Polysialylierungsstatus am weiblichen Reproduktionstrakt der Katze und der Maus:
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|---|---|
| Format: | Thesis Book |
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| Published: |
Giessen
VVB Laufersweiler Verlag
2018
|
| Edition: | 1. Auflage |
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 3
2 Literaturübersicht 4
2 1 Polysialinsäuren 4
211 Struktureller Aufbau 4
212 Biosynthese 5
2 2 Das neurale Zelladhäsionsmolekül NCAM 11
221 Struktureller Aufbau und biologische Bedeutung 11
2 3 PolySia-NCAM 13
231 Posttranslationale Polysialylierung von NCAM 13
232 Biologische Bedeutung von PolySia-NCAM und PolySia 14
2 4 Der feline und murine weibliche Reproduktionstrakt 18
241 Anatomischer und histologischer Aufbau von Eileiter und Eierstock 18
242 Follikelatresie 26
2 5 Zyklus der Hauskatze 28
2 6 Zyklus der Hausmaus 30
3 Material und Methoden 32
3 1 Probenmaterial 32
3 2 Biologische Materialien 32
321 Zelllinie 32
322 Antikörper 33
323 Enzyme 35
324 Verwendete Stimulantien der kultivierten Zellen 36
3 3 Verbrauchsmaterialien, Chemikalien und Zellkulturzusätze 36
331 Verbrauchsmaterialien 36
332 Chemikalien, Nährmedien und Zusätze für die Zellkultur 36
3 4 Zykluseinteilung 37
341 Katze 37
342 Maus 37
3 5 Histologische Methoden 38
351 Aufarbeitung von Gewebeproben 38
352 Vorbereitung der Objektträger 39
353 Färbemethoden 40
354 Permanentes Eindeckeln von histologischen Schnitten 42
355 Morphologische Klassifizierung von Zelltypen und Tertiärfollikeln 43
3 6 Zellbiologische Methoden 44
361 Gewinnung und Kultivierung primärere feliner Granulosazellen 45
362 Inkubation feliner Granulosazellen 47
363 Zellfixierung und Immunfluoreszenzfärbung von Granulosazellen 47
3 7 Proteinanalytische Methoden 48
371 Probenvorbereitung 49
372 Affinitätsaufreinigung 50
373 Enzymatische Spaltungen 53
374 SDS-PAGE 53
375 Western Blot 56
376 Immunlokalisation 56
3 8 Nachweis der Proteinexpression 58
381 Aufarbeitung der mRNA und cDNA-Synthese 58
382 Semiquantitative Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 59
383 Agarose-Gelelektrophorese 60
3 9 Kettenlängenbestimmung amp; HPLC 61
4 Ergebnisse 63
4 1 Polysialinsäuren in felinem Gewebe des weiblichen Reproduktionstraktes
adulter Tiere 63
411 Lokalisation von PolySia in felinem Gewebe des Reproduktionstraktes 63
412 Nachweis von Polysialinsäuren in Gewebshomogenaten 66
413 Bestimmung des Grads der Polysialylierung von NCAM 68
414 Nachweis von Transkripten der Polysialyltransferasen 69
415 Identifizierung des PolySia-Trägerproteins 70
416 Lokalisation von NCAM in felinem ovariellem Gewebe 72
417 Untersuchung der biologischen Funktion von PolySia-NCAM-140 74
4 2 Polysialinsäuren in murinem Gewebe des weiblichen Reproduktionstraktes
adulter Tiere 78
421 Lokalisation von PolySia in murinen Gewebe des Reproduktionstraktes 78
422 Nachweis von Polysialinsäuren in murinen Gewebshomogenaten 79
4 3 Nachweis von PolySia in murinem und felinem Gewebe fetaler bzw
postnataler Proben des weiblichen Reproduktionstraktes 81
5 Diskussion 84
5 1 Diskussion der Fragestellung 84
5 2 Diskussion der Methodik 85
521 Wahl der Modellorganismen 85
522 Wahl der Methoden 86
5 3 Diskussion der Ergebnisse 94
531 PolySia-NCAM-140 bei der Hauskatze 94
532 PolySia-NCAM bei der Hausmaus 98
533 PolySia in felinem fetalem bzw murinem postnatalem Gewebe 99
5 4 Schlussbetrachtung und Ausblick 102
6
Zusammenfassung
104
7 Summary 106
8 Abkürzungsverzeichnis 108
9 Abbildungsverzeichnis 112
10 Tabellenverzeichnis 114
11 Literaturverzeichnis 115
12 Anhang 134
12 1 Verwendete Materialien, Laborgeräte und Software 134
13 Veröffentlichungen und Kongressbeiträge 138
Ehrenwörtliche Erklärung 140
Danksagung
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