Einfluss eines small molecule inhibitor of Keap1 auf eine Endotoxin-induzierte Entzündungsreaktion:
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Aachen
[2023]
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
V
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
IMMUNSYSTEM
.
1
1.1.1
ANGEBORENES
UND
ADAPTIVES
IMMUNSYSTEM
.
1
1.1.2
MAKROPHAGEN
-
ZELLEN
DES
MONONUKLEAEREN
PHAGOZYTENSYSTEMS
.
2
1.1.3
POLARISATION
VON
MAKROPHAGEN
.
3
1.2
SEPSIS
.
4
1.2.1
SEPSIS
IM
TIERMODELL
.
6
1.3
NUCLEAR
FACTOR
ERYTHROID
2-RELATED
FACTOR
2
(NRF2)
.
8
1.3
1
FUNKTION
UND
AUFBAU
.
8
1.32
NRF2-SIGNALWEG
.
9
1.3.
3
ZIELGENE
.
11
1.3.
4
PHARMAKOLOGISCHE
NRF2-AKTIVATOREN
-
SULFORAPHAN
(SFN)
UND
GRT
.
12
2
ZIELSETZUNG
.
15
3
MATERIALIEN
&
METHODEN
.
17
3.1
CHEMIKALIEN
.
17
3.1.1
ALLGEMEINE
CHEMIKALIEN
.
17
3.1.2
KITS
.
18
3.1.3
STIMULANZIEN
.
19
3.2
GERAETE
.
19
3.3
PRIMER
.
21
3.4
VEKTOREN
.
22
3.5
ZELLKULTUR
.
23
3.5.1
ZELLLINIEN
UND
PRIMAERZELLEN
.
23
3.5.2
KULTURBEDINGUNGEN
.
24
3.5.3
L-929-KULTURMEDIUM-PRODUKTION
(LCM)
.
25
3.5.4
ISOLATION
DER
BONE
MARROW-DENVED
MACROPHAGES
(BMDM)
.
26
INHALTSVERZEICHNIS
3.5.5
PRODUKTION
LENTIVIRALER
PARTIKEL
.
27
3.5.6
TRANSDUKTION
DER
BMDMS
.
28
3.5
7
ETABLIERUNG
DES
STIMULATIONSPLANS
.
29
3.6
MAUS-MODELL
ZUR
LPS-INDUZIERTEN
SEPSIS
.
31
3.6
1
BESCHREIBUNG
DER
EINGESETZTEN
MAUSLINIEN
UND
BEHANDLUNGSGRUPPEN
(BG)
.
31
3
6.2
PRAKTISCHE
DURCHFUEHRUNG
DER
BEHANDLUNGSEINGRIFFE
.
32
3.6.3
XENOGEN
IVIS
OPTICAL
IMAGING
.
36
3.7
ANALYSEN
DER
GENEXPRESSION
.
36
3.7.1
RNA-ISOLATION
.
36
3.7.2
UEBERPRUEFUNG
DER
RNA-QUALITAET
.
37
3.7.3
CDNA-SYNTHESE
.
38
3.7
4
PRIMER-DESIGN
.
38
3.7.5
QUANTITATIVE
ECHTZEIT-POLYMERASE-KETTENREAKTION
(QRT-PCR)
.
39
3.8
ASSAYS
.
40
3.8.1
LUCIFERASE-REPORTERGEN-ASSAY
.
40
3.8.2
CYQUANTYY-ZELLPROHFERATION-ASSAY
.
41
4
ERGEBNISSE
.
43
4.1
AKTIVIERUNG
VON
NRF2
DURCH
GRT-SUBSTANZEN
IN
MAKROPHAGEN
.43
4.2
AKTIVIERUNG
VON
NRF2
IN
RAW264.7
UND
BMDM
DURCH
GRT1002271
.
44
4.3
REDUKTION
DER
LPS-INDUZIERTEN
INFLAMMATION
DURCH
GRT1
002271
.
47
4.4
EINFLUSS
VON
NRF2
AUF
DEN
VERLAUF
EINER
LPS-INDUZIERTEN
SEPSIS
IM
MAUSMODELL
.
50
4.5
GRT-VERMITTELTE
ARE-INDUKTION
IN
ARE-IUC-MAEUSEN
.
52
4.6
EINFLUSS
VON
GRT
AUF
DEN
VERLAUF
EINER
LPS-INDUZIERTEN
SEPSIS
.
54
5
DISKUSSION
.57
5.1
NRF2-VERMITTELTE
REDUKTION
EINER
PROINFLAMMATORISCHEN
IMMUNREAKTION
DURCH
GRT
.
57
5.2
SFN
UND
GRT
-
VERGLEICH
ZWEIER
NRF2-AKTIVATOREN
.
59
5.3
LPS-INDUZIERTE
SEPSIS
IM
MAUSMODELL
.
60
5.4
EINFLUSS
EINES
SMALL
MOLECULE
INHIBITOR
OF
KEAPL
AUF
EINE
LPS-INDUZIERTE
SEPSIS
.
62
5.5
EINSATZ
VON
NRF2-AKTIVATOREN
IN
EINER
HUMANEN
SEPSIS
.
63
INHALTSVERZEICHNIS
5.6
NRF2-AKTIVATOR
(GRT)
VS
GENTECHNISCHER
KNOCKOUT
.
64
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
67
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
69
8
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
81
9
TABELLENVERZEICHNIS
.
83
DANKSAGUNG
.
85
ERKLAERUNG
ZUR
DATENAUFBEWAHRUNG
.87
ERKLAERUNG
UEBER
DEN
EIGENANTEIL
.
89
LEBENSLAUF
.
91 |
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