Knochenregeneration und Gefäßneubildung durch Koimplantation von endothelialen Progenitorzellen aus Peripherblut und mesenchymalen Stammzellen im Kalottenmodell der SCID-Maus:
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|---|---|
| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Freiburg im Breisgau
2020
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1.
ABKUERZUNGS
VERZEICHNIS
.................................................................................................................
1
2.
EINLEITUNG
..............................................................
2
2.1.
KNOCHENDEFEKTE
......................................................................................................................
2
2.1.1.
THERAPIEOPTIONEN
.............................................................................................................
3
2.1.2.
AUTOLOGE
KNOCHENTRANSPLANTATE
.....................................................................................
4
2.1.3.
ALLOGENE
KNOCHENTRANSPLANTATE
......................................................................................
5
2.1.4.
ALLOPLASTISCHER
KNOCHENERSATZ
........................................................................................
6
2.2.
TISSUE
ENGINEERING
..................................................................................................................
6
2.2.1.
BONE
TISSUE
ENGINEERING
.................................................................................................
7
2.2.2.
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
............................................................................................
8
2.3.
ANGIOGENESE
IM
RAHMEN
DER
KNOCHENREGENERATION
............................................................
9
2.4.
GEFAESSNEUBILDUNG
...................................................................................................................
10
2.4.1.
NEOVASKULARISATION
..........................................................................................................
11
2.4.2.
VASKULOGENESE
................................................................................................................
11
2.4.3.
ANGIOGENESE
....................................................................................................................
12
2.5.
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
...............................................................................................
14
2.6.
VASKULARISIERUNGSSTRATEGIEN
ZUR
VERBESSERUNG
DER
KNOCHENREGENERATION
..........................
15
2.6.1.
ANGIOGENE
WACHSTUMSFAKTOREN
....................................................................................
15
2.6.2.
ZELLBASIERTE
STRATEGIEN
...................................................................................................
16
2.6.3.
PRAEVASKULARISIERUNG
........................................................................................................
17
2.7.
ZIELSETZUNG
DIESER
ARBEIT
......................................................................................................
17
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
................................................................................................................
18
3.1.
ISOLIERUNG,
EXPANSION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.............
18
3.1.1.
ISOLATION
DER
ZELLEN
........................................................................................................
18
3.1.2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZELLEN
MITTELS
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
........................................
19
3.1.3.
PERIZYTAERE
VORDIFFERENZIERUNG
.......................................................................................
20
3.2.
ISOLIERUNG,
EXPANSION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
...........
20
3.2.1.
ISOLIERUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.............................................................
20
3.2.2.
AUFNAHME
VON
ACETYLIERTEM
DIL-
LOW
DENSITY
LIPOPROTEIN
.......................................
22
3.3.
HUMANE
UMBILIKALE
ENDOTHELZELLEN
.....................................................................................
22
3.4.
HERSTELLUNG
VON
DREIDIMENSIONALEN
ENDOTHELZELLSPHAEROIDEN
............................................
23
3.5.
BESIEDELUNG
DER
KONSTRUKTE
.................................................................................................
24
I
3.5.1.
TUTOBONE
ALS
SCAFFOLD
....................................................................................................
24
3.5.2.
ABLAUF
DER
BESIEDELUNG
.................................................................................................
24
3.6.
STUDIENDESIGN
.........................................................................................................................
26
3.7.
IMPLANTATION
DER
SCAFFOLDS
IN
DIE
SCID-
MAUS
...................................................................
27
3.8.
FIXIERUNG
UND
REAKTIVIERUNG
DER
KONSTRUKTE
......................................................................
28
3.9.
AUSWERTUNG
DER
NEOVASKULARISATION
....................................................................................
29
3.9.1.
PARAFFINEINBETTUNG
..........................................................................................................
29
3.9.2.
HAEMATOXYLIN-
EOSIN-
FAERBUNG
......................................................................................
30
3.9.3.
IMMUNHISTOCHEMIE
GEGEN
HUMANES
CD
31
..................................................................
30
3.9.4.
IMMUNHISTOCHEMIE
GEGEN
HUMANES
VIMENTIN
..............................................................
31
3.9.5.
AUSWERTUNG
DER
GEFAESSNEUBILDUNG
...............................................................................
32
3.10.
AUSWERTUNG
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
...............................................................................
33
3.10.1.
METHYLMETHACRYLATEINBETTUNG
(MMA)
........................................................................
33
3.10.2.
MINERALISATIONSNACHWEIS
MITTELS
VON
KOSSA-
FAERBUNG
..............................................
34
3.10.3.
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
................................................
35
3.10.4.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
..............................................................................................
35
4.
ERGEBNISSE
.....................................................................................................................................
36
4.1.
ISOLATION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
................................
37
4.1.1.
MORPHOLOGIE
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.........................................................
37
4.1.2.
AUFNAHME
VON
DIL-
LDL
DURCH
DIE
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.......................
37
4.1.3.
OBERFLAECHENPROFIL
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
...............................................
38
4.2.
ISOLATION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
...................................
39
4.2.1.
MORPHOLOGIE
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
...........................................................
39
4.2.2.
OBERFLAECHENPROFIL
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.................................................
40
4.2.3.
PERIZYTAERE
VORDIFFERENZIERUNG
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
..............................
41
4.3.
ERGEBNISSE
ZUR
NEOVASKULARISATION
.....................................................................................
42
4.3.1.
ERGEBNISSE
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
DARSTELLUNG
VON
HCD
31
...........................
42
4.3.2.
ERGEBNISSE
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
DARSTELLUNG
VON
VIMENTIN
.........................
43
4.3.3.
ERGEBNISSE
DER
HAEMATOXYLIN-
FAERBUNG
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
DER
MURINEN
GEFAESSE.
...45
4.3.4.
QUANTIFIZIERUNG
DER
MURINEN
GEFAESSE
...........................................................................
46
4.4.
AUSWERTUNG
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
..................................................................................
46
4.4.1.
ERGEBNISSE
DER
VAN
KOSSA
FAERBUNG
ZUM
NACHWEIS
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
........
47
4.4.2.
QUANTIFIZIERUNG
DER
MINERALISATION
...............................................................................
48
4.5.
SYNOPSIS
DER
ERGEBNISSE
.......................................................................................................
49
5.
DISKUSSION
....................................................................................................................................
50
II
I
5.1.
TIERMODELL
..............................................................................................................................
51
5.2.
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
...............................................................................................
52
5.3.
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
.................................................................................................
54
5.4.
VASKULARISIERUNG
....................................................................................................................
55
5.5.
KNOCHENREGENERATION
...................................
57
6.
ZUSAMMENFASSUNG
........................................................................................................................
59
7.
LITERATUR
.........................................................................................................................................
60
8.
PUBLIKATION
.....................................................................................................................................
71
9.
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
........................................................................................................
72
10.
LEBENSLAUF
..................................................................................................................................
73
11.
DANKSAGUNG
................................................................................................................................
74
III
II
|
| adam_txt |
INHALTSVERZEICHNIS
1.
ABKUERZUNGS
VERZEICHNIS
.
1
2.
EINLEITUNG
.
2
2.1.
KNOCHENDEFEKTE
.
2
2.1.1.
THERAPIEOPTIONEN
.
3
2.1.2.
AUTOLOGE
KNOCHENTRANSPLANTATE
.
4
2.1.3.
ALLOGENE
KNOCHENTRANSPLANTATE
.
5
2.1.4.
ALLOPLASTISCHER
KNOCHENERSATZ
.
6
2.2.
TISSUE
ENGINEERING
.
6
2.2.1.
BONE
TISSUE
ENGINEERING
.
7
2.2.2.
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
.
8
2.3.
ANGIOGENESE
IM
RAHMEN
DER
KNOCHENREGENERATION
.
9
2.4.
GEFAESSNEUBILDUNG
.
10
2.4.1.
NEOVASKULARISATION
.
11
2.4.2.
VASKULOGENESE
.
11
2.4.3.
ANGIOGENESE
.
12
2.5.
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
.
14
2.6.
VASKULARISIERUNGSSTRATEGIEN
ZUR
VERBESSERUNG
DER
KNOCHENREGENERATION
.
15
2.6.1.
ANGIOGENE
WACHSTUMSFAKTOREN
.
15
2.6.2.
ZELLBASIERTE
STRATEGIEN
.
16
2.6.3.
PRAEVASKULARISIERUNG
.
17
2.7.
ZIELSETZUNG
DIESER
ARBEIT
.
17
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
18
3.1.
ISOLIERUNG,
EXPANSION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.
18
3.1.1.
ISOLATION
DER
ZELLEN
.
18
3.1.2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZELLEN
MITTELS
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
19
3.1.3.
PERIZYTAERE
VORDIFFERENZIERUNG
.
20
3.2.
ISOLIERUNG,
EXPANSION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.
20
3.2.1.
ISOLIERUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.
20
3.2.2.
AUFNAHME
VON
ACETYLIERTEM
DIL-
LOW
DENSITY
LIPOPROTEIN
.
22
3.3.
HUMANE
UMBILIKALE
ENDOTHELZELLEN
.
22
3.4.
HERSTELLUNG
VON
DREIDIMENSIONALEN
ENDOTHELZELLSPHAEROIDEN
.
23
3.5.
BESIEDELUNG
DER
KONSTRUKTE
.
24
I
3.5.1.
TUTOBONE
ALS
SCAFFOLD
.
24
3.5.2.
ABLAUF
DER
BESIEDELUNG
.
24
3.6.
STUDIENDESIGN
.
26
3.7.
IMPLANTATION
DER
SCAFFOLDS
IN
DIE
SCID-
MAUS
.
27
3.8.
FIXIERUNG
UND
REAKTIVIERUNG
DER
KONSTRUKTE
.
28
3.9.
AUSWERTUNG
DER
NEOVASKULARISATION
.
29
3.9.1.
PARAFFINEINBETTUNG
.
29
3.9.2.
HAEMATOXYLIN-
EOSIN-
FAERBUNG
.
30
3.9.3.
IMMUNHISTOCHEMIE
GEGEN
HUMANES
CD
31
.
30
3.9.4.
IMMUNHISTOCHEMIE
GEGEN
HUMANES
VIMENTIN
.
31
3.9.5.
AUSWERTUNG
DER
GEFAESSNEUBILDUNG
.
32
3.10.
AUSWERTUNG
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
.
33
3.10.1.
METHYLMETHACRYLATEINBETTUNG
(MMA)
.
33
3.10.2.
MINERALISATIONSNACHWEIS
MITTELS
VON
KOSSA-
FAERBUNG
.
34
3.10.3.
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
.
35
3.10.4.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
35
4.
ERGEBNISSE
.
36
4.1.
ISOLATION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.
37
4.1.1.
MORPHOLOGIE
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.
37
4.1.2.
AUFNAHME
VON
DIL-
LDL
DURCH
DIE
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.
37
4.1.3.
OBERFLAECHENPROFIL
DER
ENDOTHELIALEN
PROGENITORZELLEN
.
38
4.2.
ISOLATION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.
39
4.2.1.
MORPHOLOGIE
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.
39
4.2.2.
OBERFLAECHENPROFIL
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.
40
4.2.3.
PERIZYTAERE
VORDIFFERENZIERUNG
DER
MESENCHYMALEN
STAMMZELLEN
.
41
4.3.
ERGEBNISSE
ZUR
NEOVASKULARISATION
.
42
4.3.1.
ERGEBNISSE
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
DARSTELLUNG
VON
HCD
31
.
42
4.3.2.
ERGEBNISSE
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
DARSTELLUNG
VON
VIMENTIN
.
43
4.3.3.
ERGEBNISSE
DER
HAEMATOXYLIN-
FAERBUNG
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
DER
MURINEN
GEFAESSE.
.45
4.3.4.
QUANTIFIZIERUNG
DER
MURINEN
GEFAESSE
.
46
4.4.
AUSWERTUNG
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
.
46
4.4.1.
ERGEBNISSE
DER
VAN
KOSSA
FAERBUNG
ZUM
NACHWEIS
DER
KNOCHENNEUBILDUNG
.
47
4.4.2.
QUANTIFIZIERUNG
DER
MINERALISATION
.
48
4.5.
SYNOPSIS
DER
ERGEBNISSE
.
49
5.
DISKUSSION
.
50
II
I
5.1.
TIERMODELL
.
51
5.2.
ENDOTHELIALE
PROGENITORZELLEN
.
52
5.3.
MESENCHYMALE
STAMMZELLEN
.
54
5.4.
VASKULARISIERUNG
.
55
5.5.
KNOCHENREGENERATION
.
57
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
59
7.
LITERATUR
.
60
8.
PUBLIKATION
.
71
9.
EIDESSTATTLICHE
VERSICHERUNG
.
72
10.
LEBENSLAUF
.
73
11.
DANKSAGUNG
.
74
III
II |
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