Der Einfluss von Lithium und Hyperosmolarität auf AQP2 in Hauptzellen des Sammelrohrs:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Münster
2018
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adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 FUNKTION DER NIEREN 1
1.2 AUFBAU DER NIERE UND DIE FUNKTION DER SAMMELROHRZELLEN 2
1.3 DIE ENTDECKUNG UND DER MOLEKULARE AUFBAU VON AQUAPORINEN 4
1.4 VORKOMMEN VON AQUAPORINEN 7
1.5 SIGNALKASKADE ZUM EINBAU VON AQP2 IN DIE ZELLMEMBRAN 8
1.6 DIABETES INSIPIDUS 13
1.6.1 NEPHROGENER DIABETES INSIPIDUS 13
1.6.2 LITHIUM-INDUZIERTER NEPHROGENER DIABETES INSIPIDUS 14
1.7 EINFLUSS VON OSMOLARITAETSAENDERUNGEN AUF DIE AQP2-EXPRESSION 16
1.8 ZIELSETZUNG 17
2 M ATERIAL 19
2.1 GERAETE 19
2.2 LOESUNGEN UND PUFFER 20
2.3 LABORBEDARF UND KITS 21
2.4 ALLGEMEINE CHEMIKALIEN 22
2.5 EUKARYOTISCHE ZELLLINIE 23
2.6 MEDIEN ZUR KULTIVIERUNG EUKARYOTER ZELLEN 23
2.7 PROKARYOTISCHE ZELLLINIE 24
2.8 MEDIEN ZUR KULTIVIERUNG PROKARYOTER ZELLEN 24
2.9 ANTIKOERPER (WESTERN BLOT)
24
2.10 PRIMER ZUR POLYMERASE KETTENREAKTION (PCR)
25
2.11 SEQUENZIERUNGSPRIMER 25
2.12 PLASMIDE 25
3 M ETHODEN 29
3.1 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 29
3.1.1 ISOLATION VON MRNA AUS PRIMAERKULTIVIERTEN IMCD-ZELLEN 29
3.1.2 UMSCHREIBUNG VON RNA IN CDNA 29
3.1.3 SEMIQUANTITATIVE POLYMERASE KETTENREAKTION (PCR) 30
3.1.4 QUANTITATIVE POLYMERASE KETTENREAKTION (REAL-TIME-PCR) 31
3.1.5 KLONIERUNG VON DNA 32
3.1.6 RESTRIKTION VON DNA 32
3.1.7 DNA-GELELEKTROPHORESE 33
3.1.8 SEQUENZIERUNG VON DNA 34
3.2 MIKROBIOLOGISCHE METHODEN 34
3.2.1 AMPLIFIZIERUNG DER
PGL3-
PLASMIDE 34
3.2.2 TRANSFEKTION VON ZELLKULTUREN 35
3.2.3 HERSTELLUNG STABILER EUKARYOTISCHER ZELLLINIEN 36
3.2.4 STIMULIERUNG 36
3.2.5 OSMOLARITAETSERHOEHUNG 36
3.2.6 LUCIFERASE ASSAY 37
3.3 PROTEINBIOCHEMISCHE METHODEN 38
3.3.1 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) 38
3.3.2 WESTERN BLOT 38
3.3.3 STRIPPING DES WESTERN BLOTS
39
3.4 STATISTISCHE AUSWERTUNG 39
4 ERGEBNISSE 40
4.1 DER EINFLUSS VON LITHIUM AUF DIE AQP2-EXPRESSION IN IMCD-ZELLEN 40
4.2 DIE REGULIERUNG DES TRANSKRIPTIONSFAKTORS CREB DURCH DDAVP UND
LITHIUM IN
MPKCCD-ZELLEN 44
4.3 DER EINFLUSS DER HYPEROSMOLARITAET AUF MPKCCD-ZELLEN 47
4.4 DIE INTERAKTION ZWISCHEN LITHIUM UND DEM TRANSKRIPTIONSFAKTOR TONEBP
52
4.5 DIE KARTIERUNG DER TONE-REGION DES AQP2-PROMOTORS IM ZUSAMMENHANG
MIT DER
OSMOLARITAETSERHOEHUNG 54
5 DISKUSSION 56
5.1 DER KONZENTRATIONSABHAENGIGE EINFLUSS VON LITHIUM AUF DIE
AQP2-EXPRESSION 56
5.2 BEDEUTUNG DER ALDOSEREDUKTASE 57
5.3 DIE WIRKUNG VON LITHIUM AUF DEN AQP2-PROMOTOR 58
5.4 EINFLUSS VON LITHIUM AUF DEN PROMOTOR VORSTIMULIERTER MPKCCD-ZELLEN
60
5.5 DER EFFEKT DER HYPEROSMOLARITAET AUF DEN AQP2-STOFFWECHSEL UND DIE
BEDEUTUNG
DER TONE-REGION 62
5.6 OFFENE FRAGEN FUER ZUKUENFTIGE STUDIEN 64
6 LITERATURVERZEICHNIS 66
7 DANKSAGUNG 78
8 LEBENSLAUF
79
9 ANHANG
9.1 ABBILDUNGSVERZEICHNIS
9.2 TABELLENVERZEICHNIS
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