHOSPHORYLIERUNG
DER
GEWEBESCHNITTE
MIT
ALKALISCHER
PHOSPHATASE
.
18
2.3.5.
LIGATUR
DES
ELEKTRISCHEN
NERVEN
.
18
2.3.6.
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
19
2.3.7.
IMMUNCYTOCHEMISCHE
PEROXIDASETECHNIK
.
20
2.4.
ORGANELLFAERBUNGEN
.
21
2.4.1.
DOPPELMARKIERUNG
MIT
WGA
.
21
2.4.2.
WGA-BINDUNGSSTUDIEN
.
21
2.4.3.
NISSLFAERBUNG
.
22
2.4.4.
RNA-FAERBUNG
MIT
ACRIDINORANGE
.
23
2.4.5.
HISTOCHEMISCHE
DARSTELLUNG
DER
SAUREN
PHOSPHATASE
MIT
NAPHTHOL-AS
BL-PHOSPHAT
.
23
2.4.6.
HISTOCHEMISCHE
DARSTELLUNG
DER
SAUREN
PHOSPHATASE
MIT
DER
BLEISALZMETHODE
.
24
2.4.7.
ALDEHYDFUCHSINFAERBUNG
.
25
2.4.8.
LIPOFUSZINFAERBUNG
MIT
SUDANSCHWARZ
B
.
25
2.4.9
PHOTOKONVERSION
.
.26
II
2.5.
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
26
2.5.1.
KONVENTIONELLE
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
26
2.5.1.1.
BESTIMMUNG
DER
MIKROTUBULIDICHTE
IM
AXON
.
27
2.5.1.2.
GROESSE
DER
DENSE
BODIES
.
28
2.5.2.
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
IMMUNCYTOCHEMIE
.
28
2.5.2.1.
IMMUNOGOLDMARKIERUNG
DES
SV2
PROTEINS
.
.
28
2.5.2.2.
IMMUNOGOLDMARKIERUNG
VON
TUBULIN
.
29
2.6.
IMMUNOBLOTS
.
29
2.6.1.
PROBENVORBEREITUNG
.
30
2.6.2.
GELELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
.
30
2.6.3.
FAERBUNG
DER
PROTEINBANDEN
.
32
2.6.4.
PROTEINTRANSFER
AUF
NITROZELLULOSE
.
32
2.6.5.
ANTIKOERPERBINDUNG
.
33
3.
ERGEBNISSE
.
34
3.1.
DIE
NISSL-SUBSTANZ
DER
RIESENGANGLIENZELLE
UND
ANDERER
NEURONEN
DES
RUECKENMARKS
.
34
3.1.1.
NISSL-FAERBUNG,
FLUOROCHROMIERUNG
UND
IMMUNFLUORESZENZ
.
34
3.1.2.
SEMIDUENNSCHNITTE
.
34
3.2.
ULTRASTRUKTURELLE
ANALYSE
DER
RIESENGANGLIENZELLE
.
37
3.2.1.
ULTRASTRUKTURELLE
ORGANISATION
DES
CYTOPLASMAS
DER
RIESENGANGLIENZELLE
.
37
3.2.2.
ULTRASTRUKTUR
VON
AXON
UND
DENDRITENQUERSCHNITTEN
.
41
3.2.3.
VERGLEICH
DER
MIKROTUBULIMORPHOMETRIE
DES
AXONS
MIT
ERGEBNISSEN
AUS
DER
LITERATUR
.
45
3.2.4.
DIE
INNERVATION
DER
RIESENGANGLIENZELLE
UND
DIE
SUBMEMBRANAEREN
VERDICHTUNGEN
(MEMBRANE
UNDERCOAT)
.
46
3.3.
DAS
LYSOSOMALE
KOMPARTIMENT
.
48
3.3.1.
AUTOFLUORESZENZ
.
48
3.3.2.
HISTOLOGISCHE
PIGMENTFAERBUNGEN
.
48
3.3.3.
HISTOCHEMISCHE
DARSTELLUNG
DER
SAUREN
PHOSPHATASE
.
50
3.3.4.
PHOTOKONVERSION
.
50
3.3.5.
METHYLENBLAUFAERBUNG
UND
ULTRASTRUKTURELLE
ANALYSE
.
53
3.3.6.
DENSE
BODIES
IN
RIESENGANGLIENZELLEN
OHNE
AKKUMULATION
AM
AXONHUEGEL
.55
3.3.7.
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
GRANULAGROESSEN
.
57
3.4.
VERTEILUNG
DES
SYNAPTISCHEN
VESIKELPROTEINS
SV2
.
57
3.5.
LOKALISATION
DES
GOLGI-APPARATS
.
59
3.6.
VERTEILUNG
VON
CYTOSKELETTPROTEINEN
.
60
3.6.1.
KONTROLLEN
FUER
DIE
IMMUNCYTOCHEMIE
.
60
3.6.2.
NEUROFILAMENT
.
60
3.6.2.1.
VERTEILUNG
DES
NEUROFILAMENTPROTEINS
.
60
3.6.2.2.
DEPHOSPHORYLIERUNG
DES
NEUROFILAMENTPROTEINS
.
63
3.6.3.
AKTIN
UND
AKTINBINDENDE
PROTEINE
.
63
III
3.6.3.1.
F-AKTIN
.
63
3.6.3.2.
AKTINBINDENDE
PROTEINE
.
65
3.6.4.
TUBULIN
.
65
3.6.4.1.
SS-TUBULIN
.
65
3.6.4.2.
A-TUBULIN
.
66
3.6.4.3.
TAU
PROTEIN
.
69
3.7.
IMMUNOBLOTS
.
72
4.
DISKUSSION
.
73
4.1.
KOMPARTIMENTIERUNG
DER
NISSL-SCHOLLEN
IM
PERIKARYON
.
73
4.2.
DER
AXONHUEGEL
UND
DAS
INITIALE
AXONSEGMENT
.
75
4.3.
DAS
LYSOSOMALE
KOMPARTIMENT
.
76
4.3.1.
SAURE
PHOSPHATASEAKTIVITAET
UND
LIPOFUSZINGRANULA
IN
DER
RIESENGANGLIENZELLE
.
76
4.3.2.
VARIABILITAET
UND
ALTERSABHAENGIGKEIT
DER
LIPOFUSZINGRANULA
.
77
4.3.3.
MOLEKULARE
GRUNDLAGEN
DER
AUTOFLUORESZENZ
.
79
4.3.4.
KOMPARTIMENTIERUNG
VON
LAMELLIERTEN
KOERPERN
UND
LIPOFUSZINGRANULA
IN
DER
RIESENGANGLIENZELLE
.
79
4.4.
DIE
KOMPARTIMENTIERUNG
DES
CYTOSKELETTS
.
82
4.4.1.
AKTIN
UND
AKTINBINDENDE
PROTEINE
.
82
4.4.2.
NEUROFILAMENT
.
82
4.4.3.
KOMPARTIMENTIERUNG
VON
MIKROTUBULI
UND
TAU
PROTEIN
AM
AXONHUEGEL
.
84
4.5.
ZUSAMMENHANG
ZWISCHEN
ORGANEILVERTEILUNG
UND
CYTOSKELETT
.
88
4.5.1.
INTERAKTION
VON
ORGANELLEN
UND
MIKROTUBULI
.
88
4.5.2.
SPIELT
AKTIN
EINE
ROLLE
BEI
DER
ORGANELLKOMPARTIMENTIERUNG?
.
90
4.5.3.
MODELLE
FUER
DIE
ORGANELLKOMPARTIMENTIERUNG
DES
NEURONS
.
90
4.5.4.
EINFLUSS
DER
CYTOSKELETTDICHTE
UND
CYTOSKELETTARCHITEKTUR
AUF
DIE
ORAGANELLKOMPARTIMENTIERUNG
.
92
4.6.
AUSBLICK
.
96
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
98
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
100 |
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