Einfluss bakterieller TLR-Liganden auf die Regulation der Genexpression im Angiopoietin/TIE-System:
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| Published: |
Bonn
[2020]
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
......................................................................................................
6
1.
EINLEITUNG
..........................................................................................................................
8
1.1
DAS
VASKULAERE
ENDOTHEL
..................................................................................................
8
1.1.1
AUFBAU
UND
FUNKTION
DES
ENDOTHELS
...........................................................................
8
1.1.2
ENDOTHELIALE
FUNKTIONSSTOERUNGEN
................................................................................
9
1.2
DAS
ANGIOPOIETIN/TLE-SYSTEM
.....................................................................................
11
1.2.1
ANGIOPOIETIN
1
.............................................................................................................
11
1.2.2
ANGIOPOIETIN
2
.............................................................................................................
12
1.2.3
TIE
...............................................................................................................................
15
1.3
ANGEBORENES
IMMUNSYSTEM
&
TOLL-LIKE-REZEPTOREN
................................................
17
1.4
SEPSIS
.............................................................................................................................
19
1.4.1
DEFINITION
DER
SEPSIS
..................................................................................................
19
1.4.2
EPIDEMIOLOGIE
DER
SEPSIS
...........................................................................................20
1.5
SYSTEMISCHE
INFLAMMATION
UND
ANGIOPOIETIN-AKTIVITAET
................................................
22
1.6
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
....................................................................23
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.................................................................................................25
2.1
ZELLKULTUR
........................................................................................................................25
2.1.1
HUMANE
VENOESE
ENDOTHELZELLEN
................................................................................
25
2.1.2
HUMANE
MIKROVASKULAERE
ENDOTHELZELLEN
..................................................................
27
2.1.3
GLATTE
MUSKELZELLEN
....................................................................................................27
2.1.4
THP-1-ZELLEN
...............................................................................................................
28
2.1.5
LEBENDZELLZAHLBESTIMMUNG
MIT
TRYPANBLAU
(LINDL
T
UND
BAUER
J,
1994)
...............29
2.1.6
KRYOKONSERVIERUNG
VON
ZELLEN
...................................................................................29
2.2
VERSUCHSABLAEUFE
........................................................................................................
30
4
2.2.2
STIMULATION
MIT
TLR-LIGANDEN
....................................................................................
30
2.2.3
STIMULATION
DURCH
HYPOXIE
..........................................................................................
31
2.2.4
STIMULATION
MIT
KONDITIONIERTEM
THP-1-MEDIUM
......................................................
31
2.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
................................................................................
32
2.3.1
RNA-ISOLATION
...............................................................................................................
32
2.3.2
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
DER
RNA
........................................................................
33
2.3.3
CDNA-SYNTHESE
...........................................................................................................
33
2.3.4
POLYMERASEKETTENREAKTION,
PCR
................................................................................
34
2.3.5
ENZYM
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
..........................................................
39
2.3.6
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
..............................................................................................40
2.4
MATERIAL
.......................................................................................................................
41
3.
ERGEBNISSE
.......................................................................................................................
47
3.1
NACHWEIS
DER
EXPRESSION
VON
TOLL-LIKE-REZEPTOREN
...................................................
47
3.2
STIMULATION
MIT
PMA
.......................................................................................................
48
3.2
DOSISTITRATION
...................................................................................................................
50
3.3
STIMULATION
VON
HUVECS
...............................................................................................
52
3.3
STIMULATION
VON
MIKROVASKULAEREN
ENDOTHELZELLEN
.....................................................
58
3.3
STIMULATION
VON
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
..............................................................
71
4.
DISKUSSION
.......................................................................................................................
74
4.1
BEWERTUNG
DES
AUSGESUCHTEN
VERSUCHSMODELLS
.........................................................
74
4.2
AUSWAHL
DER
TLR-LIGANDEN
............................................................................................
76
4.3
EINFLUSS
AUF
DIE
GENEXPRESSION
IM
ANG/TLE-SYSTEM
...................................................
77
4.3.1
REGULATION
VON
ANG-1-
&
ANG-2-SPIEGELN
IN
DER
SEPSIS
..........................................
77
4.3.2
PRO-INFLAMMATORISCHE
AKTIVIERUNG
(INTERLEUKIN-EXPRESSION)
.....................................
79
4.3.3
ANGIOPOIETIN/TL
E-SYSTEM
.............................................................................................
80
4.4
SCHLUSSFOLGERUNG
UND
PERSPEKTIVEN
..........................................................................85
5
6.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.................................................................................................
89
7.
TABELLENVERZEICHNIS
......................................................................................................
91
8.
LITERATURVERZEICHNIS
......................................................................................................
92
9.
DANKSAGUNG
..................................................................................................................
109
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
6
1.
EINLEITUNG
.
8
1.1
DAS
VASKULAERE
ENDOTHEL
.
8
1.1.1
AUFBAU
UND
FUNKTION
DES
ENDOTHELS
.
8
1.1.2
ENDOTHELIALE
FUNKTIONSSTOERUNGEN
.
9
1.2
DAS
ANGIOPOIETIN/TLE-SYSTEM
.
11
1.2.1
ANGIOPOIETIN
1
.
11
1.2.2
ANGIOPOIETIN
2
.
12
1.2.3
TIE
.
15
1.3
ANGEBORENES
IMMUNSYSTEM
&
TOLL-LIKE-REZEPTOREN
.
17
1.4
SEPSIS
.
19
1.4.1
DEFINITION
DER
SEPSIS
.
19
1.4.2
EPIDEMIOLOGIE
DER
SEPSIS
.20
1.5
SYSTEMISCHE
INFLAMMATION
UND
ANGIOPOIETIN-AKTIVITAET
.
22
1.6
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.23
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.25
2.1
ZELLKULTUR
.25
2.1.1
HUMANE
VENOESE
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.
25
2.1.2
HUMANE
MIKROVASKULAERE
ENDOTHELZELLEN
.
27
2.1.3
GLATTE
MUSKELZELLEN
.27
2.1.4
THP-1-ZELLEN
.
28
2.1.5
LEBENDZELLZAHLBESTIMMUNG
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TRYPANBLAU
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T
UND
BAUER
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1994)
.29
2.1.6
KRYOKONSERVIERUNG
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ZELLEN
.29
2.2
VERSUCHSABLAEUFE
.
30
4
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STIMULATION
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TLR-LIGANDEN
.
30
2.2.3
STIMULATION
DURCH
HYPOXIE
.
31
2.2.4
STIMULATION
MIT
KONDITIONIERTEM
THP-1-MEDIUM
.
31
2.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE
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.
32
2.3.1
RNA-ISOLATION
.
32
2.3.2
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
DER
RNA
.
33
2.3.3
CDNA-SYNTHESE
.
33
2.3.4
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.
34
2.3.5
ENZYM
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(ELISA)
.
39
2.3.6
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.40
2.4
MATERIAL
.
41
3.
ERGEBNISSE
.
47
3.1
NACHWEIS
DER
EXPRESSION
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TOLL-LIKE-REZEPTOREN
.
47
3.2
STIMULATION
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.
48
3.2
DOSISTITRATION
.
50
3.3
STIMULATION
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HUVECS
.
52
3.3
STIMULATION
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MIKROVASKULAEREN
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.
58
3.3
STIMULATION
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GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
.
71
4.
DISKUSSION
.
74
4.1
BEWERTUNG
DES
AUSGESUCHTEN
VERSUCHSMODELLS
.
74
4.2
AUSWAHL
DER
TLR-LIGANDEN
.
76
4.3
EINFLUSS
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DIE
GENEXPRESSION
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ANG/TLE-SYSTEM
.
77
4.3.1
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ANG-1-
&
ANG-2-SPIEGELN
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DER
SEPSIS
.
77
4.3.2
PRO-INFLAMMATORISCHE
AKTIVIERUNG
(INTERLEUKIN-EXPRESSION)
.
79
4.3.3
ANGIOPOIETIN/TL
E-SYSTEM
.
80
4.4
SCHLUSSFOLGERUNG
UND
PERSPEKTIVEN
.85
5
6.
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
89
7.
TABELLENVERZEICHNIS
.
91
8.
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92
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DANKSAGUNG
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