Bakterien-, Phagen- und Molekulargenetik:
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Berlin [u.a.]
Springer
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I nhalts Verzeichnis
Allgemeines. 1
a. Abkürzungen und häufig benutzte Begriffe. 3
b. Experimentelle Grundausrüstung. 6
c. Titer-Berechnung und einige statistische
Verfahren; statistische Tafeln. 8
d. Fachliteratur". 19
II. Versuchsanleitungen und Übungsaufgaben. 21
a. Phagenanreicherung und Ultrazentrifugation. 23
1. Vermehrung des Phagen T4. 25
2. Anreicherung und Reinigung des Phagen T4
A. Dextransulfat-PEG-Zweiphasentechnik. 33
3. Anreicherung und Reinigung des Phagen T4
B. Zentrifugation ohne und mit
CsCl-Lösung als Unterlage. 37
4. Bestimmung der Dichte von ^-Phagen durch
CsCl-Gradientenzentrifugation. 43
5. Abschätzen von Sedimentationskonstanten
durch Saccharosegradienten-Zentrifugation 49
Übungsaufgaben. 56
b. Nukleinsäuren und Transcription. 58
6. Isolation von DNS aus T4 oder T5 Phagen. 61
7. Thermische De- und Renaturierung von
DNS verschiedener Organismen. 66
8. Isolation ^H-Uridin-markierter mRNS
aus T4-infizierten Bakterien. 73
9. Hybridisation von Phagen-DNS und -mRNS
auf Nitrozellulosefiltern. 8l
10. Zeitpunkt der Transcription eines Genes,
ermittelt durch Phänokopie mit
5-Fluoruracil. 88
Übungsaufgaben. 93
IX
Mutation und Photobiologie. 95
11. Unterscheidung von Geno- und Phänotyp. 98
12. Nachweis der Zufallsverteilung von
Spontanmutationen. 102
13. Mutagene und inaktivierende Wirkung
von Ultraviolett auf den Phagen Kappa. 107
14. Reversible photochemische Änderung
der Cytidylsäure. 119
15. Chemische Induktion von Hin- und Rück-
mutationen bei Bakterien. 126
Übungsaufgaben. 133
Übertragung und Rekombination von
genetischem Material. 135
16. Kreuzung von E. coli Bakterien nach
der "Fahrplan-Technik". 138
17. Zwei- und Dreifaktorkreuzungen mit
dem Phagen Kappa. 144
18. Transduktion gekoppelter und ungekop-
pelter Gen-Marken mit dem Phagen Pl. 152
19. Übertragung und Eliminierung eines
Plasmids (F'lac). 159
20. Induktion lysogener und bakteriocino-
gener Bakterien. 165
21. Transfektion von E. coli Sphaero-
plasten mit DNS des Phagen A. 172
Übungsaufgaben. 178
Phänische Expression. 179
22. Bestimmung eines metabolischen Blocks
durch Auxanographie und Syntrophie. 181
23. Komplementation von Nonsense-Mutanten
des Phagen Kappa. 189
24. Konstitutive und induzierte Synthese
von ß-Galactosidase. 194
25. Die Morphopoiese von T4 Phagen. 202
Übungsaufgaben. 208
III. Anhang. 211
a. Nährmedien und Lösungen. 213
b. Bakterien- und Phagenstämme. 218
c. Bezugsquellen für experimentelles Zubehör. 222
d. Das Protokollieren wissenschaftlicher
Versuche. 224
IV. Versuchsergebnisse und Lösungen zu den
Übungsaufgaben. 227
a. Versuchsergebnisse. 229
b. Lösungen zu den Übungsaufgaben. 279
XI |
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