Immunhistochemische Charakterisierung der organotypischen Retinakulturen von B6J.Sv129-Rpgr-tm1Stie-Mäusen: neuronale Integrität und DNA-Reparaturproteine
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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2023
|
| Edition: | 1. Auflage |
| Series: | Edition scientifique
|
| Subjects: | |
| Online Access: | Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis |
| Item Description: | Im Titel ist "tm1Stie" hochgestellt |
| Physical Description: | VIII, 131 Seiten Illustrationen 21 cm, 300 g |
| ISBN: | 9783835971325 3835971328 |
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|---|---|
| adam_text |
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
ANATOMISCHE
GRUNDLAGEN
.
1
1.1.1
AUFBAU
DER
NETZHAUT
.
2
1.1.2
PHOTOREZEPTOREN
.
3
1.1.2.1
CONNECTING
CILIUM
.
4
1.1.2.2
PHOTOREZEPTORSYNAPSE
.
4
1.1.2.3
INVERTIERTE
CHROMATINSTRUKTUR
.
6
1.1.3
BIPOLARZELLEN
.
7
1.1.3.1
STAEBCHENBIPOLARZELLEN
.
9
1.1.3.2
ZAPFENBIPOLARZELLEN
.
9
1.1.4
GLIAZELLEN
DER
NETZHAUT
.
10
1.1.4.1
MUELLERZELLEN
UND
ASTROZYTEN
.
10
1.1.4.2
MIKROGLIA
.
11
1.2
RETINITIS
PIGMENTOSA
.
11
1.2.1
X-CHROMOSOMALE
RETINITIS
PIGMENTOSA
.
12
1.3
RETINITIS
PIGMENTOSA
GTPASE
REGULATOR-GM
.
14
1.4
TIERMODELLE
.
15
1.4.1
15
1.4.2
16
1.5
DEGENERATIONSVORGAENGE
DER
NETZHAUT
.
18
1.5.1
DIE
NETZHAUT:
EIN
POSTMITOTISCHES
GEWEBE
.
19
1.5.2
SPROUTING
.
20
1.5.3
GLIOSE
.
20
1.5.4
APOPTOSE
.
21
1.6
GENTHERAPIE
.
22
1.6.1
ARTEN
DER
GENTHERAPIE
.
22
V
1.6.2
DNA-DOPPELSTRANGBRUCHREPARATUR
.
23
1.7
ZIELSETZUNG
.
26
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
27
2.1
VERSUCHSTIERE
.
27
2.2
ORGANOTYPISCHE
RETINAKULTUR
.
27
2.2.1
PRAEPARATION
DER
MAEUSERETINAE
.
27
2.2.2
INKUBATION
.
30
2.2.3
AUFBEREITUNG
DER
ORGANOTYPISCHEN
RETINAKULTUR
FUER
DIE
HERSTELLUNG
VON
GEFRIERSCHNITTEN
.
30
2.2.4
HERSTELLUNG
VON
GEFRIERSCHNITTEN
.
31
2.3
FAERBUNGEN
.
32
2.3.1
IMMUNFLUORESZENZ-FAERBUNGEN
.
32
2.3.1.1
ANTIGEN-RETRIE
VAL
.
33
2.3.1.2
VERDUENNUNGSREIHEN
.
34
2.3.2
TUNEL-ASSAY
.
34
2.4
KONFOKALE
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
.
35
2.4.1
KERNREIHENZAEHLUNG
.
36
2.4.2
BILDBEARBEITUNG
.
38
2.5
CHEMIKALIEN
UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
38
2.5.1
CHEMIKALIEN,
LOESUNGEN,
PUFFER UND
MEDIEN
.
38
2.5.2
ANTIKOERPER
.
40
2.5.3
VERBRAUCHSMATERIALIEN,
GERAETE
UND
SOFTWARE
.44
3
ERGEBNISSE
.
46
3.1
STRUKTURELLE
UND
ZYTOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
DER
NETZHAEUTE
VON
3
UND
9
MONATE
ALTEN
RPGR-KI-MAEUSEN
WAEHREND
DER
RETINAKULTUR
.46
3.1.1
KERNREIHENZAEHLUNG
.
46
VI
3.1.2
TUNEL-ASSAY
.
49
3.1.3
DOPPELFAERBUNG
VON
PKCA
UND
CTBP2
ZUR
DARSTELLUNG
DER
STAEBCHENBIPOLARZELLEN
UND
PHOTOREZEPTORSYNAPSEN
.
52
3.1.4
DOPPELFAERBUNG
VON
GF
AP
UND
GLUTAMIN-SYNTHETASE
ZUR
DARSTELLUNG
DER
MUELLERZELLEN
.
56
3.1.5
EINZELFAERBUNG
VON
IBAL
ZUR
DARSTELLUNG
DER
MIKROGLIA
.
60
3.1.6
EINZELFAERBUNG
VON
CD44
ZUR
DARSTELLUNG
DER
EXTRAZELLULARMATRIX
.
62
3.2
NACHWEIS
VON
DNA-SCHADENSERKENNUNGS
UND
REPARATURPROTEINEN
IN
NETZHAEUTEN
AUS
RETINAKULTUREN
VON
3
UND
9
MONATE
ALTEN
RPGR-KI-MAEUSEN
.
65
3.2.1
ANFAERBUNG
VON
YH2AX
UND
PATM
ZUR
DARSTELLUNG
VON
DNA-DOPPELSTRANGBRUCHDETEKTOREN
.
65
3.2.1.1
EINZELFAERBUNG
VON
YH2AX
.
65
3.2.1.2
EINZELFAERBUNG
VON
PATM
.
69
3.2.2
EINZELFAERBUNG
VON
53BPL
.
72
3.2.3
ANFAERBUNG
VON
DNA-PKCS
UND
KU80
ALS
SCHLUESSELPROTEINE
DES
NHEJ
.
75
3.2.3.1
EINZELFAERBUNG
VON
DNA-PKCS
.
75
3.2.3.2
ANFAERBUNG
VON
KU80
.
78
3.2.4
EINZELFAERBUNG
VON
CTIP
ALS
SCHLUESSELPROTEIN
DES
HDR
.
84
4
DISKUSSION
.
87
4.1
GEGENUEBERSTELLUNG
DER
ORGANOTYPISCHEN
RETINAKULTUR
VON
3
UND
9
MONATE
ALTEN
RPGR-KI-MAEUSEN
.
87
4.1.1
DEGENERATION
DER
PHOTOREZEPTOREN
.
87
4.1.2
VERAENDERUNGEN
DER
RETINALEN
NEURONE
UND
GLIA
.
91
4.1.3
DNA-SCHADENSERKENNUNGS
UND
REPARATURPROTEINE
.
95
4.2
METHODISCHE
LIMITIERUNGEN
.
100
4.3
SCHLUSSFOLGERUNGEN
FUER
ZUKUENFTIGE
THERAPIEKONZEPTE
.
101
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
103
VII
6
SUMMARY
.
104
7
ANHANG
.
105
7.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
105
7.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
109
7.3
TABELLEN
VERZEICHNIS
.
110
7.4
ERGAENZENDE
ABBILDUNGEN
.
111
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
114
PUBLIKATIONSVERZEICHNIS
.
127
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
.
128
DANKSAGUNG
.
129
LEBENSLAUF
.
131
VIII |
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
ANATOMISCHE
GRUNDLAGEN
.
1
1.1.1
AUFBAU
DER
NETZHAUT
.
2
1.1.2
PHOTOREZEPTOREN
.
3
1.1.2.1
CONNECTING
CILIUM
.
4
1.1.2.2
PHOTOREZEPTORSYNAPSE
.
4
1.1.2.3
INVERTIERTE
CHROMATINSTRUKTUR
.
6
1.1.3
BIPOLARZELLEN
.
7
1.1.3.1
STAEBCHENBIPOLARZELLEN
.
9
1.1.3.2
ZAPFENBIPOLARZELLEN
.
9
1.1.4
GLIAZELLEN
DER
NETZHAUT
.
10
1.1.4.1
MUELLERZELLEN
UND
ASTROZYTEN
.
10
1.1.4.2
MIKROGLIA
.
11
1.2
RETINITIS
PIGMENTOSA
.
11
1.2.1
X-CHROMOSOMALE
RETINITIS
PIGMENTOSA
.
12
1.3
RETINITIS
PIGMENTOSA
GTPASE
REGULATOR-GM
.
14
1.4
TIERMODELLE
.
15
1.4.1
15
1.4.2
16
1.5
DEGENERATIONSVORGAENGE
DER
NETZHAUT
.
18
1.5.1
DIE
NETZHAUT:
EIN
POSTMITOTISCHES
GEWEBE
.
19
1.5.2
SPROUTING
.
20
1.5.3
GLIOSE
.
20
1.5.4
APOPTOSE
.
21
1.6
GENTHERAPIE
.
22
1.6.1
ARTEN
DER
GENTHERAPIE
.
22
V
1.6.2
DNA-DOPPELSTRANGBRUCHREPARATUR
.
23
1.7
ZIELSETZUNG
.
26
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
27
2.1
VERSUCHSTIERE
.
27
2.2
ORGANOTYPISCHE
RETINAKULTUR
.
27
2.2.1
PRAEPARATION
DER
MAEUSERETINAE
.
27
2.2.2
INKUBATION
.
30
2.2.3
AUFBEREITUNG
DER
ORGANOTYPISCHEN
RETINAKULTUR
FUER
DIE
HERSTELLUNG
VON
GEFRIERSCHNITTEN
.
30
2.2.4
HERSTELLUNG
VON
GEFRIERSCHNITTEN
.
31
2.3
FAERBUNGEN
.
32
2.3.1
IMMUNFLUORESZENZ-FAERBUNGEN
.
32
2.3.1.1
ANTIGEN-RETRIE
VAL
.
33
2.3.1.2
VERDUENNUNGSREIHEN
.
34
2.3.2
TUNEL-ASSAY
.
34
2.4
KONFOKALE
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
.
35
2.4.1
KERNREIHENZAEHLUNG
.
36
2.4.2
BILDBEARBEITUNG
.
38
2.5
CHEMIKALIEN
UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
38
2.5.1
CHEMIKALIEN,
LOESUNGEN,
PUFFER UND
MEDIEN
.
38
2.5.2
ANTIKOERPER
.
40
2.5.3
VERBRAUCHSMATERIALIEN,
GERAETE
UND
SOFTWARE
.44
3
ERGEBNISSE
.
46
3.1
STRUKTURELLE
UND
ZYTOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
DER
NETZHAEUTE
VON
3
UND
9
MONATE
ALTEN
RPGR-KI-MAEUSEN
WAEHREND
DER
RETINAKULTUR
.46
3.1.1
KERNREIHENZAEHLUNG
.
46
VI
3.1.2
TUNEL-ASSAY
.
49
3.1.3
DOPPELFAERBUNG
VON
PKCA
UND
CTBP2
ZUR
DARSTELLUNG
DER
STAEBCHENBIPOLARZELLEN
UND
PHOTOREZEPTORSYNAPSEN
.
52
3.1.4
DOPPELFAERBUNG
VON
GF
AP
UND
GLUTAMIN-SYNTHETASE
ZUR
DARSTELLUNG
DER
MUELLERZELLEN
.
56
3.1.5
EINZELFAERBUNG
VON
IBAL
ZUR
DARSTELLUNG
DER
MIKROGLIA
.
60
3.1.6
EINZELFAERBUNG
VON
CD44
ZUR
DARSTELLUNG
DER
EXTRAZELLULARMATRIX
.
62
3.2
NACHWEIS
VON
DNA-SCHADENSERKENNUNGS
UND
REPARATURPROTEINEN
IN
NETZHAEUTEN
AUS
RETINAKULTUREN
VON
3
UND
9
MONATE
ALTEN
RPGR-KI-MAEUSEN
.
65
3.2.1
ANFAERBUNG
VON
YH2AX
UND
PATM
ZUR
DARSTELLUNG
VON
DNA-DOPPELSTRANGBRUCHDETEKTOREN
.
65
3.2.1.1
EINZELFAERBUNG
VON
YH2AX
.
65
3.2.1.2
EINZELFAERBUNG
VON
PATM
.
69
3.2.2
EINZELFAERBUNG
VON
53BPL
.
72
3.2.3
ANFAERBUNG
VON
DNA-PKCS
UND
KU80
ALS
SCHLUESSELPROTEINE
DES
NHEJ
.
75
3.2.3.1
EINZELFAERBUNG
VON
DNA-PKCS
.
75
3.2.3.2
ANFAERBUNG
VON
KU80
.
78
3.2.4
EINZELFAERBUNG
VON
CTIP
ALS
SCHLUESSELPROTEIN
DES
HDR
.
84
4
DISKUSSION
.
87
4.1
GEGENUEBERSTELLUNG
DER
ORGANOTYPISCHEN
RETINAKULTUR
VON
3
UND
9
MONATE
ALTEN
RPGR-KI-MAEUSEN
.
87
4.1.1
DEGENERATION
DER
PHOTOREZEPTOREN
.
87
4.1.2
VERAENDERUNGEN
DER
RETINALEN
NEURONE
UND
GLIA
.
91
4.1.3
DNA-SCHADENSERKENNUNGS
UND
REPARATURPROTEINE
.
95
4.2
METHODISCHE
LIMITIERUNGEN
.
100
4.3
SCHLUSSFOLGERUNGEN
FUER
ZUKUENFTIGE
THERAPIEKONZEPTE
.
101
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
103
VII
6
SUMMARY
.
104
7
ANHANG
.
105
7.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
105
7.2
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
109
7.3
TABELLEN
VERZEICHNIS
.
110
7.4
ERGAENZENDE
ABBILDUNGEN
.
111
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
114
PUBLIKATIONSVERZEICHNIS
.
127
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
.
128
DANKSAGUNG
.
129
LEBENSLAUF
.
131
VIII |
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