Molekulare Analyse neuer P-Domänen: cysteinreiche Module in sekretorischen Peptiden und Muzinen
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1992
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INHALT
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
I.
EINLEITUNG
.
3
II.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
8
1.
MATERIAL
.
8
1.1
TIERE
UND
BIOLOGISCHES
MATERIAL
.
8
1.2
ENZYME
.
8
1.3
KITS
.
8
1.4
PROTEINE,
SYNTHETISCHE
PEPTIDE
UND
NUKLEINSAEUREN
.
8
1.5
FEINCHEMIKALIEN
.
9
1.6
RADLOCHEMIKALLEN
.
9
1.7
GERAETE
.
9
1.8
SONSTIGES
.
9
2.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN.
10
2.1
REINIGUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
10
2.2
CDNA-SYNTHESE
.
11
2.3
ALKALISCHES
AGAROSEGEL
.
12
2.4
HOMOPOLYMER-VERTAENGERUNG
("TALLING
"
)
DER
CDNA
.
12
2.5
PCR
(POLYMERASE-KETTENREAKTION)
.
13
2.6
KLONIERUNG
AMPLIFIZLERTER
DNA
.
13
2.7
VERDAU
MIT
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
.
15
2.8
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
15
2.9
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
15
2.10.
HYBRIDISIERUNGSTECHNIKEN
.
17
2.11
DNA-SEQUENZIERUNG
.
19
3.
PROTEINCHEMISCHE
METHODEN
.
20
3.1
PROTEINPROBEN
.
20
3.2
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
PROTEINLOESUNGEN
.
22
3.3
ACETON-FAELLUNG
VON
PROTEINEN
.
22
3.4
PRODUKTION
VON
ANTI-PEPTID-ANTLKOERPERN
.
22
3.5.
ELISA
.
24
3.6
GELELEKTROPHORESEN
.
25
3.7
PROTEINFAERBUNG
IN
POLYACRYFAMLDGELEN
.
29
3.8
"WESTERN
BLOTTLNG"
.
30
3.9
PONCEAU
S-FAERBUNG
VON
PROTEINEN
AUF
DER
NITROZELLULOSE
.
30
3.10
IMMUNFAERBUNG
VON
PROTEINEN
MIT
ANTL-PEPTLD-ANTIKOERPEM
.
30
3.11
FAERBUNG
VON
GLYKOPROTEINEN
NACH
LEKTINBINDUNG
.
31
3.12
ZUCKERNACHWELS
IN
GLYKOPROTEINEN
(GLYCAN
DETECTLON
KIT).
31
3.13
DEGLYKOSYLLERUNG
VON
GLYKOPROTEINEN
.
31
4.
HISTOCHEMISCHE
METHODEN
.
32
4.1
GEWEBEVORBEREITUNG
.
32
4.2
IN
SITU-HYBRIDLSLERUNG
.
33
4.3
IMMUNHISTOCHEMIE
.
34
4.4
PEROXIDASE
-
ANTLPEROXIDASE-(PAP)-METHODE
.
35
III.
ERGEBNISSE
.
36
1.
FIM-A.1
(FRUEHER
"PRO-SPASMOLYSLN")
.
36
1.1
WESTERN-ANALYSEN
.
36
1.2
KOHLENHYDRAT-NACHWELS
.
39
1.3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
KOHLENHYDRATRESTE
MIT
LEKTINEN
.
42
1.4
IMMUNHLSTOCHEMISCHE
LOKALISATION
.
46
1.5.
IN
SITU-HYBRIDLSLERUNG
.
47
2.
NEUE
P-DOMAENEN
AUS
DER
RATTE
.
48
3.
FIM-C.1
.
51
3.1
CDNA-KLONIERUNG
.
52
3.2
FIM-C.1-SEQUENZ
.
55
3.3
WESTERN-ANALYSE
.
58
3.4
SOUTHERN-ANALYSE
.
60
4.
XP1
UND
XP4
.
61
4.1
CDNA-KLONLERUNG
.
61
4.2
XP1-SEQUENZ
.
63
4.3
XP4-SEQUENZ
.
64
4.4
NORTHERN-ANALYSEN
.
65
4.5
WESTERN-ANALYSE
VON
XP4
.
65
4.6
IMMUNHISTOCHEMISCHE
ANALYSE
VON
XP4
.
67
4.7
IN
SITU-HYBRLDLSIERUNGEN
.
67
4.8
SOUTHERN-ANALYSE
VON
XP4
.
69
5.
XP2
.
70
5.1
CDNA-KLONLERUNG
VON
XP2
.
70
5.2
XP2-SEQUENZ
.
73
5.3
WESTERN-ANALYSE
VON
XP2
.
74
5.4
IMMUNHISTOCHEMISCHE
ANALYSE
VON
XP2
.
77
IV.
DISKUSSION.
78
1.
FIM-A.1
.
78
1.1
BIOSYNTHESE
.
78
1.2
STRUKTUR
.
79
1.3
POLYMORPHISMUS
.
80
1.4
EXPRESSION
UND
SPEICHERUNG
.
80
1.5
HOMOLOGIEN
UND
MOEGLICHE
FUNKTION
.
81
2.
FIM-C.1
.
82
2.1
STRUKTUR
.
82
2.2
KLONIERUNG
.
82
2.3
POLYDISPERSITAET
.
83
2.4
POLYMORPHISMUS
.
84
2.5
HOMOLOGIEN
.
85
3.
XP1
UND
XP4
.
86
3.1
STRUKTUREN
UND
HOMOLOGIEN
.
86
3.2.
BIOSYNTHESE
.
90
3.3.
LOKALISATION
UND
MOEGLICHE
FUNKTION
.
90
4.
XP2
.
91
4.1
IDENTIFIZIERUNG
.
91
4.2
HOMOLOGIEN
.
92
4.3
BIOSYNTHESE
.
94
4
4
LOKALISATION
.
95
4
5
MOEGLICHE
FUNKTION
.
96
V.
LITERATUR
.
97 |
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