Staubinduzierte Stimulation von Alveolarmakrophagen zur Bildung aktiver Sauerstoffspezies:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Karlsruhe
KfK
1992
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| Schriftenreihe: | Kernforschungszentrum <Karlsruhe> / Projekt Umwelt und Gesundheit: KfK-PUG
7 |
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Seite
1. EINLEITUNG 8
2. MATERIAL UND METHODEN 10
2.1 Gewinnung und Aufbereitung der Stäube 10
2.1.1 Fraktionierung der Stäube 10
2.1.2 Elementgehaltsbestimmung 11
2.2 Isolierung der Rinder Alveolarmakrophagen 12
2.3 Zellkultivierung und Inkubation 12
2.3.1 Vitalitätsbestimmung 13
2.3.2 Charakterisierung der Alveolarmakrophagen 13
2.3.3 Herstellung der Staubsuspensionen 13
2.3.4 Herstellung der Schwermetall Lösungen 13
2.4 Biochemische Analytik der reaktiven Sauerstoff 14
intermediate
2.4.1 Bestimmung von Superoxidanionen (02~) 14
2.4.2 Bestimmung von Wasserstoffperoxid (H202) 14
2.5 Flow CytometriQ 14
2.6 Elektronenmikroskopie (EM) 15
2.6.1 Raster Elektronenmikroskopie (REM) 15
2.6.2 Transmissions Elektronenmikroskopie (TEM) 15
3. ERGEBNISSE 16
3.1 Ergebnisse der Elementaranalyse 16
3.2 Raster elektronenmikroskopische Untersuchungen 16
der Stäube
3.3 Zellcharakterisierung und Vitalität 20
Seite
3.4 Kontrolle der Phagozytose Leistung der Alveolar 20
makrophagen
3.5 REM Aufnahmen von Alveolarmakrophagen nach 24
Inkubation mit Stäuben
3.6 Zellkultur 24
3.7 Abhängigkeit der ROI Sekretion von der Staub 29
konzentration
3.8 Zeitabhängigkeit der ROI Sekretion 29
3.9 Ergebnis der linearen Regression 35
3.10 Inkubation mit Metallverbindungen und Quarzstaub 37
3.10.1 Eisen (II) und Eisen (III) 37
3.10.2 Arsen (III) 38
3.10.3 Cadmium (II) 39
3.11 Messung des respiratory burst nach Phagozytose 39
von Latexpartikeln
3.12 Ca2+ und Mg2+ Abhängigkeit der Stimulation 40
der NADPH Oxidase
3.13 Veränderungen des intrazellularen Ca2+ Spiegels 41
nach Stimulation mit Stäuben
4. DISKUSSION 42
5. LITERATUR 49
6. DANKSAGUNGEN 53
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