Women and work in premodern Europe: experiences, relationships and cultural representation, c. 1100-1800
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| adam_text | IDENTITAET UND FUNKTION VON IONENKANAELEN
IN KOERNERZELLEN DES GYRUS DENTATUS
VON MAEUSEN UND PATIENTEN
MIT TEMPORALLAPPENEPILEPSIE
NUR BESCHRAENKT FUER
DEN AUSTAUSCH
DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES
DER FAKULTAET FUER BIOLOGIE DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET
FREIBURG IM BREISGAU
VORGELEGT IM APRIL 2014
VON
FLORIAN N. KIRCHHEIM
HTTP://D-NB.INFO/1055854495
IV. INHALTSVERZEICHNIS
I. ERKLAERUNG NACH PROMOTIONSORDNUNG §11 III
II. DANKSAGUNG IV
III. PUBLIKATIONEN VI
V. ABBILDUNGEN, TABELLEN UND FORMELN XI
VI. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS XIV
VII. ZUSAMMENFASSUNG XVII
VIII. ABSTRACT XVIII
1 EINLEITUNG 1
1.1 UEBER DIE EPILEPSIE 1
1.1.1 DEFINITION DER EPILEPSIE 1
1.1.2 MESIALE T EMPORALLAPPENEPILEPSIE 2
1.2 DIE HIPPOCAMPUSFORMATION 4
1.2.1 ANATOMIE DES HIPPOCAMPUS 4
1.2.2 FUNKTION DER HIPPOCAMPUSFORMATION 7
1.2.3 FUNKTION VON GYRUS DENTATUS UND KOERNERZELLEN 8
1.3 THEORIEN ZUR ENTSTEHUNG EPILEPTISCHER ANFAELLE IM HIPPOCAMPUS 10
1.4 TIERMODELLE DER EPILEPSIE 11
1.5 IONENKANAELE 13
1.5.1 KALIUMKANAELE 14
1.5.1.1 SPANNUNGSGESTEUERTE KALIUMKANAELE 17
1.5.1.2 DIE KVL-KALIUMKANALFAMILIE 18
1.5.2 HYPERPOLARISATIONS-AKTIVIERTE-ZYKLISCHE-NUCLEOTID
-GESTEUERTE-KANAELE 21
1.6 ZIELE DER ARBEIT 22
VII
2 MATERIAL UND METHODEN .. 23
2.1 PATIENTEN 23
2.2 VERSUCHSTIERE UND KAINATINJEKTION 26
2.3 HERSTELLUNG AKUTER HIRNSCHNITTE 27
2.3.1 HIRNPRAEPARATION IM VERSUCHSTIER 27
2.3.2 HUMANRESEKTATE 28
2.4 PATCH-CLAMP-TECHNIK 29
2.4.1 VERSUCHSAUFBAU 29
2.4.2 VERSUCHSDURCHFUEHRUNG 31
2.4.3 SYNAPTISCHE STIMULATION IN DER MAUS 33
2.4.4 ARTIFIZIELLE AEPSPS IN MENSCHLICHEM GEWEBE 33
2.4.5 MEMBRANRESONANZMESSUNG AN MENSCHLICHEN KOERNERZELLEN 34
2.5 PHARMAKOLOGIE 34
2.6 IMMUNHISTOCHEMIE 35
2.6.1 MORPHOLOGISCHE ZELLREKONSTRUKTION 35
2.6.2 IMMUNFLUORESZENZNACHWEIS VON KV 1.1 36
2.6.3 IMMUNOPEROXIDASETECHNIKEN 36
2.7 ORGANOTYPISCHE HIPPOCAMPALE SCHNITTKULTUREN 37
2.8 QUANTITATIVE EINZELZELL-POLYMERASE KETTENREAKTION 38
2.8.1 VERWENDETE PRIMER 39
2.8.2 OPTIMIERUNG DER PRIMER 39
2.8.3 VERSUCHSVORBEREITUNGEN FUER PCR 44
2.8.4 ISOLATION VOLLSTAENDIGER GYRI DENTATI FUER DIE QPCR 45
2.8.5 GEWINNUNG VON KOERNERZELLEN FUER DIE QPCR 46
2.8.6 GEWINNUNG EINZELNER CYTOPLASMATA VON KOERNERZELLEN NACH
ELEKTROPHYSIOLOGISCHER MESSUNG 47
2.8.7 REVERSE TRANSKRIPTION 48
2.8.8 DETEKTION 49
2.9 DATENAUSWERTUNG 51
2.9.1 DATENAUSWERTUNG ELEKTROPHYSIOLOGIE 51
2.9.2 DATENAUSWERTUNG IMMUNFLUORESZENZTECHNIKEN 53
2.9.3 DATENAUSWERTUNG QPCR 54
2.9.4 STATISTIK 54
VIII
ERGEBNISSE 56
3.1 ERSTES HAUPTKAPITEL: SENKUNG DER ZELLULAEREN ERREGBARKEIT IM
TLE-MODELL DURCH
KV 1.1-KANAELE IM GYRUS DENTATUS DER MAUS 56
3.111 ALLGEMEINE ZELLPARAMETER UND SYSTEMATISCHE UNTERSUCHUNG DER
PERFORATED PATCH-TECHNIK 57
3.1.1.1 ALLGEMEINE ZELLPARAMETER 57
3.1.1.2 SYSTEMATISCHE UNTERSUCHUNG DER PERFORATED PATCH-TECHNIK 59
3.1.2 VERAENDERUNGEN DER ERREGBARKEIT VON KOERNERZELLEN DES MURINEN
GYRUS DENTATUS DURCH A-DENDROTOXIN 61
3.1.3 VOLTAGE-CLAMP-CHARAKTERISIERUNG DES DTX-SENSITIVEN STROMS
MURINER KOERNERZELLEN 64
3.1.4 EINFLUSS VON DTX AUF INTEGRATIVE EIGENSCHAFTEN VON KOERNERZELLEN 66
3.1.5 DTX-VERMITTELTE EFFEKTE AUF AP-PARAMETER MURINER KOERNERZELLEN 70
3.1.6 REGULATION DER KV 1.1 EXPRESSION IN EPILEPTISCHEN MURINEN
KOERNERZELLEN 72
3.1.7 LOKALISATION VON KVL.L IN IPSI- UND KONTRALATERALEN KA-INJIZIERTEN
MURINEN HIPPOCAMPI 77
3.1.8 UNTERSUCHUNGEN DER DTX-EFFEKTE IN ORGANOTYPISCHEN
HIPPOCAMPALEN SCHNITTKULTUREN DER MAUS 79
3.1.8.1 ENTWICKLUNG VON AP-LATENZ UND KV 1.1
-EXPRESSION IN OHCS
IN UND NACH DER AKUTEN KAINATAPPLIKATION 80
3.1.8.2 VIABILITAET VON OHCS NACH KAINATAPPLIKATION UND DTX 82
3.1.9 VERTEILUNG DER ERREGBARKEIT DER KOERNERZELLEN ZWISCHEN HILUS
UND MOLEKULARSCHICHT 83
3.2 ZWEITES HAUPTKAPITEL: I
H
UND
KIR-VERMITTELTE INTRINSISCHE PLASTIZITAET IN HUMANEN
KOERNERZELLEN IN DER MTLE 85
3.2.1 ALLGEMEINE ZELLPARAMETER UND UNTERSUCHUNG PASSIVER EIGENSCHAFTEN
MENSCHLICHER KOERNERZELLEN 85
3.2.1.1 ALLGEMEINE ZELLPARAMETER 85
3.2.1.2 EINFLUSS DER MORPHOLOGIE VON MHS UND SHS-ZELLEN
AUF KAPAZITAET UND RI* 86
3.2.2 HCN UND KIR-VERMITTELTE STROEME EPILEPTISCHER MENSCHLICHER
KOERNERZELLEN 88
3.2.3 HCN1 UND KIR2.2-KANAELE: VERTEILUNG AUF PROTEINEBENE IM
EPILEPTISCHEN
GYRUS DENTATUS 91
3.2.4 VOLTAGE-CLAMP-BIOPHYSIKALISCHE EIGENSCHAFTEN DES I
H
IN HUMANEN KOERNERZELLEN DES GYRUS DENTATUS 94
3.2.5 REGULATION VON ZELLULAERER ERREGUNG MENSCHLICHER KOERNERZELLEN DURCH
DEN I
H
....
96
3.2.6 I
H
UND KIR IM HINBLICK AUF HIPPOCAMPALE OSZILLATIONEN 101
3.2.7 HCN UND KIR-VERMITTELTE EPSP-SUMMATION IN KOERNERZELLEN 102
4 DISKUSSION 108
4.1 ZUM ERSTEN HAUPTKAPITEL:
UNTERSUCHUNGEN AN KOERNERZELLEN DES
GYRUS DENTATUS IM MURINEN INTRAHIPPOCAMPALEN KAINAT-EPILEPSIEMODELL 109
4.1.1 RELEVANZ DES MURINEN INTRAHIPPOCAMPALEN KAINAT-EPILEPSIEMODELLS IM
VERGLEICH ZU HUMANER MTLE 110
4.1.2 IDENTITAET DER I
D
-VERMITTELNDEN KVL-UNTEREINHEITEN IN HIPPOCAMPALEN
KOERNERZELLEN DER MAUS 111
4.1.3 REVERSIBLE REGULATION DES I
D
IN KOERNERZELLEN IN ORGANOTYPISCHEN
HIPPOCAMPALEN SCHNITTKULTUREN 114
4.1.4 LOKALISATION VON KVL. 1-UNTEREINHEITEN IN MURINEN KOERNERZELLEN
DES HIPPOCAMPUS 116
4.1.5 FUNKTIONELLE ASPEKTE DER KVL-KANALFAMILIE IN MURINEN KOERNERZELLEN
DES GYRUS DENTATUS 117
4.1.6 UNTERSCHIEDLICH ERREGBARE SUBPOPULATIONEN VON KOERNERZELLEN IM
GYRUS DENTATUS DIFFERIEREN IN DER IO-EXPRESSION 121
4.2 ZUM ZWEITEN HAUPTKAPITEL: UNTERSUCHUNGEN AN HUMANEN KOERNERZELLEN AUS
HIPPOCAMPUS-RESEKTATEN VON PATIENTEN MIT MESIALER
TEMPORALLAPPENEPILEPSIE 123
4.2.1 DER I
H
IN MENSCHLICHEN
HIPPOCAMPALEN KOERNERZELLEN 123
4.2.2 FUNKTIONELLE EINFLUESSE VON HCN UND KIR IN KOEMERZELLEN
DES HUMANEN GYRUS DENTATUS 125
4.2.3 BIOPHYSIKALISCHE EIGENSCHAFTEN ZD7288-SENSITIVER STROEME IN
KOERNERZELLEN DES MENSCHEN 127
4.2.4 DIE EXPRESSION VON HCN1 IN MENSCHLICHEN KOERNERZELLEN IST IN
DER EPILEPSIE VERAENDERT 128
4.3 KONSEQUENZEN UND RELEVANZ DER HOMOEOSTATISCHEN
IONENKANALREGULATION IN HIPPOCAMPALEN KOERNERZELLEN 130
5 LITERATUR 132
X
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