Holdings: Charakteristik der intranasalen Infektion mit neurotropen Bornaviren unter Berücksichtigung antiviraler Interventionsstrategien

Charakteristik der intranasalen Infektion mit neurotropen Bornaviren unter Berücksichtigung antiviraler Interventionsstrategien: Characteristics of intranasal infection with neurotropic Bornaviruses considering strategies of antiviral intervention

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Bibliographic Details
Main Author:	Munsch, Sabrina (Author)
Format:	Thesis Book
Language:	German
Published:	Gießen VVB Laufersweiler Verlag 2021
Edition:	1. Auflage
Series:	Edition Scientifique
Subjects:	Borna disease neurotropic properties antiviral agents antiviral properties nose rats Nase Bornavirus Nasal Ratte BoDV-1 Hochschulschrift
Online Access:	Inhaltsverzeichnis
Physical Description:	III, 246 Seiten Illustrationen, Diagramme 21 cm x 14.8 cm, 250 g
ISBN:	9783835969896 3835969897

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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG ............................................................................................................................. 1 2 LITERATURUEBERSICHT ........................................................................................................ 4 2.1 DAS OLFAKTORISCHE SYSTEM .................................................................................. 4 2.1.1 ANATOMIE UND PHYSIOLOGIE ........................................................................................ 4 2.1.2 INTRANASALE VIRUSINFEKTIONEN DES ZNS UND IHRE MECHANISMEN ............................. 14 2.2 DIE ENDOPROTEASE FURIN ...................................................................................... 15 2.2.1 VORKOMMEN UND FUNKTION ...................................................................................... 15 2.2.2 BEKANNTE FURININHIBITOREN UND IHRE ANWENDUNGSGEBIETE ..................................... 18 2.3 DIE BORNASCHE KRANKHEIT .................................................................................... 30 2.3.1 BORNAVIREN ................................................................................................................ 31 2.3.2 KLINIK .........................................................................................................................44 2.3.3 WIRTSSPEKTRUM, EPIDEMIOLOGIE UND PATHOGENESE ................................................. 46 2.3.4 EXPERIMENTELLE BODV-1-INFEKTION VON RATTEN ........................................................ 55 3 MATERIAL UND METHODEN ............................................................................................. 59 3.1 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS .............................. 59 3.1.1 BESCHICHTUNG DER DECKGLAESCHEN ............................................................................ 59 3.1.2 KULTURBEDINGUNGEN .................................................................................................. 60 3.1.3 PRAEPARATION DER DISSOZIATIONSKULTUR ........................................................................ 60 3.1.4 INHIBITOR-ANWENDUNG AN DER DISSOZIATIONSKULTUR NACH BODV-1-INFEKTION ............ 62 3.1.5 NACHWEIS VIRALER RNA MITTELS QUANTITATIVER REAL TIME RT-PCR ............................. 65 3.2 ROLF B1 .T - KULTUR PERMANENTER ADULTER OLFAKTORISCHER HUELLZELLEN DER RATTE ........................................................................................... 71 3.2.1 KULTUR ........................................................................................................................ 72 3.2.2 INHIBITOR-ANWENDUNG NACH BODV-1-INFEKTION ......................................................... 74 3.2.3 NACHWEIS VIRALER RNA MITTELS QUANTITATIVER REAL TIME RT-PCR ............................. 76 3.3 EXPERIMENTELLE INTRANASALE INHIBITOR-ANWENDUNG BEI BODV-1-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN ....................................................................... 76 3.3.1 INTRANASALE BODV-1-INFEKTION UND INHIBITOR-ANWENDUNG BEI ADULTEN RATTEN ....... 76 3.3.2 PATHOHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER VERSUCHSTIERE ............................................ 81 3.3.3 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER GEWEBE .................................................. 82 3.3.4 NACHWEIS VIRALER UND GENOMISCHER RNA MITTELS QUANTITATIVER REAL TIME RT-PCR IN DER NASE UND IM GEHIRN .......................................................................................... 86 3.4 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG AUF ZELLTOD BEI EXPERIMENTELL INTRANASAL BODV-1 UND MOCK-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN ....................... 88 3.4.1 PROBENMATERIAL ........................................................................................................ 88 3.4.2 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON AKTIVIERTER CASPASE 3 ................................... 88 3.4.3 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON AIF ................................................................ 89 3.4.4 AUSWERTUNG DER DATEN AUS DER IMMUNHISTOLOGISCHEN UNTERSUCHUNG .................. 90 3.4.5 STATISTISCHE ANALYSE DER DATEN AUS DER IMMUNHISTOLOGISCHEN UNTERSUCHUNG .... 90 4 ERGEBNISSE ........................................................................................................................ 91 4.1 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS .............................. 91 4.1.1 INHIBITOR-ANWENDUNG NACH BODV-1-INFEKTION ......................................................... 91 4.1.2 NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER RNA (GRNA) UND MESSENGER RNA (MRNA) ...... 98 4.2 ROLF B1 .T - KULTUR PERMANENTER ADULTER OLFAKTORISCHER HUELLZELLEN DER RATTE ........................................................................................... 99 4.2.1 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON P75 ................................................................99 4.2.2 INFEKTION MIT BODV-1 ............................................................................................. 100 4.2.3 EINFLUSS DER BESCHICHTUNG AUF DAS ZELLWACHSTUM UND DIE INFEKTIONSRATE ......... 102 4.2.4 INHIBITOR-ANWENDUNG NACH BODV-1-INFEKTION ....................................................... 104 4.2.5 NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER UND VIRALER MESSENGER RNA .............................. 106 4.2.6 VERGLEICHENDE STATISTISCHE UNTERSUCHUNG ZUM NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER UND VIRALER MESSENGER RNA IN-VITRO ............................................................... 107 4.3 EXPERIMENTELLE INTRANASALE INHIBITOR-ANWENDUNG BEI BODV-1-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN .................................................................... 109 4.3.1 KLINIK DER VERSUCHSTIERE ......................................................................................... 109 4.3.2 PATHOHISTOLOGISCHE BEFUNDE ................................................................................. 110 4.3.3 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON BODV-1-N .................................................. 111 4.3.4 NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER RNA UND VIRALER MESSENGER RNA IN DER NASE UND IM GEHIRN DER VERSUCHSTIERE ..................................................................... 129 4.4 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG ZUM NACHWEIS DES ZELLTODS BEI EXPERIMENTELL INTRANASAL BODV-1 UND MOCK-INFIZIERTEN LEWIS RATTEN ................................................................................................................ 134 4.4.1 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON AKTIVIERTER CASPASE 3 UND AIF ................... 134 5 DISKUSSION ...................................................................................................................... 137 5.1 WIRKUNG DES FURININHIBITORS MI-0701 AUF DIE BODV-1-INFEKTION IN VITRO ................................................................................................................. 139 5.2 WIRKUNG DES FURININHIBITORS MI-0701 AUF DIE BODV-1-INFEKTION IN-VIVO .............................................................................................................................. 147 5.2.1 VERGLEICHENDE KLINIK UND PATHOHISTOLOGISCHE BEFUNDE VON NASE UND GEHIRN DER VERSUCHSTIERE ......................................................................................................... 148 5.2.2 EFFEKTE DES INHIBITORS MI-0701 AUF DIE INFEKTIONSRATE IM OLFAKTORISCHEN SYSTEM 149 5.2.3 EFFEKTE DES INHIBITORS MI-0701 AUF DIE INFEKTIONSRATE IM GEHIRN ......................... 150 5.2.4 KORRELATION DES NACHWEISES VON BODV-1-N, VIRALER GENOMISCHER RNA UND VIRALER MESSENGER RNA ........................................................................................ 152 5.3 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG ZUM NACHWEIS DES ZELLTODS154 5.3.1 EINFLUSS DER BODV-1-INFEKTION AUF DEN ZELLUNTERGANG IM OLFAKTORISCHEN EPITHEL 155 5.4 VERGLEICHENDE SCHLUSSBETRACHTUNG DER IN-VITRO UND IN-VIVO ERGEBNISSE ............................................................................................................... 155 6 .. ................................................................................................................................................ 158 6.1 ZUSAMMENFASSUNG ....................................................................................................... 158 6.2 SUMMARY ........................................................................................................................ 162 7 LITERATURVERZEICHNIS ................................................................................................. 166 8 ANHANG ............................................................................................................................... 215 8.1 LOESUNGEN UND PUFFER .........................................................................................215 8.1.1 HISTOLOGIE ................................................................................................................215 8.1.2 IMMUNHISTOLOGIE UND IMMUNFLUORESZENZ .............................................................215 8.2 BEZUGSQUELLEN ....................................................................................................... 217 8.3 TABELLEN .................................................................................................................... 221 8.3.1 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS ................................................... 221 8.3.2 ROLF B1 .T - KULTUR PERMANENTER ADULTER OLFAKTORISCHER HUELLZELLEN DER RATTE ................................................................................. 226 II 8.3.3 EXPERIMENTELLE INTRANASALE BODV-1 -INFEKTION UND INTRANASALE INHIBITOR ANWENDUNG AN LEWIS-RATTEN ............................................................................... 228 8.3.4 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG ZUM VORKOMMEN VON ZELLTOD BEI EXPERIMENTELL INTRANASAL BODV-1 UND MOCK-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN ...239 8.4 ABKUERZUNGEN ......................................................................................................... 241 8.5 TABELLENVERZEICHNIS .......................................................................................... 243 8.6 ABBILDUNGSVERZEICHNIS .................................................................................... 244 III
adam_txt	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG . 1 2 LITERATURUEBERSICHT . 4 2.1 DAS OLFAKTORISCHE SYSTEM . 4 2.1.1 ANATOMIE UND PHYSIOLOGIE . 4 2.1.2 INTRANASALE VIRUSINFEKTIONEN DES ZNS UND IHRE MECHANISMEN . 14 2.2 DIE ENDOPROTEASE FURIN . 15 2.2.1 VORKOMMEN UND FUNKTION . 15 2.2.2 BEKANNTE FURININHIBITOREN UND IHRE ANWENDUNGSGEBIETE . 18 2.3 DIE BORNASCHE KRANKHEIT . 30 2.3.1 BORNAVIREN . 31 2.3.2 KLINIK .44 2.3.3 WIRTSSPEKTRUM, EPIDEMIOLOGIE UND PATHOGENESE . 46 2.3.4 EXPERIMENTELLE BODV-1-INFEKTION VON RATTEN . 55 3 MATERIAL UND METHODEN . 59 3.1 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS . 59 3.1.1 BESCHICHTUNG DER DECKGLAESCHEN . 59 3.1.2 KULTURBEDINGUNGEN . 60 3.1.3 PRAEPARATION DER DISSOZIATIONSKULTUR . 60 3.1.4 INHIBITOR-ANWENDUNG AN DER DISSOZIATIONSKULTUR NACH BODV-1-INFEKTION . 62 3.1.5 NACHWEIS VIRALER RNA MITTELS QUANTITATIVER REAL TIME RT-PCR . 65 3.2 ROLF B1 .T - KULTUR PERMANENTER ADULTER OLFAKTORISCHER HUELLZELLEN DER RATTE . 71 3.2.1 KULTUR . 72 3.2.2 INHIBITOR-ANWENDUNG NACH BODV-1-INFEKTION . 74 3.2.3 NACHWEIS VIRALER RNA MITTELS QUANTITATIVER REAL TIME RT-PCR . 76 3.3 EXPERIMENTELLE INTRANASALE INHIBITOR-ANWENDUNG BEI BODV-1-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN . 76 3.3.1 INTRANASALE BODV-1-INFEKTION UND INHIBITOR-ANWENDUNG BEI ADULTEN RATTEN . 76 3.3.2 PATHOHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER VERSUCHSTIERE . 81 3.3.3 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DER GEWEBE . 82 3.3.4 NACHWEIS VIRALER UND GENOMISCHER RNA MITTELS QUANTITATIVER REAL TIME RT-PCR IN DER NASE UND IM GEHIRN . 86 3.4 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG AUF ZELLTOD BEI EXPERIMENTELL INTRANASAL BODV-1 UND MOCK-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN . 88 3.4.1 PROBENMATERIAL . 88 3.4.2 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON AKTIVIERTER CASPASE 3 . 88 3.4.3 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON AIF . 89 3.4.4 AUSWERTUNG DER DATEN AUS DER IMMUNHISTOLOGISCHEN UNTERSUCHUNG . 90 3.4.5 STATISTISCHE ANALYSE DER DATEN AUS DER IMMUNHISTOLOGISCHEN UNTERSUCHUNG . 90 4 ERGEBNISSE . 91 4.1 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS . 91 4.1.1 INHIBITOR-ANWENDUNG NACH BODV-1-INFEKTION . 91 4.1.2 NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER RNA (GRNA) UND MESSENGER RNA (MRNA) . 98 4.2 ROLF B1 .T - KULTUR PERMANENTER ADULTER OLFAKTORISCHER HUELLZELLEN DER RATTE . 99 4.2.1 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON P75 .99 4.2.2 INFEKTION MIT BODV-1 . 100 4.2.3 EINFLUSS DER BESCHICHTUNG AUF DAS ZELLWACHSTUM UND DIE INFEKTIONSRATE . 102 4.2.4 INHIBITOR-ANWENDUNG NACH BODV-1-INFEKTION . 104 4.2.5 NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER UND VIRALER MESSENGER RNA . 106 4.2.6 VERGLEICHENDE STATISTISCHE UNTERSUCHUNG ZUM NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER UND VIRALER MESSENGER RNA IN-VITRO . 107 4.3 EXPERIMENTELLE INTRANASALE INHIBITOR-ANWENDUNG BEI BODV-1-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN . 109 4.3.1 KLINIK DER VERSUCHSTIERE . 109 4.3.2 PATHOHISTOLOGISCHE BEFUNDE . 110 4.3.3 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON BODV-1-N . 111 4.3.4 NACHWEIS VIRALER GENOMISCHER RNA UND VIRALER MESSENGER RNA IN DER NASE UND IM GEHIRN DER VERSUCHSTIERE . 129 4.4 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG ZUM NACHWEIS DES ZELLTODS BEI EXPERIMENTELL INTRANASAL BODV-1 UND MOCK-INFIZIERTEN LEWIS RATTEN . 134 4.4.1 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON AKTIVIERTER CASPASE 3 UND AIF . 134 5 DISKUSSION . 137 5.1 WIRKUNG DES FURININHIBITORS MI-0701 AUF DIE BODV-1-INFEKTION IN VITRO . 139 5.2 WIRKUNG DES FURININHIBITORS MI-0701 AUF DIE BODV-1-INFEKTION IN-VIVO . 147 5.2.1 VERGLEICHENDE KLINIK UND PATHOHISTOLOGISCHE BEFUNDE VON NASE UND GEHIRN DER VERSUCHSTIERE . 148 5.2.2 EFFEKTE DES INHIBITORS MI-0701 AUF DIE INFEKTIONSRATE IM OLFAKTORISCHEN SYSTEM 149 5.2.3 EFFEKTE DES INHIBITORS MI-0701 AUF DIE INFEKTIONSRATE IM GEHIRN . 150 5.2.4 KORRELATION DES NACHWEISES VON BODV-1-N, VIRALER GENOMISCHER RNA UND VIRALER MESSENGER RNA . 152 5.3 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG ZUM NACHWEIS DES ZELLTODS154 5.3.1 EINFLUSS DER BODV-1-INFEKTION AUF DEN ZELLUNTERGANG IM OLFAKTORISCHEN EPITHEL 155 5.4 VERGLEICHENDE SCHLUSSBETRACHTUNG DER IN-VITRO UND IN-VIVO ERGEBNISSE . 155 6 . . 158 6.1 ZUSAMMENFASSUNG . 158 6.2 SUMMARY . 162 7 LITERATURVERZEICHNIS . 166 8 ANHANG . 215 8.1 LOESUNGEN UND PUFFER .215 8.1.1 HISTOLOGIE .215 8.1.2 IMMUNHISTOLOGIE UND IMMUNFLUORESZENZ .215 8.2 BEZUGSQUELLEN . 217 8.3 TABELLEN . 221 8.3.1 DISSOZIATIONSKULTUR DES OLFAKTORISCHEN EPITHELS . 221 8.3.2 ROLF B1 .T - KULTUR PERMANENTER ADULTER OLFAKTORISCHER HUELLZELLEN DER RATTE . 226 II 8.3.3 EXPERIMENTELLE INTRANASALE BODV-1 -INFEKTION UND INTRANASALE INHIBITOR ANWENDUNG AN LEWIS-RATTEN . 228 8.3.4 IMMUNHISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG ZUM VORKOMMEN VON ZELLTOD BEI EXPERIMENTELL INTRANASAL BODV-1 UND MOCK-INFIZIERTEN LEWIS-RATTEN .239 8.4 ABKUERZUNGEN . 241 8.5 TABELLENVERZEICHNIS . 243 8.6 ABBILDUNGSVERZEICHNIS . 244 III
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