Einfluss niedermolekularer Inhibitoren der sauren Sphingomyelinase auf die hepatische Funktion in der polymikrobiellen Sepsis:
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Jena
[2017]
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INHALTSVERZEICHNIS............................................................................................................
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.............................................................................................
III
ZUSAMMENFASSUNG.........................................................................................................-
1 -
1.
EINLEITUNG.....................................................................................................................
- 3 -
1.1. E
PIDEMIOLOGIE
, D
EFINITION
DER
SIRS
UND
S
EPSIS
................................................... - 3 -
1.2. P
ATHOPHYSIOLOGIE
DER
S
EPSIS
.....................................................................................
- 4 -
1.3. A
KUTE
UND
POST
-
AKUTE
HEPATISCHE
D
YSFUNKTION
IN
DER
S
EPSIS
.......................- 7 -
1.4. B
ETEILIGUNG
DER
S
PHINGOMYELINASEN
UND
C
ERAMIDEN
AN
DER
ZELLULAEREN
A
NTWORT
....................................................................................................................................
- 10 -
1.5. S
AURE
S
PHINGOMYELINASE
IN
L
EBERERKRANKUNGEN
UND
S
E P SIS
......................
-14-
1.6. P
HARMAKOLOGISCHE
I
NHIBITION
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
.....................
-16-
2. ZIELE DER ARBEIT UND
HYPOTHESEN..................................................................19
3. MATERIAL UND METHODEN
.......................................................................................
20
3.1. V
ERWENDETE
M
ATERIALIEN
.............................................................................................
20
3.2. V
ERWENDETE
L
OESUNGEN
....................................................................................................21
3.3. V
ERWENDETE
G
ERAETE
UND
S
OFTWARE
...........................................................................
22
3.4. T
IERMODELL
.........................................................................................................................23
3.4.1 V
ERSUCHSTIERE
..................................................................................................................
23
3.4.2 S
EPSISMODELL
.....................................................................................................................
24
3.4.3 N
ARKOSEEINLEITUNG
, B
LUT
-
UND
O
RGANENTNAHME
.....................................................25
3.5. S
TUDIENDESIGN
....................................................................................................................
25
3.6.
UEBERLEBENSANALYSE
.........................................................................................................28
3.7. Z
ELLISOLIERUNG
UND
Z
ELLKULTIVIERUNG
....................................................................28
3.7.1 H
EPATOZYTENISOLIERUNG
AUS
D E R
M
A U S
.......................................................................28
3.7.2 Z
ELLKULTIVIERUNG
UND
V
ERSUCHSDURCHFUEHRUNG
.................................................... 28
3.8. SMPD1 A
KTIVITAETSBESTIMMUNG
....................................................................................29
3.8.1 I
NKUBATION
.........................................................................................................................29
3.8.2 L
IPIDEXTRAKTION
UND
D
UENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
(DC)...................................30
3.9. B
ESTIMMUNG
DER
C
ERAMIDE
IM
M
ASSENSPEKTROMETER
..........................................
31
3.10. B
ESTIMMUNG
DER
OXIDATIVEN
S
TRESS
L
EV EL
............................................................
33
3.10.1 GSH B
ESTIMMUNG
IM
L
EBERGEW EBE
............................................................................
33
3.10.2 GSSG
B
ESTIMMUNG
IM
L
EBERGEWEBE
..........................................................................
33
3.10.3 B
ESTIMMUNG
DES
G
ESAMTGLUTATHION
IM
L
EBERGEW EBE
.........................................
34
3.11. B
ESTIMMUNG
DER
KLINISCHEN
C
HEM IE
........................................................................
34
3.11.1 F
UJI
D
R I
C
HEM
3500I........................................................................................................34
3.11.2 L
AKTATDEHYDROGENASE
A
SSA Y
....................................................................................35
3.12. H
ISTOLOGISCHE
F
AERBUNG
...............................................................................................35
3.13. Q
UANTITATIVE
R
EAL
-T
IME
PC R
....................................................................................36
3.13.1 RNA I
SOLATION
................................................................................................................
36
3.13.2 B
ESTIMMUNG
DER
RNA K
ONZENTRATION
................................................................ 37
3.13.3 RNA Q
UALITAETSKONTROLLE
...........................................................................................
37
3.13.4 R
EVERSE
T
RANSKRIPTASE
................................................................................................
37
3.13.5 Q
UANTITATIVE
R
EAL
T
IME
PCR......................................................................................38
3.14. S
TATISTISCHE
A
NALYSE
UND
E
RGEBNISPRAESENTATION
..............................................39
4.
ERGEBNISSE...........................................................................................................................41
4.1. UE
BERLEBENSANALYSE
DER
SMPD1
GENETISCH
ODER
PHARMAKOLOGISCH
INHIBIERTEN VERSUCHSTIERE NACH INDUKTION EINER POLYMIKROBIELLEN SEPSIS
........
41
4.2. A
KTIVITAETSMESSUNG
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
IM
S
ERUM
IN
DER
AKUTEN
UND POST-AKUTEN PHASE DER
SEPSIS.........................................................................................42
4.3. E
INFLUSS
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
AUF
DEN
C
ERAMIDGEHALT
DER
L
EBER
WAEHREND DER
WIRTSREAKTION.................................................................................................
45
4.4. P
ARTIELL
GENETISCHE
UND
PHARMAKOLOGISCHE
I
NHIBITION
DER
SMPD1
VERMINDERT DIE PRO-INFLAMMATORISCHE ANTWORT DER LEBER IN DER
POLYMIKROBIELLEN
SEPSIS..........................................................................................................47
4.5. E
INFLUSS
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
AUF
DEN
OXIDATIVEN
S
TRESS
IN
DER
L
EBER
...............................................................................................................................................
52
4.6. E
INFLUSS
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
AUF
DIE
C
HOLESTASE
IN
DER
L
EBER
WAEHREND DER
WIRTSREAKTION.................................................................................................
55
4.7. E
INFLUSS
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
IN
DER
F
IBROSIERUNG
DER
L
EBER
ALS
L
ANGZEITFOLGE
DER
S
EPSIS
........................................................................................................59
4.8. E
INFLUSS
DER
SAUREN
S
PHINGOMYELINASE
AUF
DIE
T
RANSDIFFERENZIERUNG
HEPATISCHER STERNZELLEN UND DIE PRODUKTION VON EXTRAZELLULAERMATRIX
...........
61
5.
DISKUSSION..........................................................................................................................65
5.1. K
LINISCHER
H
INTERGRUND
UND
T
IERMODELL
...............................................................66
5.2. S
AURE
S
PHINGOMYELINASE
A
KTIVITAET
IN
DER
W
IRTSREAKTION
...............................
69
5.3. D
IE
SAURE
S
PHINGOMYELINASE
UND
S
EPSIS
-
ASSOZIIERTE
L
EBERDYSFUNKTION
......
72
5.4. R
ESOLUTION
DER
S
EPSIS
-
ASSOZIIERTEN
L
EBERDYSFUNKTION
UND
F
IBROSE
.............
77
6.
SCHLUSSFOLGERUNG........................................................................................................81
7. LITERATURVERZEICHNIS
............................................................
.
................................
83
8.
ANHANG...................................................................................................................................
92
8.1. D
ATENANHANG
....................................................................................................................
92
8.2. D
ANKSAGUNG
........................................................................................................................94
8.3. E
HRENWOERTLICHE
E
RKLAERUNG
.......................................................................................95
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