Auswirkung der Mikrogliahemmung durch Minozyklin und TKP auf die Zytokinbildung im Mausmodell der laserinduzierten choroidalen Neovaskularisation:
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Münster
2019
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1.1
AMD-RELEVANTE
ANATOMIE,
PHYSIOLOGIE
UND
ALTERSABHAENGIGE
VERAENDERUNGEN
DES
AUGES
3
1.1.1
RETINA
4
1.1.1.1
MAKULA
G
1.1.12
RETINALES
PIGMENTEPITHEL
7
1.1.2
CHOROIDEA
UND
BRUCHSCHE
MEMBRAN
7
1.2
MIKROGLIA
G
1.2.1
HERKUNFT
UND
ENTWICKLUNG
9
1.2.2
*RUHENDE
*
MIKROGLIA
9
1.2.3
AKTIVIERTE
MIKROGLIA
10
1.3
ALTERSBEDINGTE
MAKULADEGENERATION
11
1.3.1
EPIDEMIOLOGIE
11
1.3.2
RISIKOFAKTOREN
UND
PRAEVENTION
11
1.3.3
KLASSIFIKATION
12
1.3.4
SYMPTOMATIK
13
1.3.5
PATHOGENESE
DER
NEOVASKULAEREN
AMD
MIT
FOKUS
AUF
DER
MIKROGLIA
..13
1.3.6
DIAGNOSTIK
16
1.3.7
THERAPIE
17
1.4
MAUSMODELL
DER
LASERINDUZIERTEN
CHOROIDALEN
NEOVASKULARISATION
....
17
1.5
HEMMUNG
DER
MIKROGLIA
18
1.5.1
MINOZYKLIN
18
1.5.2
TKP
19
1.6
ZIEL
DER
ARBEIT
20
2
MATERIAL
UND
METHODEN
21
2.1
MATERIAL
21
2.2
VERSUCHSTIERE,
MAUSMODELL
UND
BEHANDLUNG
.....................................
30
2.3
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
..............................................................
33
2.3.1
PARAFFINHISTOLOGIE
................................................................................
33
2.3.1.1
FIXIERUNG,
EINBETTUNG
UND
SCHNEIDEN
VON
PARAFFINPRAEPARATEN............
33
2.3.1.2
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
AN
PARAFFINSCHNITTEN
...............................
34
2.3.2
KRYOHISTOLOGIE
.....................................................................................
35
2.3.2.1
ERSTELLEN,
KONSERVIERUNG
UND
SCHNEIDEN
VON
KRYOPRAEPARATEN
...........
35
2.3.2.2
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
AN
KRYOSCHNITTEN
....................................
36
2.3.3
ANTIKOERPER
...........................................................................................
37
2.3.4
FOTOGRAFIEREN
DER
HISTOLOGISCHEN
SCHNITTE
..........................................
38
2.3.5
VERARBEITUNG
DER
IMMUNFLUORESZENZBILDER
MITTELS
PHOTOSHOP
CS5....
39
2.3.5.1
BILDBEARBEITUNG....................................................................................
39
2.3.5.2
BESTIMMUNG
DER
NORMIERTEN
INTENSITAET
................................................
40
2.3.6
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
DER
IMMUNFLUORESZENZ
................................
43
2.4
REVERSE
TRANSKRIPTASE
-
QUANTITATIVE
POLYMERASEKETTENREAKTION......
44
2.4.1
RELATIVE
QUANTIFIZIERUNG
.....................................................................
46
2.4.2
STATISTISCHE AUSWERTUNG
DER
RT-QPCR
...............................................
47
2.5
ZUORDNUNG
DER
VERSUCHSTIERE
.............................................................
48
3
ERGEBNISSE..........................................................................................
49
3.1
CXCL-1
...............................................................................................
50
3.2
FGF-2
.................................................................................................
52
3.3
IL-6
.....................................................................................................
55
3.4
PDGF-B
..............................................................................................
58
3.5
TGF-SS1
...............................................................................................
61
3.6
VEGF-A
..............................................................................................
64
3.7
UEBERSICHT
DER
IMMUNFLUORESZENZ-ERGEBNISSE.....................................
67
4
DISKUSSION
....................................
68
4.1
KONZEPTION
DES
VERSUCHS
UND
KURZE
VERSUCHSDARSTELLUNG
................
68
4.2
DISKUSSION
DER
METHODE
.....................................................................
69
4.2.1
MAUSMODELL
DER
LASERINDUZIERTEN
CHOROIDALEN
NEOVASKULARISATION
....
69
4.2.2
HEMMUNG
DER
MIKROGLIA
DURCH
MINOZYKLIN
UND
TKP
...........................
70
4.2.3
IMMUNFLUORESZENZ
..............................................................................
73
4.2.4
RT-QPCR
............................................................................................
75
4.3
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
.................................................................
76
4.3.1
CXCL-1
...............................................................................................
76
4.3.2
FGF-2
.................................................................................................
78
4.3.3
IL-6
.....................................................................................................
80
4.3.4
PDGF-B
..............................................................................................
83
4.3.5
TGF-SS1
...............................................................................................
85
4.3.6
VEGF-A
..............................................................................................
88
4.4
SCHLUSSFOLGERUNG
UND
AUSBLICK
...........................................................
91
5
ZUSAMMENFASSUNG
.............................................................................
95
6
LITERATURVERZEICHNIS
............................................................................
96
7
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
......................................................................
142
8
TABELLENVERZEICHNIS
..........................................................................
144
9
DANKSAGUNG
.....................................................................................
146
10
LEBENSLAUF
........................................................................................
147
11
ANHANG
..................................................................................................
I
11.1
ANHANG
ZU
MATERIAL
UND
METHODEN
........................................................
I
11.1.1
ANHANG
ZU
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN...............................................
I
11.1.1.1
ZU
FIXIERUNG,
EINBETTUNG
UND
SCHNEIDEN
VON
PARAFFINPRAEPARATEN
.......
I
11.1.1.2
ZUR
STATISTISCHEN
AUSWERTUNG
DER
IMMUNFLUORESZENZ
...........................
II
11.1.2
ANHANG
ZUR
RT-QPCR
..........................................................................
IV
11.1.2.1
PRAEPARATION
DER
RETINA
UND
EXTRAKTION
DER
RNA
.................................
VI
11.1.2.2
REVERSE
TRANSKRIPTASE-REAKTION
......................................................
VIII
11.1.2.3
PRINZIP
UND
DURCHFUEHRUNG
DER
RT-QPCR
..........................................
VIII
11.2
ANHANG
ZU
DEN
ERGEBNISSEN...............................................................
X
11.2.1
ANHANG
ZU
CXCL-1
..............................................................................
X
11.2.2
ANHANG
ZU
FGF-2
..............................................................................
XII
11.2.3
ANHANG
ZU
IL-6
..................................................................................
XIV
11.2.4
ANHANG
ZU
PDGF-B
...........................................................................
XVI
11.2.5
ANHANG
ZU
TGF-SS1
..........................................................................
XVIII
11.2.6
ANHANG
ZU
VEGF-A
...........................................................................
XX
11.3
TIERVERSUCHSGENEHMIGUNG
...............................................................
XXII
|
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