Elektronentransferreaktionen in gezielt modifizierten photosynthetischen Reaktionszentren von Rhodobacter sphaeroides:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1992
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | München, Univ., Fak. für Chemie und Pharmazie, Diss., 1993 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
2.
EINLEITUNG
.
3
2.1.
PRINZIP
DER
ENERGIEUMWANDLUNG
IN
DER
PHOTOSYNTHESE
.
3
2.2.
ZYKLISCHER
ELEKTRONENTRANSFER
IN
RB.
SPHAEROIDES.
.
4
2.3.
DAS
PHOTOSYNTHETISCHE
REAKTIONSZENTRUM
.
6
2.4.
ORGANISATION
DES
PUF-OPERONS
UND
SPEZIFISCHE
MUTAGENESE
.
10
2.5.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
12
3.
ERGEBNISSE
.
15
3.1.
PHAENOTYPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
VON
SPEZIFISCHEN
MUTANTEN
AUS
RB.
SPHAEROIDES
UND
ISOLIERUNG
DER
VERAENDERTEN
REAKTIONS
ZENTREN
.
15
3.1.1.
ZUSAMMENSETZUNG
DER
INTRACYTOPLASMATISCHEN
MEMBRAN
DER
VERWENDETEN
STAEMME
.
15
3.1.2.
PNMARE
MUTANTENANALYSE
.
17
3.1.3.
ALLGEMEINE
CHARAKTERISIERUNG
DER
ISOLIERTEN
RCS
.
20
3.1.4.
KRISTALLISATION
.
21
3.2.
AMMOSAUREUMGEBUNG
DES
BCHL
A-DIMERS
UND
PRIMAERE
LADUNGS-
TRENNUNGSSCHNTTE:
DIE
M197-,
L244
UND
L248
MUTANTEN
.
22
3.2.1.
ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE
.
23
3.2.2.
REKOMBINATIONSMESSUNGEN
.
27
3.2.3.
SPEKTROSKOPISCHE
BESTIMMUNG
DES
CHINONGEHALTS
.
29
3.2.4.
EPR-TRIPLETT-MESSUNGEN
.
3.2.5.
STARK-SPEKTROSKOPIE
AN
PVA-FILMEN.
3.2.6.
RESONANZ-RAMAN-UNTERSUCHUNGEN
.
3.3.
UNIDIREKTIONALITAET
DES
ELEKTRONENTRANSFERS:
DIE
M210
UND
L181
MUTANTEN
.
3.3.1.
UMSATZRATENBESTIMMUNG
.
3.3.2.
BESTIMMUNG
DER
QUANTENAUSBEUTE
.
3.3.3.
H'-ANREICHERUNG
IN
REDUZIERTEN
REAKTIONSZENTREN
.
47
CO
W
CO
5
CO
CD
&
O
N
3.4.
DIE
ELEKTRONEN-DONORSEITE
DES
REAKTIONSZENTRUMS:
DIE
L162
MUTANTEN
.
50
3.4.1.
PHOTOSYNTHETISCHE
WACHSTUMSKURVEN
.
51
3.4.2.
PHOTOBLEICHUNG
IN
CHROMATOPHOREN
UND
RCS
.
52
3.4.3.
CYT
C-OXIDATION
UNTER
SAETTIGENDEN
LICHTBEDINGUNGEN
.
54
3.4.4.
ELEKTRONENTRANSFER
IN
INTAKTEN
ZELLEN
.
55
3.4.5.
MESSUNGEN
IN
ISOLIERTEN
RCS
UNTER
AEQUIMOLAREN
BEDIN
GUNGEN
.
58
3.4.6.
ANALYSE
DER
MEHRPHASISCHEN
CYT
C
2
-
RC
REAKTION
IM
WILDTYP;
MODELLBILDUNG
UND
SIMULATION
DES
KURVENVER
LAUFS
.
63
3.4.7.
CYTOCHROMABHAENGIGKEIT
DER
P+'REDUKTION
.
65
3.4.8.
BINDUNGSSTUDIEN
AM
CYT
C
2
-
RC
-
KOMPLEX:
GLEICHGE
WICHTSDIALYSE,
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
UND
KOMPE
TITION
.
68
3.4.9.
CYT
C
2
-
MOBILITATSTESTS:
OXIDATION
BEI
NICHTSAETTIGENDEM
ANREGUNGSLICHT
IN
RCS
UND
IN
INTAKTEN
ZELLEN
.
74
3.4.10.
VISKOSITATSABHAENGIGKEIT
DER
REAKTIONSKINETIK
.
78
3.4.11.
EINFLUSS
DER
LONENSTAERKE
.
81
3.4.12.
ANALYSE
DER
REAKTIONSORDNUNG:
ANPASSUNG
VERSCHIEDE
NER
FUNKTIONEN
AN
DEN
KINETISCHEN
VERLAUF
DER
P
+
-
REDUKTION
.
83
3.4.13.
ELEKTROCHEMISCHE
REDOXTITRATIONEN
.
,
85
3.4.14.
MESSUNGEN
AN
ORIENTIERTEN
PROBEN:
LINEARDICHROISMUS
IN
ORIENTIERTEN
GELEN
UND
EPR-SPEKTROSKOPIE
AN
GE
TROCKNETEN
MEMBRANEN
.
92
4.
DISKUSSION
.
98
4.1.
DIE
PRIMAEREN
PHOTOREAKTIONEN
.
98
4.2.
DIE
UNIDIREKTIONALITAET
DER
PRIMAEREN
LADUNGSTRENNUNGSSCHRITTE
.
101
4.3.
DER
INTERMOLEKULARE
ELEKTRONENTRANSFER
ZWISCHEN
CYT
C
2
UND
RC
.
106
4.3.1.
DIE
CYTOCHROMABHAENGIGKEIT
DER
REAKTIONSKINETIK
FUEHRT
ZUM
ERWEITERTEN
DREI-ZUSTANDSMODELL
FUER
DEN
WT-FALL
.
106
4.3.2.
DIE
ORGANISATION
DER
DONORSEITE
IN
DEN
L162
MUTANTEN
.
112
IN
5.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
120
5.1.
MATERIAL
.
120
5.1.1.
CHEMIKALIEN
UND
ENZYME
.
120
5.1.2.
MEDIEN
UND
PUFFER
.
121
5.1.3.
BAKTERIENSTAMME
.
123
5.2.
MIKROBIOLOGISCHE
METHODEN
.
124
5.2.1.
PHOTOTROPHE
UND
SEMIAEROBE
ZELLZUCHT
VON
PB.
SPHAE
ROIDES
.
124
5.2.2.
STAMMHALTUNG
VON
HB.
SPHAEIAIDES
.
125
5.2.3.
WACHSTUMSKURVEN
.
125
5
3.
PROTEINCHEMISCHE
METHODEN
.
126
5.3.1.
ZELLAUFSCHLUSS
UND
ISOLIERUNG
DER
INTRACYTOPLASMATISCHEN
MEMBRAN
.
126
5.3.2.
SOLUBILISIERUNG
DES
REAKTIONSZENTRUMS
.
126
5.3.3.
AMONENAUSTAUSCH-CHROMATOGRAPHIE
.
127
5.3.4.
DETERGENSAUSTAUSCH
.
130
5.3.5.
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
.
130
5.3.6.
KRISTALLISATION
.
130
5.3.7.
REKONSTITUTION
VON
REAKTIONSZENTREN
IN
LIPOSOMEN
.
131
5.3.8.
ISOLIERUNG
DES
LOESLICHEN
CYTOCHROMS
C
2
AUS
HB.
SPHAE
ROIDES
.
132
5.3.9.
GLEICHGEWICHTSDIALYSE
.
132
5.3.10.
AFHMTAETS-CHROMATOGRAPHIE
.
133
5.4.
SPEKTROSKOPISCHE
METHODEN
.
134
5.4.1.
PHOTOBLEICHUNG
DES
REAKTIONSZENTRUMS
IN
INTAKTEN
ZELLEN
UND
CHROMATOPHOREN
ALS
ERSTE
MUTANTENANALYSE
.
134
5.4.2.
BESTIMMUNG
DER
UMSATZRATE
DES
REAKTIONSZENTRUMS
.
134
5.4.3.
LICHTINTENSITAETSABHAENGIGE
MESSUNGEN
DER
ELEKTRONEN
TRANSPORTRATE
.
136
5.4.4.
BESTIMMUNG
DES
CHINONGEHALTS,
MESSUNG
DER
REKOM
BINATIONSRATEN
.
136
5.4.5.
ELEKTROCHEMISCHE
REDOXTITRATION
.
137
5.4.6.
EPR
TRIPLETT-MESSUNGEN
.
138
IV
5.5.
KINETISCHE
ANALYSE
DES
ELEKTRONENTRANSPORTS
.
139
5.5.1.
REDUKTION
DES
PHOTOOXIDIERTEN
BCHL
A-DIMERS
IN
INTAK
TEN
ZELLEN
.
139
5.5.2.
ANORDNUNG
ZUR
MESSUNG
VON
)IS
-
KINETIKEN
AM
MIKRO
SPEKTRALPHOTOMETER
.
139
5.5.3.
MESSUNG
DER
REDOXREAKTIONEN
DES
CYTOCHROM-POOLS
IN
ZELLEN
.
142
5.5.4.
CYTOCHROM
C2
-
OXIDATION
IN
VITRO.
.
142
5.6.
MESSUNGEN
AN
ORIENTIERTEN
PROBEN
.
143
5.6.1.
POLARISIERTE
ABSORPTIONSSPEKTREN
AN
KOMPRIMIERTEN
GELEN
.
143
5.6.2.
EPR-SPEKTROSKOPIE
AN
GETROCKNETEN
MEMBRANEN
.
144
5.7.
COMPUTER
UND
PROGRAMME
.
145
5.7.1.
DATENTRANSFER
UND
AUSWERTUNG
.
145
5.7.2.
KURVENANPASSUNGEN
.
145
5.7.3.
SIMULATION
DER
KINETIKEN
UND
MODELLBILDUNG
.
146
6.
LITERATUR
.
148
7.
ABKUERZUNGEN
.
161 |
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| title_full_unstemmed | Elektronentransferreaktionen in gezielt modifizierten photosynthetischen Reaktionszentren von Rhodobacter sphaeroides von Josef Wachtveitl |
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