Die protektive Rolle von Sirt4 in der kardialen Ischämie und Reperfusion:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Freiburg im Breisgau
[2019]
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ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
..............................................................................................................
5
EINLEITUNG
...................................................................................................................................
9
MITOCHONDRIEN
........................................................................................................................
9
KARDIALER
ENERGIESTOFFWECHSEL
...............................................................................................
9
POSTTRANSLATIONALE
MODIFIKATIONEN
.........................................................................................
11
SIRTUINE
.................................................................................................................................
12
SIRTUIN
4
................................................................................................................................
13
MYOKARDIALE
ISCHAEMIE
UND
..................................................................................................
16
MITOCHONDRIALE
PERMEABILITAETS-TRANSITION
............................................................................
19
MITOCHONDRIALER
OXIDATIVER
STRESS
........................................................................................
20
FRAGESTELLUNG
............................................................................................................................
23
MATERIAL
UND
METHODEN
............................................................................................................
24
MATERIAL
................................................................................................................................
24
GERAETE
...............................................................................................................................
24
VERBRAUCHSMATERIALIEN......................................................................................................
25
CHEMIKALIEN
.....................................................................................................................
26
ANTIKOERPER
........................................................................................................................
31
KITSYSTEME
........................................................................................................................
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PRIMER
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METHODEN
..............................................................................................................................
33
UEBERSICHT
..........................................................................................................................
33
VERSUCHSTIERE
UND
TIERHALTUNG
..........................................................................................
35
GENOTYPISIERUNG
...............................................................................................................
36
ANAESTHESIE
UND
HERZENTNAHME
.........................................................................................
38
ERMITTLUNG
VON
KOERPERGEWICHT,
HERZGEWICHT
UND
TIBIALAENGE
.........................................
38
LANGENDORFF-PERFUSION
.....................................................................................................
38
MITOCHONDRIENISOLATION
....................................................................................................
40
PROTEINBESTIMMUNG
MITTELS
BICINCHONINSAEURE-TEST
(BCA-METHODE)
..............................
41
PROTEINBESTIMMUNG
MITTELS
BRADFORD-METHODE
................................................................
42
POLAROGRAPHISCHE
SAUERSTOFFMESSUNG
...............................................................................
43
ADENOSINTRIPHOSPHAT-ASSAY
(ATP-ASSAY)
........................................................................
45
AMPLEX
RED-ASSAY
..........................................................................................................
46
HERSTELLUNG
VON
GANZHERZHOMOGENATEN
..........................................................................
48
WESTERN
BLOT
(WB)
...........................................................................................................
49
IMMUNOPRAEZIPITATION
(IP)
.................................................................................................
51
BESTIMMUNG
DER
LAKTATKONZENTRATION
..............................................................................
53
BESTIMMUNG
DER
LAKTATDEHYDROGENASE-AKTIVITAET.............................................................
54
BESTIMMUNG
VON
THIOBARBITURSAEURE-REAKTIVEN
SUBSTANZEN
(TBARS-ASSAY)
..................
54
RIBONUKLEINSAEURE-ISOLATION
(RNA-ISOLATION)
...................................................................
55
CDNA-SYNTHESE
.................................................................................................................
56
QUANTITATIVE
REAL-TIME
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(QRT-PCR)
....................................
56
BESTIMMUNG
DER
SUPEROXIDDISMUTASE-AKTIVITAET
..............................................................
57
BESTIMMUNG
DER
CALCIUM-RETENTIONSKAPAZITAET
(CRC-ASSAY)
.........................................
58
STATISTIK
..............................................................................................................................
59
ERGEBNISSE
.................................................................................................................................
60
GENOTYPISIERUNG
....................................................................................................................
60
HERZ-,
KOERPERGEWICHT
UND
TIBIALAENGE
IN
SIRT4
7
-
UND
CSIRT4TG-MAEUSEN
.........................
61
MYOKARDIALE
MITOCHONDRIALE
ATMUNGSKAPAZITAET
UND
ATP-SYNTHESERATEN
IN
ISOLIERTEN
KARDIALEN
MITOCHONDRIEN
AUS
SIRT4
7
-
UND
CSIRT4TG-MAEUSEN
NACH
KARDIALER
ISCHAEMIE
UND
...............................................................................................................................................
62
FUNKTION
DER
MITOCHONDRIALEN
PERMEABILITAETSTRANSITIONSPORE
IN
ISOLIERTEN
KARDIALEN
MITOCHONDRIEN
AUS
SIRT4
7
-
UND
CSIRT4TG-MAEUSEN
NACH
KARDIALER
ISCHAEMIE
UND
74
OXIDATIVER
STRESS
IN
HERZEN
AUS
SIRT4
7
-
UND
CSIRT4TG-MAEUSEN
.......................................
78
LAKTAT
UND
LAKTATDEHYDROGENASE
(LDH)-SPIEGEL
IM
REPERFUSAT
VON
HERZEN
AUS
SIRT4
MAEUSEN
NACH
KARDIALER
ISCHAEMIE
89
DISKUSSION
.................................................................................................................................
91
SIRT4
BEEINFLUSST
NICHT
DIE
KARDIALE
MITOCHONDRIALE
ATMUNG
................................................
91
FEHLEN
VON
SIRT4
FUHRT
ZU
DESENSITIVIERUNG
DER
MITOCHONDRIALEN
PERMEABILITAETS
TRANSITIONSPORE
IN
DER
KARDIALEN
I/R
.....................................................................................
93
VERBESSERTE
ABWEHR
VON
OXIDATIVEM
STRESS
NACH
KARDIALER
I/R
IN
HERZEN
VON
SIRT4
MAEUSEN
94
LEICHTGRADIGE
VERMINDERUNG
DER
LAKTATSPIEGEL
UND
DER
LDH-AKTIVITAET
NACH
I/R
IM
REPERFUSAT
VON
HERZEN
AUS
SIRT4
7
-MAEUSEN
.......................................................................
98
EXPERIMENTELLE
LIMITATIONEN
................................................................................................
99
ZUSAMMENFASSUNG
...................................................................................................................
100
LITERATURVERZEICHNIS
.................................................................................................................
101
PUBLIKATIONEN
...........................................................................................................................
112
LEBENSLAUF
.............................................................................................................................
113
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG....................................................................................................
114
ERKLAERUNG
ZUM
EIGENANTEIL
......................................................................................................
115
DANKSAGUNG
.............................................................................................................................
116
ANHANG
....................................................................................................................................
117
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
......................................................................................
117
|
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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UND
TIERHALTUNG
.
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GENOTYPISIERUNG
.
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UND
HERZENTNAHME
.
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UND
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.
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(WB)
.
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IMMUNOPRAEZIPITATION
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.
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LAKTATKONZENTRATION
.
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LAKTATDEHYDROGENASE-AKTIVITAET.
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THIOBARBITURSAEURE-REAKTIVEN
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