Die Rolle der NUDT9H-Domäne bei der Aktivierung von hTRPM2 durch Nukleotide:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Hamburg
2022
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
ARBEITSHYPOTHESE
UND
FRAGESTELLUNG
SEITE
6
2.
EINLEITUNG
SEITE
7
2.1
LONENKANAELE
UND
CA
2+
-SIGNALE
SEITE
7
2.2
TRP-KANAELE
SEITE
8
2.3
DIE
NUDT9H-DOMAENE
SEITE
11
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
SEITE
13
3.1
PCR-BASIERTE
MUTAGENESE
SEITE
13
3.1.1
EXPRESSIONSVEKTOREN
SEITE
13
3.1.2
PRIMER
SEITE
14
3.1.3
TOUCHDOWN-PCR
SEITE
16
3.2
DNS-VERDAU
SEITE
17
3.3
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
SEITE
18
3.4
DNS-AUFREINIGUNG
SEITE
20
3.5
LIGATION
VON
DNS-FRAGMENTEN
SEITE
21
3.6
TRANSFORMATION
VON
E.
COLI
SEITE
21
3.7
PLASMID-DNS-MINIPRAEPARATION
SEITE
22
3.8
DNS-SEQUENZIERUNG
SEITE
23
3.9
PLASMID-DNS-MAXIPRAEPARATION
SEITE
24
3.10
ZELLKULTUR
SEITE
25
3.10.1
HEK-293-ZELLEN
SEITE
25
3.10.2
PASSAGE
VON
HEK-293-ZELLEN
SEITE
25
3.11
TRANSFEKTION
SEITE
26
3.11.1
JETPEI
SEITE
26
3.11.2
LIPOFECTAMIN
SEITE
27
3.12
FLUORESZENZ-MIKROSKOPIE
SEITE
28
3.12.1
TECHNIK
SEITE
28
3.12.2
PROTOKOLLE
SEITE
28
3.13
BIOTINYLIERUNGS-TEST
SEITE
29
3.13.1
BIOTINYLIERUNG
UND
PULLDOWN
SEITE
30
3.13.2
SDS-PAGE
SEITE
31
3.13.3
WESTERN
BLOT
SEITE
32
3.14
PATCH-CLAMP
SEITE
33
3.14.1
TECHNIK
SEITE
33
3.14.2
PIPETTEN
UND
ELEKTRODEN
SEITE
33
3.14.3
GANZZELLABLEITUNG
SEITE
33
3.14.4
MESSPROTOKOLLE
SEITE
34
3.15
AUSWERTUNG
SEITE
35
3.16
SICHERHEIT
SEITE
35
3.17
ENTSORGUNG
SEITE
35
4.
ERGEBNISSE
SEITE
36
4.1
MUTAGENESE
SEITE
36
4.2
CA
2+
-SIGNALE
SEITE
38
4.3
MEMBRANEXPRESSION
SEITE
44
4.4
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
SEITE
48
4
5.
DISKUSSION
SEITE
52
5.1
DIE
ROLLE
DER
NUDT9H-DOMAENE
SEITE
52
5.2
KRYO-EM-STRUKTUREN
SEITE
54
5.3
AUSBLICK
SEITE
58
6.
ZUSAMMENFASSUNG
SEITE
59
7.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
SEITE
60
8.
LITERATURVERZEICHNIS
SEITE
64
9.
ANHANG
SEITE
76
9.1
SEQUENZ
PIRES2-EGFP-NTRPM2
SEITE
76
9.2
SEQUENZIERUNGSERGEBNISSE
SEITE
78
9.2.1
HTRPM2-A1167
SEITE
78
9.2.2
HTRPM2-A1
253
SEITE
81
5
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ARBEITSHYPOTHESE
UND
FRAGESTELLUNG
SEITE
6
2.
EINLEITUNG
SEITE
7
2.1
LONENKANAELE
UND
CA
2+
-SIGNALE
SEITE
7
2.2
TRP-KANAELE
SEITE
8
2.3
DIE
NUDT9H-DOMAENE
SEITE
11
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
SEITE
13
3.1
PCR-BASIERTE
MUTAGENESE
SEITE
13
3.1.1
EXPRESSIONSVEKTOREN
SEITE
13
3.1.2
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14
3.1.3
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SEITE
16
3.2
DNS-VERDAU
SEITE
17
3.3
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
SEITE
18
3.4
DNS-AUFREINIGUNG
SEITE
20
3.5
LIGATION
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DNS-FRAGMENTEN
SEITE
21
3.6
TRANSFORMATION
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E.
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SEITE
21
3.7
PLASMID-DNS-MINIPRAEPARATION
SEITE
22
3.8
DNS-SEQUENZIERUNG
SEITE
23
3.9
PLASMID-DNS-MAXIPRAEPARATION
SEITE
24
3.10
ZELLKULTUR
SEITE
25
3.10.1
HEK-293-ZELLEN
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25
3.10.2
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25
3.11
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26
3.11.1
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26
3.11.2
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SEITE
27
3.12
FLUORESZENZ-MIKROSKOPIE
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3.12.1
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28
3.13
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3.13.1
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SEITE
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SEITE
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3.16
SICHERHEIT
SEITE
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SEITE
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4.
ERGEBNISSE
SEITE
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4.1
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4.2
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2+
-SIGNALE
SEITE
38
4.3
MEMBRANEXPRESSION
SEITE
44
4.4
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
SEITE
48
4
5.
DISKUSSION
SEITE
52
5.1
DIE
ROLLE
DER
NUDT9H-DOMAENE
SEITE
52
5.2
KRYO-EM-STRUKTUREN
SEITE
54
5.3
AUSBLICK
SEITE
58
6.
ZUSAMMENFASSUNG
SEITE
59
7.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
SEITE
60
8.
LITERATURVERZEICHNIS
SEITE
64
9.
ANHANG
SEITE
76
9.1
SEQUENZ
PIRES2-EGFP-NTRPM2
SEITE
76
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