Analytik von methylierten Blutproteinen und ihre Anwendung für das "Biologische Monitoring" Methylbromid-exponierter Personen:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1993
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K SA A
PHARMAZEUTISCHE CHEMIE
ANALYTIK VON METHYLIERTEN BLUTPROTEINEN
UND IHRE ANWENDUNG FUER DAS *BIOLOGISCHE MONITORING
METHYLBROMID-EXPONIERTER PERSONEN
INAUGURAL-DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DER
NATURWISSENSCHAFTEN IM FACHBEREICH CHEMIE DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET
DER WESTFAELISCHEN WILHELMS-UNIVERSITAET MUENSTER
VORGELEGT VON ;AE^
ANDREAS MUELLER AUS MARI / WESTF.
-1993-
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS -1 -
I. THEORETISCHER TEIL
1. EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 2
1.1 ZIELSETZUNG 2
1.2 EIGENSCHAFTEN UND VERWENDUNG VON METHYLBROMID 3
1.3 METABOLISMUS VON METHYLBROMID 5
1.4 TOXIZITAET, MUTAGENITAET UND KANZEROGENITAET 9
1.5 BIOMONITORING UND *TARGET-DOSE -KONZEPT 12
1.6 ALKYLIERUNG VON AMINOSAEUREN IN PROTEINEN 16
2. ENTWICKLUNG DER BESTIMMUNGSMETHODEN 18
2.1 VERARBEITUNG DER VOLLBLUTPROBEN 18
2.2 ISOLIERUNG VON ALBUMIN AUS VOLLBLUT 19
2.3 ISOLIERUNG VON GLOBIN AUS VOLLBLUT 23
2.4 BESTIMMUNG DES PROTEINGEHALTES 24
2.5 METHODEN ZUR HYDROLYSE DER PROTEINE 25
2.6 METHODEN ZUR DERIVATISIERUNG DER AMINOSAEUREN 27
2.6.1 DERIVATISIERUNG MIT DABSYLCHLORID (DABS) 27
2.6.2 DERIVATISIERUNG MIT O-PHTHALDIALDEHYD (OPA) 28
2.6.3 DERIVATISIERUNG MIT CARBAZOLYLCARBONSAEURECHLORID (CCC) 28
2.6.4 DERIVATISIERUNG MIT 9-FLUORENYLMETHOXYCARBONYLCHLORID (FMOC) 29
2.7 EXTERNE UND INTERNE STANDARDS 31
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS - II -
2.8 ENTWICKLUNG DER HPLC-TRENNUNGEN 32
2.8.1 HPLC-SYSTEME FUER TRYPTISCH UND DURCH PROTEINASE K ABGEBAUTE
PROTEINE 32
2.8.2 HPLC-SYSTEME FUER SAUER HYDROLYSIERTE PROTEINE 33
2.8.3 HALTBARKEIT DER HPLC-SAEULEN 36
2.9 BESTIMMUNG DES *KONJUGIERER-STATUS 37
3. UNTERSUCHUNGEN MIT IN VITRO METHYLIERTEN
PROTEINEN 39
3.1 STABILITAET VON S-METHYLCYSTEIN BEI DER SAUREN HYDROLYSE 39
3.2 INKUBATION VON ALBUMIN MIT METHYLBROMID 40
3.3 INKUBATION VON VOLLBLUT MIT 14 C-METHYLBROMID 41
3.3.1 VERTEILUNG DES RADIOAKTIV MARKIERTEN METHYLBROMIDS IM BLUT 41
3.3.2 RADIOAKTIVITAETSMESSUNG 45
4. UNTERSUCHUNGEN AN METHYLBROMID-EXPONIERTEN
ARBEITERN UND KONTROLLPERSONEN 46
4.1 BESCHREIBUNG DER KOLLEKTIVE UND DER BEGASUNGSTECHNIKEN 46
4.2 BESTIMMUNG VON S-METHYLCYSTEIN IN ALBUMIN VON KONTROLLPERSONEN
UND EXPONIERTEN ARBEITERN 49
4.3 BESTIMMUNG VON S-METHYLCYSTEIN IN GLOBIN VON KONTROLLPERSONEN
UND EXPONIERTEN ARBEITERN 52
4.4 VERGLEICH DER S-METHYLCYSTEIN-WERTE IN ALBUMIN UND GLOBIN 54
5. DISKUSSION 57
6. ZUSAMMENFASSUNG 62
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