Immunologische Charakterisierung hämopoetischer Vorläuferzellen beim Hund:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
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| Beschreibung: | München, Univ., Med.Fak., Diss., 1993 |
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1.
EINLEITUNG
.
1
I
I.
DAS
KONZEPT
DER
HAEMATOPOETISCHEN
STAMMZCLLE
.
3
I
2
DIE
CHARAKTERISIERUNG
DER
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFCRZELLE
BEIM
MENSCH
UND
BEI
DER
MAUS
.7
1
3.
DIE
CHARAKTERISIERUNG
DER
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLE
DES
HUNDES
.
16
2
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
22
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
23
3
I
BLUT
UND
KNOCHENMARKPROBEN
.
23
3.2
ZELLKULTURMEDIEN,
REAGENTIEN
UND
MATERIALIEN
.
23
3
3
SEPARATION
DER
ZELLEN
AUS
BLUT
UND
KNOCHENMARK
.
26
3
4
ANTIKOERPER
UND
ANTISEREN
.
26
3
4
1.
DL
A-ANTISEREN
.
26
3
4.2.
MONOKLONALE
UND
POLYKLONALE
ANTIKOERPER
.
26
3.5.
TECHNIKEN
DER
ZELLMARKIERUNG
.
28
3.5
1.
DIREKTE
UND
INDIREKTE
ROSETTIERUNG
MIT
SCHAFERYTHROZYTEN
.
28
3
5
2.
DIREKTE
UND
INDIREKTE
IMMUNFLUORCSZCNZ
.
29
3.6.
TECHNIKEN
ZUR
DEPLETION
ODER
ANREICHERUNG
VON
ZELLPOPULATIONEN
.
3
1
3.6.1.
SCHAELCHENADHAERENZ
.
31
3.6.2.
ANTIKOERPERINKUBATIONEN
UND
KOMPLEMENT-LYSE
.
31
3.6.3.
INDIREKTE
ROSETTIERUNG
MIT
HAMMELERYTHROZYTEN
UND
SEPARATION
IM
DICHTEGRADIENTEN
.
32
3
6
4
INDIREKTE
ROSETTIERUNG
MIT
IMMUNOMAGNETIC
BEADS
UND
SEPARATION
IM
MAGNETFELD
.
33
3.6.5.
ZELLSEPARATION
MIT
HILFE
DES
FLUORESCENCE-ACTIVATED-CELL
SORTERS
(FACS)
.
34
3.7.
GENERIERUNG
VON
CTL
.
35
3.8.
KNOCHENMARK-KULTUREN
.
37
3.8
1.
DIE
AGARKULTUR
NACH
PIKE
&
ROBINSON
.
37
3.8
2.
AGARKULTUR
NACH
KONWALINKA,
ET
AL
.
37
3.8.3.
KOKULTUR
VON
ZYTOTOXISCHEN
T-LYMPHOZYTEN
UND
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
DES
HUNDES
.
39
4.
ERGEBNISSE
.
42
4
I
.
ETABLIERUNG
DER
KNOCHENMARKKULTUR
NACH
KONWALINKA
BEIM
I
LUND
.
42
4.1.1.
ZELLDOSIS-KINETIK
.
'.42
4.11.1.
VERGLEICH
DER
ZELL-DOSIS-KINETIK
IN
PIKE
&
ROBINSON
UND
KONWALINKA-KULTUR
.
42
4.1.1.2.
VERGLEICH
DER
ZCLL-DOSIS-KINCTIK
NACH
STIMULATION
MIT
KONDITIONIERTEM
MEDIUM
MIT
UND
OHNE
PBL
.
44
4.1.2.
DOSIS-KINETIK
DER
WACHSTUMSFAKTOREN
.
45
4.1
2.1.
CSA-DOSIS-KINCTIK
IN
DER
AGAR-KULTUR
NACH
PIKE
&
ROBINSON
.
46
4.1.2
2.
CSA-DOSIS-KINCTIK
IN
DER
AGAR-KULTUR
NACH
KONWALINKA
.
46
4
12
3
PHA-LCM-DOSIS-KINETIK
IN
DER
AGAR-KULTUR
NACH
KONWALINKA
.
46
4
12
4
GM-CSF-DOSIS-KINCTIK
IN
DER
AGAR-KULTUR
NACH
KONWALINKA
46
4.125
DOSIS-KINETIK
VON
AUTOLOGEN
ODER
ALLOGCNCN
FCEDCRZCLLEN
IN
DER
AGAR-KULTUR
NACH
KONWALINKA
.
49
4
13
MORPHOLOGIE
DER
CFU-GM
.
50
4
2
DIE
VERTEILUNG
VON
DIFLCRENZICRUNGS-ANTIGCNCN
(
T-ZELL-,
13-ZCLL
UND
MONOZYTEN-MARKER)
IM
KNOCHENMARK
VON
HUNDEN
.53
4
2.1.
UEBERSICHT
.
53
4
2.2
PLASTIK-ADHAERENZ
.
55
4
2
3
DIE
VERTEILUNG
DER
DIFFERENZIERUNGS-ANTIGENE
(T-ZELL-,
B-ZELL
UND
MONOZYTEN-MARKER)
IM
KNOCHENMARK
VOR
UND
NACH
BEADS
DEPLETION
.
56
4
2
4.
DER
EINFLUSS
DER
SRBC-DEPLCTION
MIT
T-ZELL-,
B-ZELL
UND
MONOZYTEN-MARKERN
AUF
DAS
CFU-GM
WACHSTUM
.
60
4
2
5
DER
EINFLUSS
DER
BEADS-DEPLETION
MIT
T-ZELL-,
B-ZELL
UND
MONOZYTEN-MARKERN
AUF
DAS
CFU-GM
WACHSTUM
.
62
4.2.6
DER
EINFLUSS
VON
FEEDER-ZELLEN
AUF
DAS
CFU-GM
WACHSTUM
NACH
BEADS-DEPLETION
MIT
T-ZELL-,
B-ZELL
UND
MONOZYTEN-MARKERN
.
67
4
3.
DIE
EXPRESSION
DER
DIFLCRENZIERUNGS-ANTIGENE
MDT-P
I
-
UND
ML
1C
KLASSE-LL
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
DES
HUNDES
.
70
4.3.1.
MHC
KLASSE
II
(10T2A)
.
70
4.3.1.1
KOMPLEMENT-LYSE
MIT
IOT2A
.
70
4.3.
1
2
DER
EINFLUSS
VON
IOT2A-NCGATIVCN
PBL
AUF
DAS
CFU
GM-WACHSTUM
NACH
IOT2A-DCPLCTION
MIT
BCADS
.
71
4
3.1
3.
VERTEILUNG
DES
CFU-GM
WACHSTUMS
IN
ZELL-SORTER
FRAKTIONEN
VON
IOT2A-MARKIERTEM
KNOCHENMARK
.
72
4
3.1
3.1.
ZELLSCATTER
UND
FLUORESZENZ-MUSTER
VON
IOT2A
MARKIERTEM
KNOCHENMARK
.
73
A)
VERTEILUNG
DER
KM-ZELLEN
IN
DER
ZELLSCATTER
DARSTELLUNG
VOR
UND
NACH
SORT
MIT
IOT2A
.
73
B)
VERTEILUNG
DER
KM-ZELLEN
IM
FLUORESZENZ
HISTOGRAMM
VOR
UND
NACH
SORT
MIT
IOT2A
.
74
4
3.1
3.2
CFU-GM
WACHSTUM
IN
DEN
SORT-FRAKTIONEN
.
75
4.3.2
MDT-PI
.
78
4.3
2.1
VERTEILUNG
DES
CFU-GM
WACHSTUMS
IN
ZELL-SORTER
FRAKTIONEN
VON
MDT-PI-MARKIERTEM
KNOCHENMARK
.
78
4
3.21
I
ZELLSCATTER-UND
FLUORESZENZ-MUSTER
VON
MDT-PI
MARKIERTEM
KNOCHENMARK
.78
A)
VERTEILUNG
DER
KM-ZELLEN
IN
DER
ZELLSCATTER
DARSLCLLUNG
VOR
UND
NACH
SORT
MIT
MDT-PI
.
.
78
B)
VERTEILUNG
DER
KM-ZELLEN
IM
FLUORESZENZ
HISTOGRAMM
VOR
UND
NACH
SORT
MIT
MDT-PI
.
.
.
80
4
3.2
1.2
CFU-GM
WACHSTUM
IN
DEN
SORT-FRAKTIONEN
.
81
4
3.2
2.
DIE
AUTOLOGE
KMT
MIT
MDT-PI
BZW
MT606
NEGATIVEM
KNOCHENMARK
.
83
4.3
2.2
I.
DEPLETIONSQUALITAET
UND
CFU-GM-WACHSTUM
NACH
MDT-P
I-DCPLETION
.
84
4.3.2.2.2
DCPLETIONSQUALITAET
UND
CFU-GM-WACHSTUM
NACH
MT606-DEPLETION
.
85
4.3
2.2.3.
VERGLEICH
DES
KLINISCHEN
VERLAUFS
NACH
AKMT
MIT
MDT-PL
UND
MT606
.
86
4.4.
DIE
EXPRESSION
VON
ALLO-ANTIGENEN
(MAJOR
UND
MINOR
HISTOKOMPATIBILITAETSKOMPLEX
ANTIGENE)
AUF
HAEMATOPOCTISCHCN
VORLAEUFCRZELLEN
DES
HUNDES
.
89
4.4.
1
.
SEROLOGISCHE
REAKTIONEN
GEGEN
DLA-A
UND
DLA-13
ANTIGENE
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
DES
HUNDES
.
89
4.4.2.
ZELLULAERE
REAKTIONEN
GEGEN
DLA-ANTIGENE
(DLA-A
UND
-B)
AUF
HAEMATOPOCTISCHCN
VORLAEUFCRZELLEN
DES
I
LUNDES
.
93
4
4.2.1.
REAKTIONEN
GEGEN
EINEN
DLA-HAPLOTYP
.
96
4.4.2.2,
REAKTIONEN
GEGEN
DLA-A
.
98
4.4.2.3.
REAKTIONEN
GEGEN
DLA-B
.
102
4.4.3.
ZELLULAERE
ZYTOTOXIZITAET
GEGEN
MINOR-ANTIGENE
(NON-DLA)
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
DES
HUNDES
.
106
5.
DISKUSSION
.
116
5.
1
DIE
TECHNIK
DER
KNOCHENMARK-KULTUR
BEIM
HUND
.
1
16
5.2.
DIFFERENZIERUNGS-ANTIGENE
IM
KNOCHENMARK
VON
HUNDEN
.
1
18
5.2.1.
DIE
TECHNIK
DER
ZELL-SEPARATION
BEIM
HUND
.118
5
2
2
AKZESSORISCHE
ZELL-POPULATIONEN
IM
KNOCHENMARK
DES
HUNDES
.
121
5.2
3
DIE
EXPRESSION
VON
MDT-PI-ANTIGEN
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFCRZELLEN
BEIM
HUND
.127
5
2
4
DIE
EXPRESSION
VON
DR-ANTIGENEN
(MHC
KLASSE
II)
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFCRZELLEN
BEIM
HUND
.
129
5.3.
DIE
EXPRESSION
VON
/MIO-ANTIGENEN
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLCN
DES
HUNDES
.
131
5.3
1.
DIE
TECHNIK
DER
KOINKUBATION
VON
KNOCHENMARK
UND
CTL
.
131
5.3.2.
MAJOR
HISTOKOMPATIBILITAETS
ANTIGENE
(DLA-A
UND
DLA-B)
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
DES
HUNDES
.133
5.3.3.
MINOR
HISTOKOMPATIBILITAETS
ANTIGENE
(MHA)
AUF
HAEMATOPOETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
DES
HUNDES
.
135
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
138
7.
SUMMARY
.
140
8.
ABKUERZUNGSVCRZCICHNIS
.
142
9.
LITERATURVERZEICHNIS
.
1
'
44 |
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