Verfügbarkeit: Die Rolle der Leukozyteninfiltration im Gehirn für die Entstehung von Anfällen im Theiler Virus-Modell der Temporallappenepilepsie

Die Rolle der Leukozyteninfiltration im Gehirn für die Entstehung von Anfällen im Theiler Virus-Modell der Temporallappenepilepsie:

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Käufer, Christopher 1986- (VerfasserIn)
Format:	Abschlussarbeit Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	Gießen DVG Service GmbH 2017
Ausgabe:	1. Auflage
Schlagworte:	thesis leucocytes epilepsy viruses pathophysiology Hochschulschrift
Online-Zugang:	Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis
Beschreibung:	viii, 222 Seiten Illustrationen, Diagramme 21 cm
ISBN:	9783863453664

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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG..................................................................................................................... 1 2 STAND DER FORSCHUNG.................................................................................................3 2.1 DEFINITION EPILEPSIE ................................... . .............................................................. 3 2.2 AETIOLOGIE.......................................................................................................................4 2.2.1 VIRUS-BEDINGTE EPILEPSIEN .............................. .........................................................5 2.3 EPILEPTOGENESE...........................................................................................................9 2.4 BEHANDLUNG, PHARMAKORESISTENZ UND PRAEVENTION VON EPILEPSIE .......... .......... . 9 2.5 ENTZUENDUNG UND EPILEPSIEN......................................................................................11 2.5.1 MIKROGLIA UND MONOZYTEN/MAKROPHAGEN............................................................... 16 2.5.2 DIFFERENZIERUNG ZWISCHEN MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN SOWIE DEREN CHARAKTERISIERUNG MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE...................................................18 2.5.3 CX3CR1-REPORTER-MAEUSE...........................................................................................21 2.5.4 BEEINFLUSSUNG VON MIKROGLIA/MAKROPHAGEN .......................................................... 23 2.6 TIERMODELLE IN DER EPILEPSIEFORSCHUNG .................................................................. 24 2.6.1 DAS TMEV-INDUZIERTE EPILEPSIE-MODELL................................................................. 26 2.6.2 THEILERS MURINES ENZEPHALOMYELITIS VIRUS.............................................................29 3 ZIELE UND ARBEITSHYPOTHESEN................................................................................... 31 3.1 STUDIE 1: ETABLIERUNG DES TMEV-MODELLS..............................................................31 3.2 STUDIE 2: CHARAKTERISIERUNG DER ENTZUENDUNGSANTWORT, NEURODEGENERATION UND KORRELATION MIT ANFAELLEN ................................................ 32 3.3 STUDIE 3: TRANSGENE VERAENDERUNG DER ENTZUENDUNGSZELLEN.................................33 3.4 STUDIE 4: VERGLEICHENDE UNTERSUCHUNGEN ZWISCHEN BEAN-1 UND BEAN-2 ..... 34 4 MATERIAL UND METHODEN............................................................................................. 35 4.1 TIERE............................................................................................................ 35 4.1.1 TRANSGENE TIERE........................................................................................................ 36 4.2 VIREN............................................................................................................................ 37 4.3 INFEKTION.......................................................................................................................39 4.3.1 STEREOTAKTISCHE INFEKTION..........................................................................................39 4.3.2 FREI-HAND-INFEKTION ........................ 42 4.4 KLINISCHE UNTERSUCHUNG............................................................................................44 4.5 ANFALLSUEBERWACHUNG............................. 45 4.6 EEG-A/IDEO-UEBERWACHUNG............................................................ 46 4.6.1 IMPLANTATION DER EEG-ELEKTRODEN........................................................................... 46 4.6.2 EEG-UEBERWACHUNG...................................................................................................49 4.6.3 EEG-AZIDEOAUSWERTUNG............................................................................................ 51 4.7 HISTOLOGIE..................................................................................................................... 53 4.7.1 PERFUSION UND HISTOLOGISCHE BEARBEITUNG..............................................................53 4.7.2 FAERBUNGEN...................................................................................................................55 4.7.3 IMMUNHISTOCHEMIE.................................................................................................... 56 4.7.4 AUSWERTUNG................................................................................................................ 57 4.7.4.1 NEURODEGENERATION..................................................................................................... 57 4 7.4.2 CD3 UND C D 45R ........................................................................................................ 59 4.7.4.3 MAC3..............................................................................................................................59 47 .4.4 RUECKENMARKSVERAENDERUNGEN.................................................................................. 60 4.8 VIRUS-SEQUENZIERUNG.................................................................................................61 4.9 DETEKTION UND QUANTIFIZIERUNG VON VIRUS-RNA.....................................................61 4.10 DURCHFLUSSZYTOMETRIE (FACS).................................................................................. 63 4.10.1 ISOLIERUNG DER ZELLEN..................................................................................................64 4.10.2 ZELLMESSUNG............................................................................................................... 66 4.10.3 NORMIERUNG UND DARSTELLUNG DER DATEN ................................................................. 68 4.11 STATISTISCHE AUSWERTUNG........................................................................................... 69 5 ERGEBNISSE..................................................................................................................71 5.1 STUDIE 1: ETABLIERUNG DES TMEV-MODELLS.............................................................. 71 5.1.1 ANFAELLE......................................................................................................................... 71 5.1.1.1 BEAN-1......................................................................................................................... 71 5.1.1.2 BEAN-2......................................................................................................................... 74 5.1.1.3 D A .................................................................................................................................75 5.1.2 KLINISCHES BILD............................................................................................................79 5.2 STUDIE 2: CHARAKTERISIERUNG DER ENTZUENDUNGSANTWORT, NEURODEGENERATION UND KORRELATION MIT ANFAELLEN ................................................ 83 5.2.1 HIPPOCAMPALE NEURODEGENERATION......................................................................... 83 5.2.2 ENTZUENDUNG................................................................................................................ 88 5.2.2.1 T-LYMPHOZYTEN............................................................................................................88 5.2.22 B-LYMPHOZYTEN ................................................. ........................................................94 5 2.2.3 AKTIVIERTE MIKROGLIA / MAKROPHAGEN.........................................................................98 5.2.3 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN............................................................103 5.2.3.1 B6-WILDTYP-MAEUSE...................................................................................................... 103 5.2.3.1.1 CHARAKTERISIERUNG DER CX3CR1 -/LY6C-EXPRESSION...............................................106 5.2.3.1.2 CHARAKTERISIERUNG DER CD86-/CD206-EXPRESSION.................................................112 5.2.32 CX3CR1-REPORTER-MAEUSE.............................................................................................117 5.2.3.2.1 CHARAKTERISIERUNG DER CX3CR1 -/LY6C-EXPRESSION ............................................. 123 5.2.3.2 2 CHARAKTERISIERUNG DER CD86-/CD206-EXPRESSION.................................................127 5.2.4 ROC-ANALYSEN: TEST AUF PRAEDIKTIVITAET...................................................................... 131 5.3 STUDIE 3: TRANSGENE VERAENDERUNG DER ENTZUENDUNGSZELLEN ................................. 134 5.3.1 CCR2-KO-MAEUSE.........................................................................................................134 5.3.1.1 ANFAELLE................................................................................................................... 134 5.3.1.2 NEURODEGENERATION......................................................................................................137 5.3.1.3 AKTIVIERTE MAKROPHAGEN/MIKROGLIA ...................... .138 5.3.2 CX3CR/-KO-MAEUSE.......................................................................................................140 5.3.2.1 ANFAELLE...........................................................................................................................140 5.3.2.2 NEURODEGENERATION.................................................................. 143 5.3.2.3 AKTIVIERTE MAKROPHAGEN / MIKROGLIA........................................................................144 5.4 STUDIE 4: VERGLEICHENDE UNTERSUCHUNGEN ZWISCHEN BEAN-1 UND BEAN-2 ...... 146 5.4.1 VIRUS-SEQUENZIERUNG.................................................................................................146 5.4.2 DETEKTIERUNG UND QUANTIFIZIERUNG VON VIRUS-RNA ............................................... 148 5.4.3 RUECKENMARKSVERAENDERUNGEN..................................................................................149 6 DISKUSSION.................................................................................................................... 153 6.1 STUDIE 1: ETABLIERUNG DES TMEV-MODELLS..............................................................153 6.1.1 AUSBLEIBENDE ANFAELLE NACH BEAN-1-INFEKTION ....................................................... 153 6.1.2 EINFLUSS VON B6-MAUS-UNTERSTAEMMEN BEI BEAN-1-INFEKTION ............................. 154 6.1.3 UNTERSUCHUNG WEITERER TMEV-(UNTER)STAEMME AUF ANFALLSENTWICKLUNG ............. 156 6.1.4 EINFLUSS VON MAUSUNTERSCHIEDEN BEI BEAN-2- UND DA-INFEKTION.......................159 6.1.5 EINFLUSS DES APPLIKATIONSORTES.................................................................................160 6.1.6 KLINISCHE UNTERSCHIEDE ZWISCHEN VIRUSSTAEMMEN ................................ 161 6.2 STUDIE 2: CHARAKTERISIERUNG DER ENTZUENDUNGSANTWORT, NEURODEGENERATION UND KORRELATION MIT ANFAELLEN ................................................ 162 6.2.1 UNTERSCHIEDE HIPPOCAMPALER NEURODEGENERATION POST INFECTIONEM ................... 162 6.2.2 VERHALTEN VON ZELLEN DES ERWORBENEN IMMUNSYSTEMS ...................................... 165 6.2.3 VERHALTEN VON ZELLEN DES ANGEBORENEN IMMUNSYSTEM ...................................... 167 6.2.3.1 DIE ROLLE DES ANGEBORENEN IMMUNSYSTEMS IM TMEV-MODELL ............................ 167 6 2.3.2 MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN IM TMEV-MODELL ................... 168 6.2.3.2.1 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN VON MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN NACH TMEV-INFEKTION................................................................................................. 168 6.2.3.3 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN UND CHARAKTERISIERUNG VON MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN NACH TMEV-INFEKTION IN B6-WILDTYP-MAEUSEN.... 170 6.2.3.3.1 CHARAKTERISIERUNG UEBER CX3CR1 -/LY6C-EXPRESSION ............................................ 171 6.2.3.3 2 CHARAKTERISIERUNG UEBER CD86/CD206 (M1/M 2) ..................................................... 171 6.2.3 4 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN VON MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN NACH TMEV-INFEKTION IN CX3CR1 -REPORTER-MAEUSEN ............................................. 173 6.2.3.4.1 CHARAKTERISIERUNG UEBER CX3CR1 -/LY6C-EXPRESSION ............................................ 174 6.2.3.4.2 CHARAKTERISIERUNG UEBER CD86/CD206 (M 1/M 2) ..................................................... 174 6.2.3.5 DIE ROLLE VON MIKROGLIA UND MAKROPHAGEN IN ANDEREN MODELLEN ....................... 174 6.3 STUDIE 3: TRANSGENE VERAENDERUNG DER ENTZUENDUNGSZELLEN ................................. 177 6.3.1 CCR2-KO-MAEUSE.........................................................................................................177 6.3.2 CX3CR7-KO-MAEUSE..................................................................................................... 181 6.4 STUDIE 4: VERGLEICHENDE UNTERSUCHUNGEN ZWISCHEN BEAN-1 UND BEAN-2.......184 7 ZUSAMMENFASSUNG.................................................................................................... 189 8 SUMMARY..................................................................................................................... 190 9 LITERATURVERZEICHNIS................................................................................................... 191 10 TABELLENVERZEICHNIS...................................................................................................209 11 ABBILDUNGSVERZEICHNIS.............................................................................................. 210 12 ANHANG........................................................................................................................ 212 13 DANKSAGUNGEN ................................................. 221
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