Charakterisierung der Beteiligung von Tribbles 1 an der Platinsensitivität von Ovarialkarzinomen:
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| Published: |
Jena
2022
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INHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
.......................................................................................................
1
2
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
...............................................................................................
3
2.1
SI-EINHEITEN
...........................................................................................................
3
2.2
EIGENE
ABKUERZUNGEN
............................................................................................
3
3
ZUSAMMENFASSUNG
.......................................................................................................
6
4
EINLEITUNG
......................................................................................................................
8
4.1
OVARIALKARZINOM
.....................................
YY
.......
YY
........
8
4.1.1
PRAEVALENZ
UND
MORTALITAET
...............................................................................
8
4.1.2
HISTOLOGISCHE
SUBTYPEN
................................................................................
8
4.1.3
RISIKOFAKTOREN
..............................................................................................
12
4.1.4
PROTEKTIVE
FAKTOREN
......................................................................................
12
4.1.5
PRAEVENTION
.....................................................................................................
12
4.1.6
REZIDIVE
UND
RESISTENZ
...............................................................................
13
4.1.7
PROGNOSEFAKTOREN
.........................................................................................
14
4.1.8
DIAGNOSTIK
UND
FRUEHERKENNUNG
...................................................................
15
4.1.9
THERAPIE
........................................................................................................
4.2
CISPLATIN
...............................................................................................................
18
4.3
PSEUDOKINASEN
....................................................................................................
18
4.4
DIE
TRIBBLES
PROTEINFAMILIE
...................................................................................
19
4.5
TRIBI
....................................................................................................................
20
4.5.1
REGULATION
DER
TRIB1
EXPRESSION
................................................................
20
4.5.2
ALLOSTERISCHE
MECHANISMEN
.......................................................................
22
4.5.3
REGULATION
DURCH
PHOSPHORYLIERUNG
...........................................................
22
4.5.4
ROLLE
IN
KREBS
...............................................................................................22
4.5.5
KARDIOVASKULAERES
GESCHEHEN
UND
LIPIDMETABOLISMUS
.............................
25
4.5.6
ZELLEN
DES
IMMUNSYSTEMS
.........................................................................
25
5
ZIELE
DER
ARBEIT
..........................................................................................................
28
6
METHODIK
...................................................................................................................
27
6.1
MATERIAL
...............................................................................................................
27
6.1.1
GERAETE
...........................................................................................................
27
6.1.2
MATERIALIEN
...................................................................................................
28
6.1.3
PUFFER,
LOESUNGEN
UND
CHEMIKALIEN
............................................................
29
6.1.4
ENZYME
.........................................................................................................
31
6.1.5
PRIMER
...........................................................................................................
82
6.1.6
KITS
................................................................................................................
33
6.1.7
ANTIKOERPER
.......................................................................................................
33
6.1.8
ZELLLINIEN
.........................................................................................................
33
6.1.9
BAKTERIENSTAEMME
..........................................................................................
33
6.1.10
PLASMIDE
...................................................................................................
34
6.1.11
SOFTWARE
...................................................................................................34
6.2
METHODEN
............................................................................................................
34
6.2.1
NUKLEINSAEUREN
...............................................................................................
34
6.2.2
KLONIERUNG
......................................................................................................
39
6.2.3
GENEXPRESSIONSANALYSEN
.............................................................................
43
6.2.4
PROTEINNACHWEIS
............................................................................................
43
6.2.5
ALLGEMEINE
EUKARYOTISCHE
ZELLKULTUR
..........................................................
48
6.2.6
RETROVIRALE
TRANSDUKTION
..............................................................................
50
6.2.7
FUNKTIONSSCREEN
-
IC50
BESTIMMUNG
.........................................................
54
6.2.8
EINZELZELLKLONE
..............................................................................................
56
6.2.9
INKUBATION
MIT
MG132
..................................................................................
56
6.2.10
STATISTIK
.....................................................................................................
57
7
ERGEBNISSE
.................................................................................................................
57
7.1
GENERIERUNG
VON
TRIBI
UEBEREXPRESSIONS-MODELLSYSTEM
.................................
57
7.1.1
KLONIERUNG
TRIBI
MIT
UTR-SEQUENZEN
.......................................................
57
7.1.2
KLONIERUNG
DES
OFFENEN
LESERAHMENS
VON
TRIBI
.......................................58
7.1.3
TRANSDUKTION
UND
TRANSFEKTION
DER
ZIELZELLEN
...........................................
61
7.1.4
VALIDIERUNG
AUF
RNA-EBENE
........................................................................
63
7.1.5
VALIDIERUNG
AUF
PROTEINEBENE
......................................................................
67
7.1.6
VALIDIERUNG
AUF
DNA
EBENE
........................................................................
73
7.2
EINZELZELLKLONE
....................................................................................................
74
7.3
GENEXPRESSIONSANALYSEN
UNTER
CISPLATIN-BEHANDLUNG
...................................
75
7.4
IC-50
BESTIMMUNG
..............................................................................................
79
7.4.1
MTT-ASSAYS
.................................................................................................
79
7.4.2
COLONY-FORMATION
TEST
UNTER
CISPLATIN
BEHANDLUNG
.................................
82
7.5
REGULATION
AUF
MRNA-EBENE
............................................................................
84
8
DISKUSSION
..................................................................................................................
85
8.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
..................................................................
85
8.2
ERGEBNISSE
..........................................................................................................86
8.2.1
REGULATION
DER
TRIB1
EXPRESSION
................................................................86
8.2.2
FUNKTION
VON
TRIBBLESL
IN
OVARIALKARZINOMEN
..........................................
87
8.2.3
INDUKTION
DES
CMV
PROMOTORS
UNTER
CISPLATIN-BEHANDLUNG
....................
89
8.3
LIMITATIONEN
........................................................................................................
91
2
8.3.1
VALIDIERUNG
DES
UEBEREXPRESSIONS-MODELLSYSTEMS
...................................
91
8.3.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
ZELLLINIEN
IM
VERGLEICH
ZU
HISTOLOGISCHEN
SUBTYPEN
DES
OVARIALKARZINOMS
....................................................
93
8.3.3
HETEROGENITAET
DER
ZELLKULTUR
........................................................................
94
8.4
AUSBLICK
..............................................................................................................
95
9
SCHLUSSFOLGERUNG
........................................................................
95
10
LITERATUR
UND
QUELLENVERZEICHNIS
...........................................................
96
11
ANHANG
...............................................................................
106
11.1
TABELLENVERZEICHNIS
.....................................................................................
106
11.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
..................................................................................
107
11.3
FORMELN
..........................................................................................................
110
11.4
LEBENSLAUF
....................................................................................................
1
1
1
11.5
DANKSAGUNG
...................................................................................................
111
11.6
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
.............................................................................
112
3
|
| adam_txt |
1
INHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
.
1
2
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
3
2.1
SI-EINHEITEN
.
3
2.2
EIGENE
ABKUERZUNGEN
.
3
3
ZUSAMMENFASSUNG
.
6
4
EINLEITUNG
.
8
4.1
OVARIALKARZINOM
.
YY
.
YY
.
8
4.1.1
PRAEVALENZ
UND
MORTALITAET
.
8
4.1.2
HISTOLOGISCHE
SUBTYPEN
.
8
4.1.3
RISIKOFAKTOREN
.
12
4.1.4
PROTEKTIVE
FAKTOREN
.
12
4.1.5
PRAEVENTION
.
12
4.1.6
REZIDIVE
UND
RESISTENZ
.
13
4.1.7
PROGNOSEFAKTOREN
.
14
4.1.8
DIAGNOSTIK
UND
FRUEHERKENNUNG
.
15
4.1.9
THERAPIE
.
4.2
CISPLATIN
.
18
4.3
PSEUDOKINASEN
.
18
4.4
DIE
TRIBBLES
PROTEINFAMILIE
.
19
4.5
TRIBI
.
20
4.5.1
REGULATION
DER
TRIB1
EXPRESSION
.
20
4.5.2
ALLOSTERISCHE
MECHANISMEN
.
22
4.5.3
REGULATION
DURCH
PHOSPHORYLIERUNG
.
22
4.5.4
ROLLE
IN
KREBS
.22
4.5.5
KARDIOVASKULAERES
GESCHEHEN
UND
LIPIDMETABOLISMUS
.
25
4.5.6
ZELLEN
DES
IMMUNSYSTEMS
.
25
5
ZIELE
DER
ARBEIT
.
28
6
METHODIK
.
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6.1
MATERIAL
.
27
6.1.1
GERAETE
.
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6.1.2
MATERIALIEN
.
28
6.1.3
PUFFER,
LOESUNGEN
UND
CHEMIKALIEN
.
29
6.1.4
ENZYME
.
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6.1.5
PRIMER
.
82
6.1.6
KITS
.
33
6.1.7
ANTIKOERPER
.
33
6.1.8
ZELLLINIEN
.
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6.1.9
BAKTERIENSTAEMME
.
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6.1.10
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.
34
6.1.11
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.34
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METHODEN
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34
6.2.1
NUKLEINSAEUREN
.
34
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.
39
6.2.3
GENEXPRESSIONSANALYSEN
.
43
6.2.4
PROTEINNACHWEIS
.
43
6.2.5
ALLGEMEINE
EUKARYOTISCHE
ZELLKULTUR
.
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6.2.6
RETROVIRALE
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.
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6.2.7
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IC50
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.
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6.2.8
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.
56
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INKUBATION
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MG132
.
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6.2.10
STATISTIK
.
57
7
ERGEBNISSE
.
57
7.1
GENERIERUNG
VON
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UEBEREXPRESSIONS-MODELLSYSTEM
.
57
7.1.1
KLONIERUNG
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UTR-SEQUENZEN
.
57
7.1.2
KLONIERUNG
DES
OFFENEN
LESERAHMENS
VON
TRIBI
.58
7.1.3
TRANSDUKTION
UND
TRANSFEKTION
DER
ZIELZELLEN
.
61
7.1.4
VALIDIERUNG
AUF
RNA-EBENE
.
63
7.1.5
VALIDIERUNG
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PROTEINEBENE
.
67
7.1.6
VALIDIERUNG
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DNA
EBENE
.
73
7.2
EINZELZELLKLONE
.
74
7.3
GENEXPRESSIONSANALYSEN
UNTER
CISPLATIN-BEHANDLUNG
.
75
7.4
IC-50
BESTIMMUNG
.
79
7.4.1
MTT-ASSAYS
.
79
7.4.2
COLONY-FORMATION
TEST
UNTER
CISPLATIN
BEHANDLUNG
.
82
7.5
REGULATION
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MRNA-EBENE
.
84
8
DISKUSSION
.
85
8.1
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
.
85
8.2
ERGEBNISSE
.86
8.2.1
REGULATION
DER
TRIB1
EXPRESSION
.86
8.2.2
FUNKTION
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TRIBBLESL
IN
OVARIALKARZINOMEN
.
87
8.2.3
INDUKTION
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CMV
PROMOTORS
UNTER
CISPLATIN-BEHANDLUNG
.
89
8.3
LIMITATIONEN
.
91
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8.3.1
VALIDIERUNG
DES
UEBEREXPRESSIONS-MODELLSYSTEMS
.
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8.3.2
MOLEKULARBIOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
ZELLLINIEN
IM
VERGLEICH
ZU
HISTOLOGISCHEN
SUBTYPEN
DES
OVARIALKARZINOMS
.
93
8.3.3
HETEROGENITAET
DER
ZELLKULTUR
.
94
8.4
AUSBLICK
.
95
9
SCHLUSSFOLGERUNG
.
95
10
LITERATUR
UND
QUELLENVERZEICHNIS
.
96
11
ANHANG
.
106
11.1
TABELLENVERZEICHNIS
.
106
11.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
107
11.3
FORMELN
.
110
11.4
LEBENSLAUF
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1
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11.5
DANKSAGUNG
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11.6
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