Charakterisierung der Wirkung clostridialer C3-Toxine auf dendritische Zellen:
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Ulm
[2018]
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
...........................................................................................................
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
..................................................................................................
III
1.
EINLEITUNG
...............................................................................................................
1
1.1.
BAKTERIELLE
TOXINE
...............................................................................................
1
1.2.
DAS
C2-TOXIN
VON
C.
BOTULINUM
.......................................................................
4
1.3.
DIE
C3-EXOENZYME
VON
C.
BOTULINUM
UND
C.
LIMOSUM
....................................
8
1.4.
DAS
REKOMBINANTE
FUSIONSTOXIN
C2IN-C3LIM
............................................
11
1.5.
DENDRITISCHE
ZELLEN
..........................................................................................
13
1.6.
FRAGESTELLUNG
DER
ARBEIT
..................................................................................
15
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
......................................................................................
16
2.1.
MATERIAL
.............................................................................................................
16
2.1.1.
CHEMIKALIEN
UND
SUBSTANZEN
.................................................................
16
2.1.2.
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.............................................................................
18
2.1.3.
GERAETE
.........................................................................................................
19
2.1.4.
VERWENDETE
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.........................................................
20
2.1.8.
BAKTERIELLE
TOXINE
................
....................................................................
24
2.1
.9.
EUKARYOTISCHE
ZELLLINIEN
/
ETHIKVOTUM
....................................................
25
2.1
.LO.SOFTWARE-PROGRAMME
.............................................................................
25
2.2.
STANDARDMETHODEN
..........................................................................................
26
2.2.1.
KULTIVIERUNG
EUKARYOTISCHER
ZELLEN
....................................................
26
2.2.2.
ZYTOTOXIZITAESVERSUCHE
..............................................................................
28
2.2.3.
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
................................................
29
2.2.4.
WESTERN
BLOT-ANALYSE
..............................................................................
30
2.2.5.
STRIPPEN
EINER
NITROCELLULOSEMEMBRAN
...................................................
32
2.2.6
.IN
VITRO
SEQUENZIELLE
ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
ZELLLYSATEN
....................
32
2.2.7.
IMMUNFLUORESZENZMIKROSKOPIE
MIT
U-DCS-ZELLEN
...............................
34
2.2.8.
ERSTELLEN
VON
ABBILDUNGEN
UND
TABELLEN
........................
35
3.
ERGEBNISSE
..........................................................................................................
36
3.1.
ZYTOTOXIZITAETSVERSUCHE
....................................................................................
36
3.1.1.
ZYTOTOXIZITAETSVERSUCHE
MIT
C2IN-C3LIM
+
C2LLA,
C2IN-C3LIM
UND
C3LIM
AUF
J774A.1-
MAKROPHAGEN
.........................................................
36
3.1
.2.
ZYTOTOXIZITAETSVERSUCHE
MIT
C2IN-C3LIM
+
C2LLA,
C2IN-C3LIM
UND
C3BOT1
AUF
U-DCS-ZELLEN
........................................................................
40
3.2.
IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNGEN
VON
U-DCS-ZELLEN
MIT
C3-TOXINEN
..............
42
3.2.1./N
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
U-DCS-ZELLEN
BEHANDELT
MIT
C2IN-C3LIM
+
C2LLA
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
KONZENTRATIONEN
UND
INKUBATIONSZEITEN
......................................................................................
42
3.2.2
.IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
U-DCS-ZELLEN
BEHANDELT
MIT
C2IN-C3LIM
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
KONZENTRATIONEN
UND
INKUBATIONSZEITEN
......................................................................................
44
3.2.3.
IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
U-DCS-ZELLEN
BEHANDELT
MIT
C2IN-C3LIM
UNTER
GLEICHEN
BEDINGUNGEN
.............................................
46
3.2.4
.IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
U-DCS-ZELLEN
BEHANDELT
MIT
C3BOT1
UNTER
GLEICHEN
BEDINGUNGEN
.....................................................
48
3.2.5
.IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
U-DCS-ZELLEN
BEHANDELT
MIT
C2IN-C3LIM
UND
C3BOT1
IM
VERGLEICH
UNTER
GLEICHEN
BEDINGUNGEN..
50
3.2.6.
IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
HELA-ZELLEN
MIT
C2IN-C3LIM
UND
C3BOT1
ZUM
NACHWEIS
EINER
SELEKTIVEN
AUFNAHME
VON
C3-TOXINEN
IN
U-DCS-ZELLEN
........................................................................................
52
3.2.7
.IN
V/YRO-ADP-RIBOSYLIERUNG
VON
U-DCS-ZELLEN
MIT
C2-TOXIN
ZUM
NACHWEIS
EINER
SELEKTIVEN
AUFNAHME
VON
C3-TOXINEN
IN
U-DCS-
ZELLEN
.........................................................................................................
53
3.3.
UNTERSUCHUNG
DER
C3-WIRKUNG
AUF
U-DCS-ZELLEN
MITTELS
IMMUNFLUORESZENZMIKROSKOPIE
.........................................................................
56
4.
DISKUSSION
..........................................................................................................
61
5.
ZUSAMMENFASSUNG
............................................................................................
69
LITERATURVERZEICHNIS
.......................................................................................................
71
ANHANG
..........
.................................................................................................................
79
LEBENSLAUF
......................................................................................................................
82
|
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