Nestin Expression in glatten Gefäßmuskelzellen und Perizyten des Nebenhodens und der Lunge:
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Gießen, Lahn
VVB Laufersweiler Verlag
2018
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| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS I
ABKUERZUNGEN IV
1 EINLEITUNG 1
1.1. DER STAMMZELLMARKER NESTIN 1
1.1.1. ENTDECKUNG VON NESTIN 1
1.1.2. GENREGULATION VON NESTIN 1
1.1.3. DAS PROTEIN NESTIN 2
1.1.4. NESTIN-EXPRESSION IN VERSCHIEDENEN GEWEBEN 3
1.1.5. NESTIN WAEHREND DER ENTWICKLUNG 3
1.1.6. NESTIN IM ADULTEN 4
1.1.7. NESTIN-EXPRESSION IN DEN GEFAESSWAENDEN 5
1.1.8. NESTIN IN TUMOREN 7
1.1.9. REGULATIONSMECHANISMEN VON NESTIN 8
1.1.10 NESTIN-KNOCKOUT 9
1.2. STAMMZELLEN IN DEN GEFAESSEN 10
1.2.1. PROGENITORZELLEN IN DEN GEFAESSWAENDEN 10
1.2.2. ZIRKULIERENDE PROGENITORZELLEN AUS DEM KNOCHENMARK 12
1.3. ENTWICKLUNG AUFBAU UND FUNKTION DES NEBENHODENS 13
1.3.1. ENTWICKLUNG DES NEBENHODENS 13
1.3.2. AUFBAU UND FUNKTION DES NEBENHODENS 15
1.4. ENTWICKLUNG DER LUNGE 17
1.4.1. EMBRYONALE PHASE 17
1.4.2. POSTNATALE PHASE 18
1.5. PULMONALE HYPERTONIE 19
2. FRAGESTELLUNG UND ZIELSETZUNG 21
3. MATERIALIEN UND METHODEN 22
3.1. MATERIALIEN 22
3.1.1. UNTERSUCHUNGSMATERIALIEN 22
3.1.1.1. NESTIN-GFP MAUS 22
3.1.1.2. POSTNATALE MAEUSE UND RATTEN 22
3.1.1.3. ETHAN-DIMETHAN-SULFONAT (EDS) BEHANDELTE RATTEN 22
3.1.1.4. MCT-UND SU416/HYPOXIE RATTENMODELL 23
3.1.1.5. HUMANE NEBENHODEN 23
3.1.2. ANTIKOERPER 23
3.1.2.1. PRIMAERE ANTIKOERPER FUER IMMUNFLUORESZENZ 23
3.1.2.2. SEKUNDAERE ANTIKOERPER FUER IMMUNFLUORESZENZ 24
3.1.2.3. PRIMAERE ANTIKOERPER FUER IMMUNHISTOCHEMIE 24
3.1.2.4. PRIMAERE ANTIKOERPER FUER WESTERN BLOT 25
3.1.2.5. SEKUNDAERE ANTIKOERPER FUER WESTERN BLOT 26
3.2. METHODEN 27
3.2.1. IMMUNFLUORESZENZ 27
3.2.1.1. REAGENZIEN FUER IMMUNFLUORESZENZ 27
3.2.1.2. DURCHFUEHRUNG DER IMMUNFLUORESZENZ 27
3.2.2. IMMUNHISTOCHEMIE 27
3.2.2.1. REAGENZIEN FUER IMMUNHISTOCHEMIE 27
3.2.2.2. DURCHFUEHRUNG DER IMMUNHISTOCHEMIE 28
3.2.3. PROTEINISOLIERUNG FUER WESTERN BLOT 28
3.2.3.1. REAGENZIEN FUER PROTEINISOLIERUNG 28
3.2.3.2. DURCHFUEHRUNG DER PROTEINISOLIERUNG 28
3.2.4. WESTERN BLOT 29
3.2.4.1. REAGENZIEN FUER WESTERN BLOT 29
3.2.4.2. DURCHFUEHRUNG WESTERN BLOT 30
3.2.5. RNA-ISOLIERUNG UND CDNA-SYNTHESE 31
3.2.6. REAL-TIME-PCR 31
3.2.6.1. REAGENZIEN UND MATERIALIEN 31
3.2.6.2. DURCHFUEHRUNG DER REAL-TIME-PCR 33
3.2.7. CLARITY 33
3.2.7.1. REAGENZIEN UND MATERIALIEN 33
3.2.7.2. DURCHFUEHRUNG CLARITY 33
3.2.8. SIRNA-TRANSFEKTION 34
3.2.9. BESTIMMUNG DER ZELLAKTIVITAET 34
4. ERGEBNISSE 36
4.1. NESTIN-EXPRESSION IM NEBENHODEN 36
4.1.1. NESTIN-GFP-EXPRESSION IN DEN NEBENHODENGEFAESSEN 36
4.1.2. ENDOTHELZELLEN EXPRIMIEREN KEIN NESTIN-GFP 39
4.1.3. NESTIN-GFP IN SMA-POSITIVEN GEFAESSWANDZELLEN 41
4.1.4. NESTIN-GFP-EXPRIMIERENDE ZELLEN MIT PROLIFERATIONSPOTENZIAL 43
4.1.5. NESTIN WAEHREND DER POSTNATALEN ENTWICKLUNG DES NEBENHODENS 45
4.1.6. NESTIN-EXPRESSION IM NEBENHODEN NACH EDS-BEHANDLUNG 48
4.1.7. NESTIN-EXPRESSION IN DEN NEBENHODENGEFAESSEN BEIM MENSCHEN 50
4.2. NESTIN-EXPRESSION IM GEFAESSSYSTEM DER LUNGE 52
4.2.1. CALPONIN-EXPRESSION WAEHREND DER POSTNATALEN ENTWICKLUNG DER LUNGE
52
4.2.2. NESTIN IN DER LUNGE NACH MCT UND SU416/HYPOXIE BEHANDLUNG 55
4.2.3. NESTIN-EXPRESSION BEI PATIENTEN MIT PULMONALER HYPERTONIE 60
4.2.4. ISOLIERTE HUMANE GLATTE GEFAESSMUSKELZELLEN AUS DER LUNGE 62
5. DISKUSSION 67
5.1. NESTIN-EXPRESSION IM NEBENHODEN 68
5.1.1. LOKALISIERUNG DER NESTIN-EXPRESSION IM NEBENHODEN 68
5.1.2. NESTIN UND PROLIFERATION 69
5.1.3. NESTIN WAEHREND DER ENTWICKLUNG DES NEBENHODENS 70
5.1.4. NESTIN NACH EDS-BEHANDLUNG 71
5.1.5. NESTIN IM MENSCHLICHEN NEBENHODEN 72
5.2. NESTIN-EXPRESSION IN DER LUNGE 73
5.2.1. NESTIN-EXPRIMIERENDE PULMONALE GLATTE GEFAESSMUSKELZELLEN 73
5.2.2. NESTIN UND PULMONALE HYPERTONIE 74
5.2.3. EINFLUSS VON NESTIN AUF DIE ZELLPROLIFERATION 75
6. ZUSAMMENFASSUNG 77
7. SUMMARY 79
8. LITERATURVERZEICHNIS 81
9. ERKLAERUNGEN 96
10. PUBLIKATIONEN 97
10.1. ORIGINALARBEITEN 97
10.2. POSTERPRAESENTATIONEN 97
11. DANKSAGUNG 98
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