Struktur, Spleißprozesse und Funktionen mitochondrialer Introne: d. "mobile Intron" d. Ascomyceten Podospora anserina
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1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Berlin u.a.
Cramer
1989
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Schriftenreihe: | Bibliotheca mycologica
127 |
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adam_text | BIBLIOTHECA MYCOLOGICA BAND 127 STRUKTUR, SPLEISSPROZESSE UND FUNKTIONEN
MITOCHONDRIALER INTRONE DAS MOBILE INTRON DES ASCOMYCETEN PODOSPORA
ANSERINA VON UDO SCHMIDT MIT 16 ABBILDUNGEN UND 6 TABELLEN IM TEXT J.
CRAMER IN DER GEBRUEDER BORNTRAEGER VERLAGSBUCHHANDLUNG BERLIN *
STUTTGART 1989 STRUKTUR, FUNKTION UND SPLEISSPROZESSE MITOCHONDNALER
INTRONE DAS MOBILE INTRON DES ASCOMYCETEN PODOSPORA ANSERINA
INHALTSVERZEICHNIS TEIL I: DIE INTRONE MITOCHONDNALER MOSAIKGENE
NIEDERER EUKARVONTEN 1. 2. 2.1. 2.2. 3. 3.1. 3.2. 4. 4.1. 4.2. 5. TEIL
II: 1. 2. 2.1. 2.2. 2.3. 2.4. 2.5. 2.6. 2.6.1. 2.6.2. 2.7. 2.7.1. 2.7.2.
2.8. 2.9. EINLEITUNG STRUKTUR MITOCHONDRIALER INTRONE INTRONE DER GRUPPE
I INTRONE DER GRUPPE II SPLEISSPROZESSE MITOCHONDRIALER INTRONE IN VITRO
AUTOKATALYTISCHES SPLEISSEN VON GRUPPE I INTRONEN AUTOKATALYTISCHES
SPLEISSEN VON GRUPPE N INTRONEN SPLEISSPROZESSE MITOCHONDRIALER INTRONE IN
VIVO INTRON-KODIERTE SPLEISSPROTEINE (MATURASEN) KEM-KODIERTE
SPLEISSPROTEINE SONSTIGE INTRON-KODIERTE FUNKTIONEN DIE TRANSKRIPTE AUS
DER MTDNA REGION DES MOBILEN INTRONS DES ASCOMVCETEN PODOSPORA
ANSERINA PROBLEMSTELLUNG: MATERIAL UND METHODEN STAEMME NAEHRMEDIEN,
KULTURBEDINGUNGEN UND STAMMHALTUNG PLASMIDE WICHTIGE REAGENZIEN UND
CHEMIKALIEN WICHTIGE PUFFER UND LOESUNGEN DNA-ISOLATION AUS E. COLI
SCHNELLAUFARBEITUNG PLASMID-ISOLATION ISOLATION VON DNA UND RNA AUS P.
ANSERINA ISOLATION MITOCHONDRIALER DNA ISOLATION MITOCHONDRIALER RNA
RESTRIKTION VON DNA DENATURIERUNG EINZELSTRAENGIGER NUKLEINSAEUREN ZUR
GELELEKTROPHORESE SEITE 1 3 4 15 18 18 25 30 32 39 43 46 50 50 50 50 51
52 52 52 52 53 53 53 54 54 2.9.1. RNA-DENATURIERUNG FUER DIE
AGAROSE-GEL-ELEKTROPHORESE 54 2.9.2. DENATURIERUNG VON NUKLEINSAEUREN FUER
DIE POLYACRYLAMID/HARNSTOFF-GELELEKTROPHORESE 54 2.10. GELELEKTROPHORESE
54 2.10.1. ELEKTROPHORESE MIT AGAROSE-GELEN 54 2.10.2. ELEKTROPHORESE
MIT POLYACRYLAMID(PAA)-GELEN 55 2.11. ELUTION VON NUKLEINSAEUREN AUS
GELEN 55 2.11.1. ELUTION VON DNA AUS AGAROSE-GELEN 55 2.11.2. ELUTION
VON RNA AUS LOW-MELTING-TEMPERATURE (LMT) AGAROSE-GELEN 56 2.11.3.
ELUTION VON DNA AUS POLYACRYLAMID(PAA)-GELEN 56 2.12. RADIOAKTIVE
MARKIERUNG VON NUKLEINSAEUREN MIT 32 P 56 2.12.1. NICK-TRANSLATION VON
DNA MIT A 32 P-DATP 56 2.12.2. 3 -ENDMARKIERUNG VON DNA MIT
DNA-POLYMERASE I (KLENOW-FRAGMENT) UND Y^P-ATP 56 2.12.3.
5 -ENDMARKIERUNG VON DNA MIT T4 POLYNUKLEOTID-KINASE UNDY 32P. ATP 56
2.12.4. 5 -ENDMARKIERUNG VON RNA MIT T4 POLYNUKLEOTID-KINASE 2.13.
2.13.1. 2.13.2. 2.14. 2.14.1. 2.14.2. 2.14.3. 2.14.4. 2.15. 2.15.1.
2.15.2. 2.15.3. 2.15.4. 2.16. 2.17. 2.18. 3. 3.1. UND Y P-ATP
HYBRIDISIERUNG VON NUKLEINSAEUREN FILTERHYBRIDISIERUNG VON DNA
FILTERHYBRIDISIERUNG VON RNA IN VITRO REKOMBINATION VON DNA LIGAUEON
ALKALISCHE PHOSPHATASE BEHANDLUNG BLUNT END REAKTION MIT T4
DNA-POLYMERASE TRANSFORMATION STRUKTURANALYSE VON RNA
ELEKTRONENMIKROSKOPIE RNASEH VERDAUUNG DEBRANCHING ASSAY MIT HELA
ZELLEXTRAKT PRIMER EXTENSION UND DIDESOXY-SEQUENZIERUNG IN VITRO
TRANSKRIPTION SPLEISSEN VON RNA IN VITRO BIOLOGISCHE SICHERHEITSMASSNAHMEN
ERGEBNISSE HAEUFIGKEITSVERTEILUNG MITOCHONDRIALER RNA UEBER DAS 57 57 57
57 57 57 58 58 58 58 58 59 59 59 59 60 60 61 CHONDRIOM DES WILDSTAMMES S
VON P. ANSERINA 61 3.2. DIE TRANSKRIPTE DER DISKONTINUIERLICHEN GENE CO/
UND CYTB DES WILDSTAMMES S VON P. ANSERINA 62 3.2.1. KLONIERUNG VON
MLDNA FRAGMENTEN FUER DIE TRANSKRIPTKARTIERUNG 64 3.2.2. KARTIERUNG DER
TRANSKRIPTE 64 3.3. URSPRUNG DER ZUM MOBILEN INTRON HOMOLOGEN
TRANSKRIPTE 69 3.3.1. VERGLEICH DER TRANSKRIPTE DES MOBILEN INTRONS
VERSCHIEDENER PODOSPORA-S&MME 69 3.3.2. STRANGSPEZIFITAET DER BEIDEN
TRANSKRIPTE DES MOBILEN INTRONS 71 3.4. FEINKARTIERUNG DER TRANSKRIPTE
DES ERSTEN EXONS (EL), DES ERSTEN INTRONS (IL/PLDNA) UND DES ZWEITEN
EXONS (E2) DES COI GENS 73 3.4.1. ISOLIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG VON
EXON 1- UND EXON 2- SPEZIFISCHEN DNA FRAGMENTEN 74 3.4.2. KARTIERUNG DER
TRANSKRIPTE 75 3.5. STRUKTURANALYSE DER TRANSKRIPTE DES MOBILEN
INTRONS 76 3.5.1. ELEKTRONENMIKROSKOPIE 77 3.5.2. RNASEH VERDAUUNG 78
3.5.3. DEBRANCHING ASSAY MIT HELA ZELLEXTRAKT 79 3.5.4. PRIMER
EXTENSION UND DIDESOXY-SEQUENZIERUNG 80 3.6. SPLEISSPROZESSE DES COI II
IN VITRO 81 3.6.1. KONSTRUKTION VON TRANSKRIPTIONSPLASMIDEN MIT DER
E1/I1/E2 REGION DES COI GENS 81 3.6.2. IN VITRO SPLEISSREAKTION DER COI
II RNA 83 4. DISKUSSION 85 4.1. DIE REIFEN MRNAS DER MOSAIKGENE COI UND
CYTB 85 4.2. DIE TRANSKRIPTE DES MOBILEN INTRONS VON P. ANSERINA 91
4.2.1. URSPRUNG DER SPEZIES B RNA (2,7 KB) 91 4.2.2. URSPRUNG DER
SPEZIES A RNA (2,5 KB) 92 4.2.3. DIE TRANSKRIPTE ALS GRUNDLAGE FUER EINE
REVERSE TRANSKRIPTION DES MOBILEN INTRONS 95 4.2.4. DIE TRANSKRIPTE
ALS GRUNDLAGE FUER EINE EXPRESSION DES MOBILEN INTRONS 96 4.3. IN VITRO
SPLEISSREAKTION DER COI II RNA 99 5. ZUSAMMENFASSUNG 101 6.
LITERATURVERZEICHNIS 102
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