Die neurovaskuläre Einheit bei proliferativer Retinopathie: Interaktionen von Inflammation und Angiogenese
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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Thesis Book |
| Language: | German English |
| Published: |
Gießen
VVB Laufersweiler Verlag
2019
|
| Edition: | 1. Auflage |
| Series: | Edition scientifique
|
| Subjects: | |
| Online Access: | Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis |
| Physical Description: | 92 Seiten Illustrationen, Diagramme 21 cm, 145 g |
| ISBN: | 9783835967946 3835967940 |
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|---|---|
| adam_text | ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.........................................................................................................
1
1.
EINLEITUNG
.......................................................................................................................
4
1.1
DIABETISCHE
RETINOPATHIE
UND
THERAPEUTISCHE
INTERVENTIONEN
....................................
4
1.1.1
KANINE
UND
FELINE
DIABETISCHE
RETINOPATHIE
....................................................................
6
1.2
MOLEKULARE
GRUNDLAGEN
DER
ANGIOGENESE
.....................................................................
6
1.2.1
VASCULAR
ENDOTHELIAL
GROWTH
FACTOR
..............................................................................
6
1.2.2
HYPOXIA-INDUCIBLE
FACTOR
LA
.............................................................................................
8
1.2.3
SEMA3A
...........................................................................................................................
8
1.2.4
ERYTHROPOIETIN
...................................................................................................................
8
1.2.5
ANGIOPOIETIN
1/2
...........................................................................................................
9
1.3
PHYSIOLOGISCHE
ANGIOGENESE
DER
RETINA
.......................................................................
11
1.4
DIE
NEUROVASKULAERE
EINHEIT
DER
ADULTEN
RETINA
..........................................................
13
1.5
EXPERIMENTELLE
MODELLSYSTEME
FUER
DIE
PATHOLOGISCHE
ANGIOGENESE
DER
RETINA
......
15
1.5.1
ANGIOPOIETIN2
(/)
-MODELL
..............................................................................................
15
1.5.2
OXYGEN
INDUCED
RETINOPATHY-MAUSMODELL
.................................................................
15
1.6
UNTERSUCHUNG
DER
NEURONALEN
FUNKTION
......................................................................
18
1.7
ZIELE
DER
DOKTORARBEIT
....................................................................................................
19
1.7.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
FUNKTIONSBEEINTRAECHTIGUNG
DER
RETINA
DURCH
ISCHAEMIE
UND
NEO
VASKULARISATIONEN
..................................................................................................................
19
1.7.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
MODULATION
DER
NEOVASKULARISATIONEN
DURCH
INTRAVITREALE
INJEKTIONEN
..................................................................................................................................
19
2
MATERIAL
UND
METHODEN
...............................................................................................
20
2.1
MAUSMODELLE
.....................................................................................................................
20
2.1.1
ANGIOPOIETIN2
(/)
-MODELL
..............................................................................................
20
2.1.2
OXYGEN
INDUCED
RETINOPATHY-MAUSMODELL
.................................................................
21
2.1.2.1
INTRAVITREALE
PUNKTION/LNJEKTION
IM OIR-MODELL
.................................................................
21
2.2
ZELLKULTUR
..........................................................................................................................
22
2.3
NEOVASKULARISATION
..........................................................................................................
22
2.3.1
PARAFFINSCHNITTE
.............................................................................................................
22
2.3.2
P
AS-FAERBUNG
................................................................................................................
23
2.3.3
ANALYSE
DER
INTRARETINALEN
VASOREGRESSION
UND
GLIAAKTIVIERUNG
.................................
23
2.4
IN
VIVO
UNTERSUCHUNGEN
(RETIMAP)
..........................................................................
24
2.4.1
FLUORESZENZANGIOGRAPHIE
DER
RETINA
.............................................................................
24
2.4.2
OPTISCHE
KOHAERENZTOMOGRAPHIE
...................................................................................
25
2.4.3
MULTIFOKALE
ELEKTRORETINOGRAPHIE
.................................................................................
25
2.5
MIKROGLIA
AKTIVIERUNG.....................................................................................................
26
2.6
IMMUNFLUORESZENZ
FAERBUNGEN
AUF
PARAFFINSCHNITTEN
..................................................
27
2.6.1
GLIAL
FIBRILARY
ACIDIC
PROTEIN
........................................................................................
27
2.6.2
HIF
1
A/ERYTHROPOIETIN
....................................................................................................
28
2.7
GENEXPRESSIONSANALYSEN
..................................................................................................
29
2.7.1
RNA-I
SOLATION
...............................................................................................................
29
2.7.2
REVERSE
TRANSKRIPTION
...................................................................................................
30
2.7.3
PRAEAMPLIFIKATION
............................................................................................................
30
2.7.4
MICROFLUIDIC
CARDS
........................................................................................................
30
2.7.5
CD74
PCR
......................................................................................................................
31
2.8
ANALYSEN
DER
PROTEINBIOSYTHESE
....................................................................................
32
2.8.1
ELISA
...........................................................................................................................
32
2.8.1.1
ERYTHROPOIETIN
...........................................................................................................................
32
2.8.1.2
SEMA3A
..................................................................................................................................
32
2.8.1.3
HIFLA
SUMOYLIERUNG
...........................................................................................................
33
2.8.2
WESTERN
BLOT
..................
34
2.8.2.1
PROTEIN
ISOLIERUNG
.....................................................................................................................
34
2.8.2.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
PROTEINE
...................................................................................................
35
2.8.2.3
GELELEKTROPHORESE
...................................................................................................................
35
2.8.2.4
IMMUNO
BLOT
.............................................................................................................................
35
2.8.2.5
IMMUNODETEKTION
.....................................................................................................................
36
2.9
STATISTIK
.............................................................................................................................
37
3
ERGEBNISSE
......................................................................................................................
38
3.1
FUNKTIONALITAET
DER
NEURORETINA
IN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
........................................
38
3.1.1
CHARAKTERISTIKA
DER
NEOVASKULARISATIONEN
IM
OXYGEN
INDUCED
RETINOPATHY
UND
ANGIOPOIETIN2
(/)
MODELL
............................................................................................................
38
3.1.2
VASKULAERER
PHAENOTYP
UND
INTEGRITAET
DER
BLUT-RETINA-SCHRANKE
..................................
40
3.1.3
INNERE
RETINALE
GEFAESSVERSORGUNG
DER
NEOVASKULAEREN
AREALE
........................................
41
3.1.4
EVALUIERUNG
DER
INTRARETINALEN
FUNKTION
IN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
............................
42
3.1.5
EXPRESSIONSANALYSEN
ANGIOGENESE-ASSOZIIERTER
GENE/PROTEINE
..................................
44
3.1.5.1
DYNAMIK
DER
GENEXPRESSION
...................................................................................................
44
3.1.5.2
VARIABLEN
ABHAENGIGE
HAUPTKOMPONENTEN
ANALYSE
UND
VOLCANO
PLOTS
AN
P25
.................
46
3.1.5.3
EXPRESSION VON
HIF
1
A
UND
ERYTHROPOIETIN
IN
DEN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
.....................
49
3.1.5.4
ERYTHROPOIETIN
EXPRESSION
.......................................................................................................
50
3.1.5.5
GFAP-EXPRESSION
....................................................................................................................
51
3.1.5.6
SUMOYLIERUNG
VON
HIFLA
....................................................................................................
52
3.2 MODULATION
DER
ANGIOGENESE
DURCH
INTRAVITREALE
INJEKTIONEN
..................................
53
3.2.1
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
PATHOLOGISCHE
ANGIOGENESE
..........
53
3.2.2
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
INTRARETINALE
VASOREGRESSION
........
54
3.2.3
MIKROGLIA
.......................................................................................................................
55
3.2.3.1
AUSWIRKUNG
INTRAVITREALER
INJ
EKTION/PUNKTION
AUF
DIE
GESAMTZAHL
DER
MIKROGLIA
..........
55
Z.2.Z.2
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
AKTIVIERUNG
DER
MIKROGLIA
..................
56
3.2.4
MAKROGLIA
......................................................................................................................
57
3.2.4.1
AUSWIRKUNG
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
ASTROZYTEN
............................................
57
3.2.4.2
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
MUELLER
GLIA
..................................................
58
3.2.5
REGULATION
DER
GENEXPRESSION
......................................................................................
59
3.2.6
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
SEMA3A-EXPRESSION
DURCH
MIKROGLIA
.....................................................................................................................................
60
4
DISKUSSION
......................................................................................................................
61
4.1
PRAERETINALE
NEOVASKULARISATIONEN
ERHALTEN
DIE
FUNKTIONALITAET
DER
INNEREN
RETINA
61
4.2
ANALOGIE
DER
GENEXPRESSION
ZUR
DYNAMIK
DER
NEOVASKULARISATIONEN
.....................
62
4.3
VASKULAERER
PHAENOTYP
DES
ANG2
(
/
)
-
UND
OIR-MODELLS
................................................
63
4.4
ERYTHROPOIETIN
ALS
DOMINIERENDER
MODULATOR
DER
NEUROPROTEKTION
IN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
DER
RETINA
..............................................................................................
64
4.5 POSTTRANSLATIONALE
MODIFIKATION
VON
HIFLA
DURCH
SUMOYLIERUNG
.........................
64
4.6 INHIBITION
DER
RETINALEN
ANGIOGENESE
DURCH
INTRAVITREALE
INJEKTIONEN
.....................
65
4.7
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTIONEN
AUF
RETINALE
GLIAZELLEN
.........................................
66
4.8
HOCHREGULATION
VON
SEMA3A
ALS
MECHANISMUS
DER
ANGIOGENESE
INHIBITION
...........
67
4.9
SCHLUSSFOLGERUNG
...............................................................................................................
68
5
ZUSAMMENFASSUNG
.........................................................................................................
69
6
ABSTRACT
..........................................................................................................................
71
7
ANHANG
...........................................................................................................................
73
8
LITERATURVERZEICHNIS
.....................................................................................................
79
9
DANKSAGUNG
...................................................................................................................
91
10
ERKLAERUNG
..................................................................................................................
92
|
| adam_txt |
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
1
1.
EINLEITUNG
.
4
1.1
DIABETISCHE
RETINOPATHIE
UND
THERAPEUTISCHE
INTERVENTIONEN
.
4
1.1.1
KANINE
UND
FELINE
DIABETISCHE
RETINOPATHIE
.
6
1.2
MOLEKULARE
GRUNDLAGEN
DER
ANGIOGENESE
.
6
1.2.1
VASCULAR
ENDOTHELIAL
GROWTH
FACTOR
.
6
1.2.2
HYPOXIA-INDUCIBLE
FACTOR
LA
.
8
1.2.3
SEMA3A
.
8
1.2.4
ERYTHROPOIETIN
.
8
1.2.5
ANGIOPOIETIN
1/2
.
9
1.3
PHYSIOLOGISCHE
ANGIOGENESE
DER
RETINA
.
11
1.4
DIE
NEUROVASKULAERE
EINHEIT
DER
ADULTEN
RETINA
.
13
1.5
EXPERIMENTELLE
MODELLSYSTEME
FUER
DIE
PATHOLOGISCHE
ANGIOGENESE
DER
RETINA
.
15
1.5.1
ANGIOPOIETIN2
(/)
-MODELL
.
15
1.5.2
OXYGEN
INDUCED
RETINOPATHY-MAUSMODELL
.
15
1.6
UNTERSUCHUNG
DER
NEURONALEN
FUNKTION
.
18
1.7
ZIELE
DER
DOKTORARBEIT
.
19
1.7.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
FUNKTIONSBEEINTRAECHTIGUNG
DER
RETINA
DURCH
ISCHAEMIE
UND
NEO
VASKULARISATIONEN
.
19
1.7.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
MODULATION
DER
NEOVASKULARISATIONEN
DURCH
INTRAVITREALE
INJEKTIONEN
.
19
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
20
2.1
MAUSMODELLE
.
20
2.1.1
ANGIOPOIETIN2
(/)
-MODELL
.
20
2.1.2
OXYGEN
INDUCED
RETINOPATHY-MAUSMODELL
.
21
2.1.2.1
INTRAVITREALE
PUNKTION/LNJEKTION
IM OIR-MODELL
.
21
2.2
ZELLKULTUR
.
22
2.3
NEOVASKULARISATION
.
22
2.3.1
PARAFFINSCHNITTE
.
22
2.3.2
P
AS-FAERBUNG
.
23
2.3.3
ANALYSE
DER
INTRARETINALEN
VASOREGRESSION
UND
GLIAAKTIVIERUNG
.
23
2.4
IN
VIVO
UNTERSUCHUNGEN
(RETIMAP)
.
24
2.4.1
FLUORESZENZANGIOGRAPHIE
DER
RETINA
.
24
2.4.2
OPTISCHE
KOHAERENZTOMOGRAPHIE
.
25
2.4.3
MULTIFOKALE
ELEKTRORETINOGRAPHIE
.
25
2.5
MIKROGLIA
AKTIVIERUNG.
26
2.6
IMMUNFLUORESZENZ
FAERBUNGEN
AUF
PARAFFINSCHNITTEN
.
27
2.6.1
GLIAL
FIBRILARY
ACIDIC
PROTEIN
.
27
2.6.2
HIF
1
A/ERYTHROPOIETIN
.
28
2.7
GENEXPRESSIONSANALYSEN
.
29
2.7.1
RNA-I
SOLATION
.
29
2.7.2
REVERSE
TRANSKRIPTION
.
30
2.7.3
PRAEAMPLIFIKATION
.
30
2.7.4
MICROFLUIDIC
CARDS
.
30
2.7.5
CD74
PCR
.
31
2.8
ANALYSEN
DER
PROTEINBIOSYTHESE
.
32
2.8.1
ELISA
.
32
2.8.1.1
ERYTHROPOIETIN
.
32
2.8.1.2
SEMA3A
.
32
2.8.1.3
HIFLA
SUMOYLIERUNG
.
33
2.8.2
WESTERN
BLOT
.
34
2.8.2.1
PROTEIN
ISOLIERUNG
.
34
2.8.2.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
PROTEINE
.
35
2.8.2.3
GELELEKTROPHORESE
.
35
2.8.2.4
IMMUNO
BLOT
.
35
2.8.2.5
IMMUNODETEKTION
.
36
2.9
STATISTIK
.
37
3
ERGEBNISSE
.
38
3.1
FUNKTIONALITAET
DER
NEURORETINA
IN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
.
38
3.1.1
CHARAKTERISTIKA
DER
NEOVASKULARISATIONEN
IM
OXYGEN
INDUCED
RETINOPATHY
UND
ANGIOPOIETIN2
(/)
MODELL
.
38
3.1.2
VASKULAERER
PHAENOTYP
UND
INTEGRITAET
DER
BLUT-RETINA-SCHRANKE
.
40
3.1.3
INNERE
RETINALE
GEFAESSVERSORGUNG
DER
NEOVASKULAEREN
AREALE
.
41
3.1.4
EVALUIERUNG
DER
INTRARETINALEN
FUNKTION
IN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
.
42
3.1.5
EXPRESSIONSANALYSEN
ANGIOGENESE-ASSOZIIERTER
GENE/PROTEINE
.
44
3.1.5.1
DYNAMIK
DER
GENEXPRESSION
.
44
3.1.5.2
VARIABLEN
ABHAENGIGE
HAUPTKOMPONENTEN
ANALYSE
UND
VOLCANO
PLOTS
AN
P25
.
46
3.1.5.3
EXPRESSION VON
HIF
1
A
UND
ERYTHROPOIETIN
IN
DEN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
.
49
3.1.5.4
ERYTHROPOIETIN
EXPRESSION
.
50
3.1.5.5
GFAP-EXPRESSION
.
51
3.1.5.6
SUMOYLIERUNG
VON
HIFLA
.
52
3.2 MODULATION
DER
ANGIOGENESE
DURCH
INTRAVITREALE
INJEKTIONEN
.
53
3.2.1
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
PATHOLOGISCHE
ANGIOGENESE
.
53
3.2.2
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
INTRARETINALE
VASOREGRESSION
.
54
3.2.3
MIKROGLIA
.
55
3.2.3.1
AUSWIRKUNG
INTRAVITREALER
INJ
EKTION/PUNKTION
AUF
DIE
GESAMTZAHL
DER
MIKROGLIA
.
55
Z.2.Z.2
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
AKTIVIERUNG
DER
MIKROGLIA
.
56
3.2.4
MAKROGLIA
.
57
3.2.4.1
AUSWIRKUNG
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
ASTROZYTEN
.
57
3.2.4.2
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
MUELLER
GLIA
.
58
3.2.5
REGULATION
DER
GENEXPRESSION
.
59
3.2.6
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTION/PUNKTION
AUF
DIE
SEMA3A-EXPRESSION
DURCH
MIKROGLIA
.
60
4
DISKUSSION
.
61
4.1
PRAERETINALE
NEOVASKULARISATIONEN
ERHALTEN
DIE
FUNKTIONALITAET
DER
INNEREN
RETINA
61
4.2
ANALOGIE
DER
GENEXPRESSION
ZUR
DYNAMIK
DER
NEOVASKULARISATIONEN
.
62
4.3
VASKULAERER
PHAENOTYP
DES
ANG2
(
/
)
-
UND
OIR-MODELLS
.
63
4.4
ERYTHROPOIETIN
ALS
DOMINIERENDER
MODULATOR
DER
NEUROPROTEKTION
IN
NEOVASKULAEREN
AREALEN
DER
RETINA
.
64
4.5 POSTTRANSLATIONALE
MODIFIKATION
VON
HIFLA
DURCH
SUMOYLIERUNG
.
64
4.6 INHIBITION
DER
RETINALEN
ANGIOGENESE
DURCH
INTRAVITREALE
INJEKTIONEN
.
65
4.7
EINFLUSS
INTRAVITREALER
INJEKTIONEN
AUF
RETINALE
GLIAZELLEN
.
66
4.8
HOCHREGULATION
VON
SEMA3A
ALS
MECHANISMUS
DER
ANGIOGENESE
INHIBITION
.
67
4.9
SCHLUSSFOLGERUNG
.
68
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
69
6
ABSTRACT
.
71
7
ANHANG
.
73
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
79
9
DANKSAGUNG
.
91
10
ERKLAERUNG
.
92 |
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