Der Einfluss von plättchenreichem Plasma und mechanischer Stimulation auf die Chondrogenese in vitro:
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Freiburg im Breisgau
[2020]
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INHALTSVERZEICHNIS
...................................................................................................................................4
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
...........................................................................................................................
7
TABELLENVERZEICHNIS
................................................................................................................................
9
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
........................................................................................................................
10
1
EINLEITUNG
......................................................................................................................................
13
1.1
KLINISCHE
PROBLEMATIK
.............................................................................................................
13
1.1.1
ENTSTEHUNG
VON
OSTEOARTHROSE
(OA)
.................................................................................
15
1.2
HYALINER
GELENKKNORPEL
..........................................................................................................
16
1.3
CHONDROGENESE
IN
VITRO
(TISSUE
ENGINEERING)
.......................................................................
17
1.4
DIE
RELEVANZ
VON
MECHANISCHER
BELASTUNG
..........................................................................
17
1.5
THERAPIE
VON
KNORPELSCHAEDEN
...............................................................................................
19
1.5.1
EINTEILUNG
VON
KNORPELLAESIONEN
.........................................................................................
19
1.5.2
OPERATIVE
VERFAHREN
..........................................................................................................
19
1.5.3
INTRAARTIKULAERE
INJEKTIONEN
..................................................................................................
21
1.5.3.1
GLUKOKORTIKOIDE
.........................................................................................................
21
1.5.3.2
HYALURONAN
...............................................
21
1.5.3.3
PLAETTCHENREICHES
PLASMA
(PRP)
...............................................................................
22
1.5.4
WIRKMECHANISMEN
VON
PLAETTCHENREICHEM
PLASMA
............................................................
23
1.5.4.1
WIRKUNG
VON
PRP
AUF
INFLAMMATION
UND
ANGIOGENESE
............................................
24
1.5.5
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
BETA
(TGF-SS)
.......................................................................
25
1.5.5.1
TGF-SS
UND
MECHANISCHE
BELASTUNG
.........................................................................
27
1.5.5.2
TGF-SS
UND
OA
..........................................................................................................
27
2
ZIEL
UND
FRAGESTELLUNG
................................................................................................................
29
3
MATERIALIEN
UND
METHODEN
...........................................................................................................
30
3.1
EXPERIMENTELLES
DESIGN
.........................................................................................................
30
3.2
HERSTELLUNG
VON
PLAETTCHENREICHEM
PLASMA
UND
PLAETTCHENLYSAT
..............................................
32
3.3
ISOLATION
UND
ZELLKULTUR
VON
HUMANEN
CHONDROZYTEN
............................................................
33
3.4
EINBETTUNG
DER
ZELLEN
IN
POLYURETHAN-SCAFFOLDS
....................................................................
37
3.5
BELASTUNG
IM
BIOREAKTOR
UND
PROZESSIERUNG
DER
PROBEN
...........................................
39
3.6
BIOCHEMISCHE
ANALYSE
(GAG,
DNA
UND
NO)
........................................................................
40
4
3.7
RNA
ISOLATION
UND
QPCR
........................................................................................................
42
3.7.1
RNA
ISOLATION
......................................................................................................................
43
3.7.2
REVERSE
TRANSKRIPTION
........................................................................................................
44
3.7.3
QPCR
....................................................................................................................
44
3.8
TGF-SS1
ENZYME-IINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
......................................................
46
3.9
HISTOLOGIE
................................................................................................................................
47
3.9.1
SAFRANIN-O/FAST
GREEN/HAEMATOXYLIN-FAERBUNG
................................................................47
3.9.2
TOLUIDINBLAU-FAERBUNG
.........................................................................................................48
3.10
STATISTIK
...................................................................................................................................
48
4
ERGEBNISSE
....................................................................................................................................
50
4.1
BIOCHEMISCHE
ANALYSE
(GAG,
DNA
UND
NO)
........................................................................
50
4.2
GENEXPRESSION
.......................................................................................................................
55
4.2.1
CHONDROGENE
MARKER
.........................................................................................................
56
4.2.2
DEDIFFERENZIERUNGS
UND
HYPERTROPHIEMARKER
...................................................................
57
4.2.3
INFLAMMATION
UND
IMMUNMODULATION
..................................................................................
58
4.2.4
TGF-SS
SIGNALTRANSDUKTION
..................................................................................................
60
4.3
TGF-SS1
ENZYME-IINKED
IMMUNOSORBENT ASSAY
(ELISA)
.......................................................
62
4.4
HISTOLOGIE
.......................................................................
64
5
DISKUSSION
....................................................................................................................................
65
5.1
DISKUSSION
DER
METHODIK
.......................................................................................................
65
5.1.1
SPENDER:
CHONDROZYTEN
UND
PRP
.....................................................................................
65
5.1.2
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
....................................................................................................
66
5.1.3
CHONDROGENESE
IN
VITRO
UND
MACT-MODELL
........................................................................
67
5.1.4
BIOCHEMISCHE
ASSAYS
.......................................................................................................
68
5.1.4.1
DNA/GAG
.................................................................................................................
68
5.1.4.2
GRIESS-ASSAY
...............................................................................
68
5.1.4.3
TGF-SS1-ELISA
..........................................................................................................
69
5.1.5
PCR
...................................................................................................................................
70
5.2
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
...................................................................................................
71
5.2.1
CHONDROGENESE
.................................................................................................................
71
5.2.2
DEDIFFERENZIERUNG
UND
HYPERTROPHIE
.................................................................................
72
5.2.3
INFLAMMATION
UND
IMMUNMODULATION
.................................................................................
73
5.2.4
WIRKUNG
VON
TGF-SS
...........................................................................................................
75
5.2.5
FAZIT:
PRP
ALS
ADJUVANS
FUER
DAS
KNORPEL
TISSUE
ENGINEERING
.........................................
78
5.2.6
FAZIT:
KLINISCHER
AUSBLICK
..................................................................................................
79
6
ZUSAMMENFASSUNG
......................................................................................................................
81
5
7
LITERATURVERZEICHNIS
.....................................................................................................................
82
LEBENSLAUF
.............................................................................................................................................
99
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
...................................................................................................................
100
ERKLAERUNG
ZUM
EIGENANTEIL
.................................................................................................................
101
PUBLIKATION
...........................................................................................................................................
102
DANKSAGUNG
........................................................................................................................................
103
6
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.4
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
7
TABELLENVERZEICHNIS
.
9
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
10
1
EINLEITUNG
.
13
1.1
KLINISCHE
PROBLEMATIK
.
13
1.1.1
ENTSTEHUNG
VON
OSTEOARTHROSE
(OA)
.
15
1.2
HYALINER
GELENKKNORPEL
.
16
1.3
CHONDROGENESE
IN
VITRO
(TISSUE
ENGINEERING)
.
17
1.4
DIE
RELEVANZ
VON
MECHANISCHER
BELASTUNG
.
17
1.5
THERAPIE
VON
KNORPELSCHAEDEN
.
19
1.5.1
EINTEILUNG
VON
KNORPELLAESIONEN
.
19
1.5.2
OPERATIVE
VERFAHREN
.
19
1.5.3
INTRAARTIKULAERE
INJEKTIONEN
.
21
1.5.3.1
GLUKOKORTIKOIDE
.
21
1.5.3.2
HYALURONAN
.
21
1.5.3.3
PLAETTCHENREICHES
PLASMA
(PRP)
.
22
1.5.4
WIRKMECHANISMEN
VON
PLAETTCHENREICHEM
PLASMA
.
23
1.5.4.1
WIRKUNG
VON
PRP
AUF
INFLAMMATION
UND
ANGIOGENESE
.
24
1.5.5
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
BETA
(TGF-SS)
.
25
1.5.5.1
TGF-SS
UND
MECHANISCHE
BELASTUNG
.
27
1.5.5.2
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OA
.
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ZIEL
UND
FRAGESTELLUNG
.
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3
MATERIALIEN
UND
METHODEN
.
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3.1
EXPERIMENTELLES
DESIGN
.
30
3.2
HERSTELLUNG
VON
PLAETTCHENREICHEM
PLASMA
UND
PLAETTCHENLYSAT
.
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3.3
ISOLATION
UND
ZELLKULTUR
VON
HUMANEN
CHONDROZYTEN
.
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POLYURETHAN-SCAFFOLDS
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3.5
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BIOREAKTOR
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PROBEN
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TRANSKRIPTION
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ASSAY
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GREEN/HAEMATOXYLIN-FAERBUNG
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.
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4.2.2
DEDIFFERENZIERUNGS
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HYPERTROPHIEMARKER
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4.2.3
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IMMUNMODULATION
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.
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.
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DISKUSSION
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DISKUSSION
DER
METHODIK
.
65
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SPENDER:
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5.1.2
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AUSWERTUNG
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5.1.3
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VITRO
UND
MACT-MODELL
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67
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ERGEBNISSE
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5.2.1
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DEDIFFERENZIERUNG
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HYPERTROPHIE
.
72
5.2.3
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IMMUNMODULATION
.
73
5.2.4
WIRKUNG
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TGF-SS
.
75
5.2.5
FAZIT:
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ADJUVANS
FUER
DAS
KNORPEL
TISSUE
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.
78
5.2.6
FAZIT:
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AUSBLICK
.
79
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ZUSAMMENFASSUNG
.
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5
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LITERATURVERZEICHNIS
.
82
LEBENSLAUF
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ERKLAERUNG
.
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