Hepatitis-D-Virusstämme: Interaktion in Koinfektion und spezifisches Interferon-α-Therapieansprechen:
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| Published: |
Hamburg
2021
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
........................................................................................................................
1
1.1
EPIDEMIOLOGIE
UND
GENOTYPEN
...................................................................................
1
1.1.1
HDV-GENOTYPEN
UND
VERBREITUNG
........................................................................
1
1.1.2
HBV-GENOTYPEN
UND
VERBREITUNG
.......................................................................
4
1.2
LIFECYCLE
VON
HDV
UND
HBV
.......................................................................................
5
1.2.1
HDV-REPLIKATION
UND
VIRUSASSEMBLIERUNG
...........................................................
5
1.2.2
HBV-LIFECYCLE
......................................................................................................
8
1.3
REKOMBINATION
UND
EVOLUTION
VON
HDV....................................................................
11
1.4
HDV
IN
DER
KLINIK
......................................................................................................
12
1.4.1
DER
KLINISCHE
VERLAUF
EINER
HDV-INFEKTION
.........................................................
12
1.4.2
HDV
UND
HBV-TRANSMISSION
............................................................................
13
1.4.3
PRAEVENTION
..........................................................................................................
13
1.4.4
DIAGNOSTIK
DER
HDV-INFEKTION.............................................................................
14
1.4.5
THERAPIE
DER
HDV-INFEKTION
...............................................................................
15
1.3
DIE
IMMUNREAKTION
AUF
HDV
.....................................................................................
17
1.4
HDV-MODELLE
............................................................................................................
20
1.4.1
TIERMODELLE
........................................................................................................
20
1.4.2
HUMAN-LEBER-CHIMAERE
MAEUSE
(ENGL.
HUMAN
LIVER
CHIMERIC
MICE)
.....................
22
2.
ARBEITSHYPOTHESEN
UND
FRAGESTELLUNGEN..................................................................
25
2.1
HINTERGRUND...............................................................................................................
25
2.2
ZIELE
..........................................................................................................................
27
3.
METHODEN
UND
MATERIAL
................................................................................................
28
3.1
METHODEN
..................................................................................................................
28
3.1.1
GENERIERUNG
UND
BEHANDLUNG
HUMAN-LEBER-CHIMAEREN
MAEUSEN
.......................
28
3.1.2
ISOLATION
VIRALER
RNA
UND
DNA
AUS
SERUM
UND
LEBERPROBEN
..........................
29
3.1.3
MESSUNG
VIRALER
PARAMETER
...............................................................................
30
3.1.4
MESSUNG
DER
EXPRESSION
VON
HUMANEN
INTERFERON-STIMULIERTEN
GENEN
(ISG)...32
3.1.5
RNA-IN-SITU-HYBRIDISIERUNG
(RNASCOPE)
..........................................................
32
3.1.6
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
.............................................................................
33
3.1.7
STATISTIK
..............................................................................................................
34
3.2
MATERIAL
....................................................................................................................
35
3.2.1
LABORAUSSTATTUNG
...............................................................................................
35
3.2.2
SOFTWARE
............................................................................................................
35
3.2.3
VERBRAUCHSMATERIAL
...........................................................................................
36
III
3.2.4
REAGENZIEN
........................................................................................................
36
3.2.5
PUFFER
UND
LOESUNGEN
..........................................................................................
37
3.2.6
ENZYME...............................................................................................................
37
3.2.7
KITS
.....................................................................................................................
38
3.2.8
ANTIKOERPER
FUER
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
......................................................
38
3.2.9
PRIMER/SONDEN
ZUR
VIRUSQUANTIFIZIERUNG
.....................................................
38
3.2.10
TAQMAN-GENEXPRESSIONSASSAYS
...................................................................
39
3.2.11
RNASCOPE
SONDEN
.......................................................................................
40
4.
ERGEBNISSE
...................................................................................................................
41
4.1
DIE
HDV-1CC/HBV
UND
DIE
HDV-3CC/HBV-KONINFEKTION..........................................
41
4.1.1
DER
ANTEIL
HDV-INFIZIERTER
ZELLEN
VOR
UND
NACH
DER
IFNA-BEHANDLUNG
..............
41
4.1.2
UNTERGANG
HUMANER
LEBERZELLEN
DURCH
DIE
IFNA-BEHANDLUNG?........................
42
4.1.3 INTERFERON-STIMULIERTE
GENE
NACH
DER
INTERFERONBEHANDLUNG
..............................
43
4.2
ETABLIERUNG
NEUER
METHODEN
....................................................................................
46
4.2.1
QRT-PCR-ASSAY
ZUR
MESSUNG
VON
HDV-3CC
....................................................
46
4.2.2
HDV-GENOTYP-SPEZIFISCHE
RNASCOPE-SONDEN
..............................................
47
4.3
DIE
HDV-1CC/HDV-3CC/HBV-LNFEKTION
......................................................................
48
4.3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
HDV-1CC/HDV-3-DOPPELINFEKTION...................................
48
4.3.3
HDV-1CC/HDV-3-DOPPENINFEKTION
AUF
EINZELZELLEBENE
.....................................
51
4.3.4 INTERFERON-ALPHA-THERAPIE
VON
HBV/HDV-1CC/HDV-3CC-INFIZIERTEN
MAEUSEN
.....
51
4.4
SEQUENZIELLE
HDV-SUPERINFEKTIONEN
........................................................................
54
5.
DISKUSSION
...................................................................................................................
61
5.1
DIE
CHRONISCHE
HDV-1CC-LNFEKTION
IST
RESISTENT
GEGEN
PEG-IFNA
.............................
62
5.2
EINE
GEGENSEITIGE
BEEINTRAECHTIGUNG
HEMMT
DIE
GLEICHZEITIGE
REPLIKATION
VON
HDV-1
UND
HDV-3
INNERHALB
EINER
ZELLE
....................................................................................
64
5.3
HDV-DOPPELINFEKTIONEN
ZUR
UNTERSUCHUNG
VON
INTERFERON-ALPHA
RESISTENZMECHANISMEN.................................................................................................
66
5.4
SEQUENZIELLE
SUPERINFEKTION
VON
HDV-1
UND
HDV-3..............................................
68
5.5
LIMITATION
UND
VORTEILE
DER
HUMANEN-LEBER-CHIMAEREN
MAEUSE
.................................
69
5.6
AUSBLICK
....................................................................................................................
70
6.
ZUSAMMENFASSUNG
......................................................................................................
73
7.
BIBLIOGRAFIE
...................................................................................................................
75
8.
DANKSAGUNG
.................................................................................................................
87
9.
LEBENSLAUF....................................................................................................................
88
10.
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
...................................................................................
89
IV
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
EPIDEMIOLOGIE
UND
GENOTYPEN
.
1
1.1.1
HDV-GENOTYPEN
UND
VERBREITUNG
.
1
1.1.2
HBV-GENOTYPEN
UND
VERBREITUNG
.
4
1.2
LIFECYCLE
VON
HDV
UND
HBV
.
5
1.2.1
HDV-REPLIKATION
UND
VIRUSASSEMBLIERUNG
.
5
1.2.2
HBV-LIFECYCLE
.
8
1.3
REKOMBINATION
UND
EVOLUTION
VON
HDV.
11
1.4
HDV
IN
DER
KLINIK
.
12
1.4.1
DER
KLINISCHE
VERLAUF
EINER
HDV-INFEKTION
.
12
1.4.2
HDV
UND
HBV-TRANSMISSION
.
13
1.4.3
PRAEVENTION
.
13
1.4.4
DIAGNOSTIK
DER
HDV-INFEKTION.
14
1.4.5
THERAPIE
DER
HDV-INFEKTION
.
15
1.3
DIE
IMMUNREAKTION
AUF
HDV
.
17
1.4
HDV-MODELLE
.
20
1.4.1
TIERMODELLE
.
20
1.4.2
HUMAN-LEBER-CHIMAERE
MAEUSE
(ENGL.
HUMAN
LIVER
CHIMERIC
MICE)
.
22
2.
ARBEITSHYPOTHESEN
UND
FRAGESTELLUNGEN.
25
2.1
HINTERGRUND.
25
2.2
ZIELE
.
27
3.
METHODEN
UND
MATERIAL
.
28
3.1
METHODEN
.
28
3.1.1
GENERIERUNG
UND
BEHANDLUNG
HUMAN-LEBER-CHIMAEREN
MAEUSEN
.
28
3.1.2
ISOLATION
VIRALER
RNA
UND
DNA
AUS
SERUM
UND
LEBERPROBEN
.
29
3.1.3
MESSUNG
VIRALER
PARAMETER
.
30
3.1.4
MESSUNG
DER
EXPRESSION
VON
HUMANEN
INTERFERON-STIMULIERTEN
GENEN
(ISG).32
3.1.5
RNA-IN-SITU-HYBRIDISIERUNG
(RNASCOPE)
.
32
3.1.6
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
.
33
3.1.7
STATISTIK
.
34
3.2
MATERIAL
.
35
3.2.1
LABORAUSSTATTUNG
.
35
3.2.2
SOFTWARE
.
35
3.2.3
VERBRAUCHSMATERIAL
.
36
III
3.2.4
REAGENZIEN
.
36
3.2.5
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
37
3.2.6
ENZYME.
37
3.2.7
KITS
.
38
3.2.8
ANTIKOERPER
FUER
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
.
38
3.2.9
PRIMER/SONDEN
ZUR
VIRUSQUANTIFIZIERUNG
.
38
3.2.10
TAQMAN-GENEXPRESSIONSASSAYS
.
39
3.2.11
RNASCOPE
SONDEN
.
40
4.
ERGEBNISSE
.
41
4.1
DIE
HDV-1CC/HBV
UND
DIE
HDV-3CC/HBV-KONINFEKTION.
41
4.1.1
DER
ANTEIL
HDV-INFIZIERTER
ZELLEN
VOR
UND
NACH
DER
IFNA-BEHANDLUNG
.
41
4.1.2
UNTERGANG
HUMANER
LEBERZELLEN
DURCH
DIE
IFNA-BEHANDLUNG?.
42
4.1.3 INTERFERON-STIMULIERTE
GENE
NACH
DER
INTERFERONBEHANDLUNG
.
43
4.2
ETABLIERUNG
NEUER
METHODEN
.
46
4.2.1
QRT-PCR-ASSAY
ZUR
MESSUNG
VON
HDV-3CC
.
46
4.2.2
HDV-GENOTYP-SPEZIFISCHE
RNASCOPE-SONDEN
.
47
4.3
DIE
HDV-1CC/HDV-3CC/HBV-LNFEKTION
.
48
4.3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
HDV-1CC/HDV-3-DOPPELINFEKTION.
48
4.3.3
HDV-1CC/HDV-3-DOPPENINFEKTION
AUF
EINZELZELLEBENE
.
51
4.3.4 INTERFERON-ALPHA-THERAPIE
VON
HBV/HDV-1CC/HDV-3CC-INFIZIERTEN
MAEUSEN
.
51
4.4
SEQUENZIELLE
HDV-SUPERINFEKTIONEN
.
54
5.
DISKUSSION
.
61
5.1
DIE
CHRONISCHE
HDV-1CC-LNFEKTION
IST
RESISTENT
GEGEN
PEG-IFNA
.
62
5.2
EINE
GEGENSEITIGE
BEEINTRAECHTIGUNG
HEMMT
DIE
GLEICHZEITIGE
REPLIKATION
VON
HDV-1
UND
HDV-3
INNERHALB
EINER
ZELLE
.
64
5.3
HDV-DOPPELINFEKTIONEN
ZUR
UNTERSUCHUNG
VON
INTERFERON-ALPHA
RESISTENZMECHANISMEN.
66
5.4
SEQUENZIELLE
SUPERINFEKTION
VON
HDV-1
UND
HDV-3.
68
5.5
LIMITATION
UND
VORTEILE
DER
HUMANEN-LEBER-CHIMAEREN
MAEUSE
.
69
5.6
AUSBLICK
.
70
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
73
7.
BIBLIOGRAFIE
.
75
8.
DANKSAGUNG
.
87
9.
LEBENSLAUF.
88
10.
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
.
89
IV |
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