Untersuchungen zur Überlebensfähigkeit und zur Abbauaktivität eines genetisch modifizierten Mikroorganismus in Aquifersedimentmikrokosmen:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Göttingen
Cuvillier
1993
|
Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | V, 187 S. Ill., graph. Darst. |
ISBN: | 3928815954 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
.
I
1.1.
PROBLEMATIK
VON
AQUIFERVERUNREINIGUNGEN
-
BIOLOGISCHE
SANIERUNG
VON
AQUIFEREN
.
1
1.2.
LABORMIKROKOSMEN
ZUR
UMWELTUNTERSUCHUNG
.
S
1.3.
VERHALTEN
UND
ABBAUAKTIVITAET
VON
GENETISCH
MODIFIZIERTEN
MIKROORGANISMEN
(GEMS)
.
9
1.3.1.
MERKMALE
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
.
12
1.3.2.
THEORIE
DER
ABBAUKINETIK
.
IS
1.4.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
20
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
22
2.1.
BAKTERIEN
UND
PLASMIDE
.
22
2.2.
CHEMIKALIEN
.
23
2.3.
MEDIEN,
PUFFER,
EXTRAKTIONSMITTEL
UND
KULTURBEDINGUNGEN.
.23
2.3.1.
VOLLMEDIEN
.
24
2.3.2.
SELEKTIVMEDIEN
UND
PUFFER
.
25
2.3.3.
EXTRAKTIONSMITTEL
UND
LOESUNGEN
.
28
2.3.4.
ANZUCHT
VON
BAKTERIEN
.
30
2.4.
PROBENNAHMEDER
AQUIFERSEDIMENTE
.
31
2.4.1.
ECHEM,
DEUTSCHLAND
.
31
2.4.2.
CAPE
COD,
USA
.
31
2.5.
PHYSIKALISCH-CHEMISCHE
UNTERSUCHUNGSVERFAHREN
.
32
2.5.1.
PH-WERT
.
32
2.5.2.
ELEKTRISCHE
LEITFAEHIGKEIT
.
32
2.5.3.
TEMPERATUR
.
33
2.6.
MESSUNG
VON
SUBSTITUIERTEN
AROMATISCHEN
KOHLEN
WASSERSTOFFEN
MIT
DER
HPLC
.
33
2.7.
BODENPHYSIKALISCHE
UNTERSUCHUNGSMETHODEN
.
36
2.7.1.
MAXIMALE
WASSERKAPIZITAET
.
36
2.7.2.
WASSERGEHALT
UND
TROCKENSUBSTANZ
BESTIMMUNG
.
36
2.7.3.
KORNGROESSENANALYSE
.
37
2.8.
MIKROBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGSVERFAHREN
.
37
2.8.1.
EXTRAKTION
VON
MIKROORGANISMEN
UND
AUSPLATTIERUNG
AUF
SELEKTIVPLATTEN
.
37
2.8.2.
EXTRAKTION
VON
MIKROORGANISMEN
UND
BESTIMMUNG
DER
GESAMTZELLZAHL
MITTELS
DAPI
.
38
2.8.3.
IMMUNFLUORESZENZMIKROSKOPIE
ZUR
ZAEHLUNG
VON
P.
PUTIDA
IPWWO-EB62)
.
39
2.8.3.1.
EXTRAKTION
VON
MIKROORGANISMEN
.
39
2.8.3.2.
ANWENDUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
.
40
2.8.3.3.
KONTROLLEN
ZUR
SPEZIFITAET
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
.
42
2.8.4.
MESSUNG
DES
BAKTERIENWACHSTUMS
.
45
2.8.5.
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
.
45
2.8.6.
PLASMIDEXTRAKTION
UND
GELELEKTROPHORESE
.
46
2.8.7.
GRAMFAERBUNG
.
47
2.8.8.
IDENTIFIZIERUNG
DES
META-SPALTUNGSWEGES
VON
BAKTERIEN
DURCH
BESPRAYEN
MIT
EINER
CATECHOL-LOESUNG
.
47
2.8.9.
.
QUANTIFIZIERUNG
VON
BAKTERIENFRESSENDEN
PROTOZOEN
.
48
2.8.10
ISOLIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
AUTOCHTONEN
MIKROORGANISMEN
.
48
2.8.11.
KONJUGATIVER
PLASMIDTRANSFER
ZWISCHEN
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
UND
P.
PUTIDA
UWC1
.
49
2.8.11.1
BESTIMMUNG
DES
OPTIMALEN
PLASMID
TRANSFERS
.
.50
2.8.11.2.
PLASMIDTRANSFER
IN
SEDIMENTMIKROKOSMEN
UND
DURCHFLUSS-SEDIMENTMIKROKOSMEN
.
51
2.8.12.
RASTERELEKTRONENMIKOSKOP-ANHEFTUNG
VON
MIKROORGANISMEN
AN
OBERFLAECHEN
.
52
2.9.
KINETIKSTUDIEN
MIT
REINKULTUREN
.
53
2.9.1.
WACHSTUM
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
.
53
2.9.2.
KINETIKPARAMETER
DES
ABBAUES
VON
4-EB
.
54
2.10.
ENTWICKLUNG
VON
MIKROKOSMEN:
BESTIMMUNG
DER
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
UND
ABBAUAKTIVITAET
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
.
55
2.10.1.
SEDIMENTMIKROKOSMEN
.
55
2.10.1.1.
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
.
55
2.10.1.2.
KINETIKPARAMETER
DES
ABBAUES
VON
4-EB
.
58
2.10.2.
DURCHFLUB-SEDIMENTMIKROKOSMEN
.
59
2.10.2.1.
INOKULATION
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
IN
ANSAETZE
MIT
UNTERSCHIEDLICHEN
NAEHRSTOFF
VERHAELTNISSEN
.
62
2.10.2.2.
INOKULATION
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
IN
EINER
KEIMZAHL
VON
10*-10
S
ZELLEN/G
TS
.
63
2.11.
DATENANALYSE
.
63
2.11.1.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
63
2.11.2.
KINETIKANALYSE
.
64
2.11.3.
COMPUTERSIMULATIONSMODELL
ZUR
ABSCHAETZUNG
DER
MOBILITAET
VON
4-EB
IN
SEDIMENTEN
.
66
3.
ERGEBNISSE
.
68
3.1.
NACHWEISGRENZEN
UND
SPEZIFITAET
DER
BIOLOGISCHEN
UND
CHEMISCHEN
ANALYTIK
.
68
3.2.
DETERMINATION
VON
BEDINGUNGEN,
UNTER
DENEN
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
UEBERLEBT
.
70
3.2.1.
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTIDA
(PWWO
EB62)
IN
SEDIMENTMIKROKOSMEN
.
70
3.2.1.1.
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTIDA
(PWWO
EB62)
IM
STERILISIERTEN
SEDIMENT
.
72
3.2.1.2.
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTIDA
(PWWO
EB62)
BEI
VERSCHIEDENEN
NAEHRSTOFF
BEDINGUNGEN
UND
UNTERSCHIEDLICHEN
INOKULATIONSKEIMZAHLEN
.
74
3.2
.1.3.
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTIDA
(PWWO
EB62)
BEI
NIEDRIGEN
SAUERSTOFF
KONZENTRATIONEN
.
85
3.2.2.
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTIDA
(PWWO
EB62)
IN
DURCHFLUSS-SEDIMENTMIKROKOSMEN
.
86
3.2.2.1.
BESTIMMUNG
DER
PROTOZOEN,
DIE
DEN
GEM
FRESSEN
KONNTEN
.
95
3.3.
UNTERSUCHUNG
DES
ABBAUES
VON
4-EB
IN
FLIISSIGKULTUR
UND
MIKROKOSMEN
.
96
3.3.1.
THEORETISCHE
ABSCHAETZUNG
DES
VERBLEIBS
VON
4-EB
IN
EINEM
MODELL-SEDIMENT
.
97
3.3.2.
KINETIK
VON
4-EB
IN
FLUESSIGKULTUR
.
97
3.3.2.1.
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
IN
FLUESSIGKULTUR
.
99
3.3.2.2.
BESTIMMUNG
DER
ABBAURATEN
VON
4-EB
.
1
00
3.3.3.
ABBAUKINETIK
VON
4-EB
IN
SEDIMENT
MIKROKOSMEN
.
1
03
3.3.3.1.
BESTIMMUNG
DER
ABBAURATEN
VON
4-EB
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
TEMPERATUREN
.
1
03
3.3.3.2.
EFFEKT
DES
WACHSTUMS
VON
P.
PUTIDA
(PWWO
EB62)
AUF
DIE
ABBAURATEN
.
109
3.3.4.
ABBAU
VON
4-EB
IN
DURCHFLUSS-SEDIMENTMIKRO
KOSMEN
UNTER
VERSCHIEDENEN
NAEHRSTOFF
BEDINGUNGEN
.
11
3
3.3.5.
ABBAU
VON
4-EB
DURCH
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
IN
DURCHFLUSS-SEDIMENTMIKROKOSMEN
BEI
EINER
STARTKEIMZAHL
VON
10
4
-10
S
/G
TS
.
120
3.4.
PLASMIDTRANSFER
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
AUF
P.
PUTIDA
UWC1
.
123
3.4.1.
PLASMIDTRANSFER
DURCH
"FILTERMATING"
.
123
3.4.2.
PLASMIDTRANSFER
IN
SEDIMENTMIKROKOSMEN
.
124
3.4.3.
PLASMIDTRANSFER
IN
DURCHFLUSS-SEDIMENT
MIKROKOSMEN
.
1
25
4.
DISKUSSION
.
127
4.1.
BEWERTUNG
DER
UEBERLEBENSFAEHIGKEIT
VON
P.
PUTLDA
(PWWO-EB62)
UNTER
"IN
SITU"
BEDINGUNGEN
.
128
4.2.
VORHERSAGE
DER
"IN
SITU"-ABBAURATEN
VON
4-EB
.
136
4.3.
EFFEKTE
VON
GEMS
AUF
DIE
UMWELT
-
PLASMIDTRANSFER
VON
P.
PUTIDA
(PWWO-EB62)
AUF
EINEN
ANDEREN
REZIPIENTEN
.
146
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
ISO
6.
ABKIIRZUNGSVERZEICHNIS
.
1
52
7.
AUFLISTUNG
VON
ABBILDUNGEN
UND
TABELLEN
.
15
S
8.
LITERATURVERZEICHNIS
.
16
0
9.
ANHANG
.
ISS |
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